авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
-- [ Страница 1 ] --

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

«Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии» УГСХА

Ульяновская МОО «Ассоциация

практикующих ветеринарных врачей»

«Актуальные проблемы

инфекционной патологии и

биотехнологии»

Материалы III-й межвузовской студенческой научной конференции

30-31 марта 2010 года

Ульяновск 2010 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 631 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии / Материалы III-й межвузовской студенческой научной конференции. – Ульяновск: УГСХА, 2010.– 96 с.

Сборник содержит материалы исследований студентов ВУЗов Приволжского федерального округа по актуальным проблемам микробиологии, вирусологии, иммунологии, ветеринарно-санитарной экспертизы, товароведению и биотехнологии. Рассмотрены вопросы диагностики, лечения и профилактики инфекционных заболеваний людей и животных. Приводятся современные методы исследования пищевых продуктов и их санитарная оценка.

Материалы сборника рекомендованы для научных сотрудников, преподавателей, аспирантов, студентов биологических, медицинских и ветеринарных специальностей.

Редакционная коллегия:

Д.А. Васильев, зав.каф.МВЭиВСЭ (гл. редактор), С.Н. Золотухин, декан ФВМ (зам. гл. редактора), Ю.Б. Васильева, отв. по НИРС каф.МВЭиВСЭ (отв. редактор) Авторы опубликованных статей несут ответственность за патентную чистоту, достоверность и точность приведённых фактов, цитат, статистических данных и прочих сведений. Статьи приводятся в авторской редакции.

© ФГОУ ВПО «УГСХА», кафедра МВЭиВСЭ Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Вступление Дорогие коллеги!

Данная Межвузовская студенческая научная конференция стала доброй традицией кафедры и проводится уже в 3-й раз. Понимая, что процесс преподавания неразрывно связан с постижением нового, повышением своей квалификации, коллективом кафедры накоплен многолетний опыт проведения фундаментальных и прикладных научных исследований.

Студенты активно занимаются научно-исследовательской работой на кафедре в научно-исследовательском инновационном центра микробиологии и биотехнологии.

Ежегодно студенты-кружковцы принимают участие в научных конференциях, ветеринарных конгрессах, организуемых «Всероссийской Ассоциацией ветеринарных врачей» и «Ассоциацией ветеринарных врачей Татарстана» (Москва, Казань). На базе ветеринарной клиники «Друг» кружковцы проходят производственную практику, параллельно выполняя научно-исследовательскую работу. Многие студенты, занимающиеся НИР на кафедре, в дальнейшем продолжают свои исследования в аспирантуре кафедры либо крупных научных центов России.

В настоящий момент область научных интересов кафедры включает в себя исследования этиологической роли малоизученных энтеробактерий в инфекционной патологии сельскохозяйственных животных, их значимость в пищевых инфекциях людей. Ведётся разработка диагностических и лечебно профилактических фаговых препаратов. Следующим направлением является исследование малоизученных инфекционных заболеваний домашних животных.

Научно-исследовательская работа также направлена на изучение очаговых инфекций зооантропонозного характера на территории Ульяновской области и создание кадастров указанных инфекций.

Отрадно отметить, что в конференции принимают участие студенты вузов Приволжского федерального округа. Ведь благодаря таким мероприятиям значительно укрепляются межвузовские связи, расширяется научное сотрудничество молодого поколения, формируется научное сообщество.

Желаю всем участникам конференции успехов в реализации своего научного потенциала, жизненного оптимизма и здоровья!

Заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ УГСХА, директор НИИМиБ, президент УМОО «Ассоциация практикующих ветеринарных врачей», академик РАЕН, д.б.н., профессор Д.А. Васильев Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Секция «Новые методы исследований в микробиологии»

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СОВРЕМЕННЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ДИСБАКТЕРИОЗА Е.К. Лежнева - 5 курс, биологический факультет Научный руководитель - к.б.н., доцент Е.В. Глинская ГОУ ВПО «Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского»

В последние годы пробиотические препараты все чаще применяются при комплексной терапии ряда патологических состояний, протекающих на фоне нарушенной нормальной микрофлоры организма человека. Пробиотики, в состав которых могут входить микробные клетки, их компоненты или метаболиты, оказывают позитивное влияние на физиологические, биохимические и иммунные реакции организма хозяина через стабилизацию и оптимизацию функций его нормальной микрофлоры. Для коррекции дисбактериоза кишечника человека в настоящее время применяют препараты на основе бифидо- и лактобактерий [1, 2].

Целью настоящей работы являлось изучение биологических свойств молочнокислых бактерий пробиотических препаратов, ориентированных на лечение дисбактериоза.

Материалы и методы. Материалом для исследования служили пробиотические препараты: «Аципол», в состав которого входят лиофилизированные бактерии Lactobacillus sp.;

«Лактобактерин (сухой)»

(Lactobacillus sp.);

«Линекс» (Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium infantis, Enterococcus faecium);

«Гастрофарм» (Lactobacillus delbrueckii subsp.

bulgaricus);

«Хилак Форте», содержащий беззародышевые водные субстраты продуктов обмена веществ E. coli DSM 4087, Streptococcus faecalis DSM 4086, Lactobacillus acidophilus DSM 4149, Lactobacillus helveticus DSM 4183;

«Нарине Форте» (Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum). Образцы для исследования доставляли из аптек в герметичных упаковках. Бактериологические посевы осуществляли общепринятыми микробиологическими методами [3]. Инкубирование проводили в эксикаторах при температуре +37С. Для выделения и культивирования молочнокислых бактерий использовали элективные питательные среды: Лактобакагар (г. Оболенск);

ГРМ-агар с добавлением 5% глюкозы;

экспериментальные среды различного состава. Изучение культуральных, морфологических, тинкториальных, биохимических свойств микроорганизмов проводили на первичных посевах и на полученных чистых культурах. Характер колоний изучали макроскопически и под бинокулярной лупой, морфологию бактерий – микроскопически. Антагонистические свойства по отношению к различным тест-культурам (Escherichia coli 113-13, Bacillus subtilis 6633, Bacillus cereus 8035, Staphylococcus аureus 209Р, Candida albicans 184;

ГИСК им. Л.А. Тарасевича) определяли методом агаровых блочков. Для этого исследуемую культуру молочнокислых бактерий высевали Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сплошным «газоном» на поверхность питательной среды в чашки Петри и инкубировали в течение суток. Затем стерильным сверлом вырезали агаровые блочки с бактерильным газоном и переносили их на поверхность агаризованной среды, предварительно засеянной тест-микроорганизмом. В случае с пробиотиком «Хилак Форте» на сплошном «газоне» с тест культурами стерильным сверлом вырезали отверстие и в него вносили 0.1 мл исследуемого пробиотика. Затем чашки помещали на 24 ч в термостат при температуре, благоприятной для развития тест-организма. Устойчивость выделенных молочнокислых бактерий к различным по химическому строению группам антибиотиков определяли диффузионным методом. В работе использовали аминогликозиды (стрептомицин, мономицин, неомицин), макролиды (эротромицин, олеандомицин), бета-лактамы (бензилпенициллин, оксациллин, карбенициллин), ароматические антибиотики (левомицитин).

Результаты исследований. В ходе исследований были выделены чистые культуры молочнокислых бактерий. По морфологии они были представлены грамположительными палочками, преимущественно небольших размеров. На плотных питательных средах образовывали круглые непигментированные колонии, небольшого размера, с гладкой поверхностью.

Большинство выделенных штаммов сбраживали глюкозу, фруктозу, маннозу, сахарозу, однако не обладали способностью к ферментации арабинозы, маннита и ксилозы. Каталазу и оксидазу не образовывали. На основании изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств выделенные штаммы были отнесены к роду Lactobacillus [4]. Для дальнейших исследований были отобраны 5 штаммов бактерий из различных пробиотических препаратов.

На следующем этапе работы были изучены антагонистические свойства выделенных молочнокислых бактерий. Результаты исследований позволили выяснить, что тест-культуры Escherichia coli 113-13, Bacillus subtilis 6633, Bacillus cereus 8035, Staphylococcus аureus 209Р, Candida albicans чувствительны к антибактериальным веществам выделенных штаммов молочнокислых бактерий. Максимальное подавляющее действие на тест культуры оказали штаммы бактерий, изолированные из пробиотиков «Линекс»

и «Нарине Форте». Антагонистическое действие указанных культур наблюдалось в отношении бактерий S. аureus 209Р и B. subtilis 6633.

Минимальная антагонистическая активность была характерна для штаммов, выделенных из препарата «Аципол». Наиболее чувствительными к действию пробиотических препаратов оказались тест-культуры S. аureus 209Р и B.

subtilis 6633. Бактерии B. сereus 8035 оказались более устойчивы к антибактериальным веществам исследуемых культур молочнокислых бактерий. Выраженное антагонистическое действие на грибы C.albicans проявили водные субстраты продуктов обмена веществ различных микроорганизмов, входящих в состав препарата «Хилак Форте» (табл. 1).

Изучение чувствительности выделенных штаммов молочнокислых бактерий к различным по химическому строению антибиотикам показало, что выраженный антибактериальный эффект проявили антибиотики группы Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии макролидов и бета-лактамов. К эритромицину оказались чувствительными штаммы Lactobacillus sp. 1 и Lactobacillus sp. 5, к бензилпенициллину – штаммы Lactobacillus sp. 1, Lactobacillus sp. 3, Lactobacillus sp. 5, к карбенициллину были чувствительны все исследуемые культуры. Однако олеандомицин, относящийся к группе макролидов, не оказывал выраженного бактерицидного действия на исследуемые культуры. К аминогликозидам и ароматическим антибиотикам оказались устойчивы все штаммы молочнокислых бактерий, выделенные из пробиотических препаратов.

Сравнивая антибиотикограммы отдельных культур лактобактерий, можно отметить, что штаммы Lactobacillus sp. 2 и Lactobacillus sp. 4 были чувствительны только к одному из предложенных антибиотиков.

Таблица Антагонистические свойства молочнокислых бактерий, выделенных из пробиотических препаратов (d зоны подавления, мм) Название Тест-культуры пробиотического Штаммы S. аureus E. coli B. subtilis B. сereus C. albicans Препарата 209Р 113-13 6633 8035 Lactobacillus «Аципол» 23±1.0 25±2.6 27±1.5 22±0.8 22±0. sp. Lactobacillus «Лактобактерин» 25±0,6 25±1.8 26±1.8 23±1.6 21±1. sp. Lactobacillus «Линекс» 27±1.3 25±1.2 26±1.0 21±1.7 25±1. sp. Lactobacillus «Гастрофарм» 26±1.8 24±1.4 25±1.4 20±2.0 25±1. sp. Lactobacillus «Нарине Форте» 27±2.1 20±1.3 26±1.2 25±1.3 25±1. sp. «Хилак Форте» - 25±1.6 23±2.0 21±2.6 27±1.8 26±2. Выводы. Таким образом, лактобациллы современных пробиотических препаратов проявляют выраженную антагонистическую активность в отношении тест-микроорганизмов. Особо следует отметить чувствительность микроорганизмов S. аureus и C. albicans, являющихся в ряде случаев возбудителями дисбактериоза кишечника. Устойчивость к большинству исследуемых антибиотиков проявили штаммы лактобактерий Lactobacillus sp.

2 и Lactobacillus sp. 4, что позволяет использовать при коррекции дисбактериоза пробиотики «Лактобактерин» и «Гастрофарм» наряду с антибиотиками.

Литература Добрынин А.Ф., Шендеров Б.А. Функциональное питание. – М.: Грантъ, 2002. – 296 с.

1.

Глушанова Н.А. Лактобациллы в исследовании и коррекции резидентной микрофлоры 2.

человека: Автореф. дис. … канд. мед. наук. Челябинск, 1999. 29 с.

Нетрусов А.И., Егорова М.А., Захарчук Л.М. и др. Практикум по микробиологии: Учеб.

3.

пособие для студ. высш. учеб. заведений / Под ред. А.И. Нетрусова. – М.: Академия, 2005. – 608 с.

Краткий определитель бактерий Берги / Под ред. Дж. Хоулта. – М.: Мир, 1980. – 496 с.

4.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ И МОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕНКИ ЖЕЛУДКА ИНТАКТНЫХ НЕИНБРЕДНЫХ БЕЛЫХ КРЫС А.М. Сухих - 3 курс, факультет ветеринарной медицины Научные руководители: В.В. Неклюдова, М.В. Черанева ФГОУ ВПО «Пермская ГСХА им. Ак. Д.Н. Прянишникова В последние годы наметились новые направления в исследовании гистологического строения слизистой оболочки желудка человека и млекопитающих и, в частности, белых крыс. При этом на сегодняшний день информация в данной области еще весьма неполная. Требуют уточнения и даже детального исследования многие гистологические аспекты в строении стенки желудка неинбредных белых крыс, широко применяемых российскими исследователями в экспериментальных целях, что и определило цель настоящей работы.

Цель исследования – с использованием гистологических и морфометрических методов дать подробное описание строения стенки желудка неинбредной белой крысы.

Материалы и методы. В эксперименте использовано 25 неинбредных белых крыс четырехмесячного возраста мужского и женского пола, имеющих среднюю массу тела 177,5±9,7 г и содержащихся в стандартных условиях экспериментально-биологической клиники (вивария): свободный доступ к пище и воде и 12-14-часовой световой день. Животные получали типовой рацион вивария в соответствии с нормами, утвержденными приказом Министра здравоохранения СССР от 10 марта 1966 г. № 163 и Приказом Минздрава СССР от 10.10.83 № 1179, п. 4.1. Экспериментальные исследования выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N 755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

По окончании исследований животных выводили из эксперимента путем декапитации под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии, и осуществляли забор образцов исследуемого материала. Желудок забирали целиком, фиксировали в 10% забуференном по Лилли формалине (рН-7,2).

Гистологические препараты приготовлены в соответствие со стандартными гистологическими методиками. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином и пикрофуксином по ван Гизону.

Количественный (морфометрический) анализ исследуемых образцов стенки желудка проводили при помощи окуляр-микрометра и при помощи специализированного программного обеспечения для медицины и биологии BioVision, version 4,0 (Австрия). В каждом препарате проводили от 5 до измерений, после чего вычисляли средние величины и стандартные отклонения для каждого животного и средние величины по группам.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Результаты исследований. Стенка желудка интактных животных представлена слизистой оболочкой, подслизистой основой, мышечной и серозной оболочками. Слизистая оболочка желудка (СОЖ) крысы в пищеводном отделе образована многослойным ороговевающим эпителием, в котором визуализируется до 5 слоев, собственной соединительнотканной пластинкой и мышечной пластинкой слизистой оболочки. В части препаратов нечетко определяется блестящий слой. В ряде препаратов хорошо визуализируется переход многослойного эпителия в железистую часть.

Слизистая оболочка железистой (фундальной, кардиальной и пилорической) части представлена однослойным однорядным цилиндрическим эпителием, выстилающим желудочные ямки, в основание которых открываются железы желудка. Собственная пластинка слизистой оболочки заполнена трубчатыми железами желудка, состоящими из главных, париетальных, слизистых, камбиальных клеток и клеток APUD-системы. В собственной пластинке слизистой желудка крысы местами определяются диффузно расположенные лейкоциты, среди которых преобладают лимфоциты и полинуклеарные клетки.

Мышечная пластинка и мышечная оболочка желудка образованы гладкомышечными клетками. Клетки мышечной пластинки расположены в один слой. Подслизистая основа, представленная соединительной тканью, не содержит желез. В ней находятся сосудистые сплетения и нервное подслизистое сплетение Мейсснера. В большинстве препаратов мышечная оболочка двухслойная, состоит из внутреннего циркулярного и наружного продольного слоев, между которыми в соединительной ткани располагается межмышечное нервное сплетение Ауэрбаха. Серозная оболочка представлена тонким соединительнотканным слоем, покрытым однослойным плоским эпителием (мезотелием).

Таблица Морфометрические показатели СОЖ интактных неинбредных белых крыс Показатель Интактные неинбредные белые крысы Ширина слизистой оболочки 0,599 ± 0,076 мм в кардиальной части, мм, M±m Ширина слизистой оболочки 0,430 ± 0,128 мм в пилорической части, мм, M±m Длина желудочных желез 0,494 ± 0,077 мм в кардиальной части, мм, M±m Длина желудочных желез 0,374 ± 0,091 мм в пилорической части, мм, M±m Ширина мышечной пластинки слизистой оболочки 0,0157 ± 0,0015мм желудка в пилорической части, мм, M±m Количество обкладочных клеток в фундальных 1,625±0, железах желудка крысы, n, M±m Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Выводы. Строение стенки желудка интактных неинбредных белых крыс соответствует нормальному с учетом особенностей данного вида: в желудке крысы отмечается разделение на безжелезистую и железистую части, имеющих типичный клеточный состав. Охарактеризованы основные морфометрические параметры СОЖ интактных неинбредных белых крыс.

Полученные данные целесообразно использовать в дальнейшем при проведении экспериментальных исследований на неинбредных белых крысах.

ВЫЖИВАЕМОСТЬ A. HYDROPHILA НА ТРАНСПОРТНОЙ СРЕДЕ М.А. Столярова, А.А. Аристархова - 4 курс, факультет ветеринарной медицины, специальность «Микробиология»

Научный руководитель – к.б.н., ассистент Т.И. Канаева ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Бактерии рода Aeromonas были идентифицированы еще в конце XIX века, но длительное время их считали сапрофитами, циркулирующими в воде открытых водоемов. Аэромонады широко распространены в окружающей среде: их выделяют из речной и морской воды, сточных вод, почвы, от гидробионтов (рыб, кальмаров, крабов, креветок и т.п.) Существуют два пути заражения бактерией Aeromonas hydrophila:

кишечный и контактный.

Аэромонады (Aeromonas) - род изогнутых палочковидных, кокковидных или нитевидных аспорогенных монотрихиальных хемоорганотрофных факультативно-анаэробных грамотрицательных эубактерий. Размеры 1-4x2- мкм. Г+Ц 53-63 мол. %. Растут при 20-30 °С, рН 7,0, на простых питательных средах. Некоторые виды способны расти на минеральных средах с источником углерода в виде глюкозы и аргинина. Добавление в среды 7,5 % натрия хлорида замедляет рост Aeromonas. Тип ферментации углеводов бродильный и дыхательный. Непостоянно с образованием кислоты ферментируют глюкозу, мальтозу, трегалозу, крахмал, глицерин, желатин, казеин, продуцируют ДНК азу, оксидазу, каталазу, фосфатазу, выделяют аргининдегидрогеназу, редуцируют нитраты. Не ферментируют адонит, инозит, дульцит, ксилозу, мочевину. Не чувствительны к тетрациклинам, аминогликозидам, полимиксину.

Для транспортировки проб исследуемого материала до лаборатории рекомендуем использовать среду УГСХА-тр.А.h. следующего состава: вода дистиллированная – 1000 мл;

дрожжевой экстракт – 4,0 г;

мальтоза – 3,5 г;

К2НРО4 – 2,0 г;

МgSО4 – 5,0 г;

желатин – 50,0 г;

конго-рот – 3,0 г;

кристаллический фиолетовый – 0,1 г. Данная среда содержит желатин (5 %), уплотняющий среду, и необходимые питательные вещества.

В дальнейших исследованиях определяли температурную устойчивость бактерий Aeromonas hydrophila на среде УГСХА-тр.А.h.. В работе были использованы 1 референс-штамм бактерии Aeromonas hydrophila и 12 штаммов выделенных нами из различных объектов окружающей среды. Рост бактерий Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии проверяли на среде УГСХА-тр.А.h. и плотной селективной среде УГСХА 2А.h., при -4, +5, +30, +41, +45 °С, в течение от 1 до 4 суток. Рост бактерий A.hydrophila при -4 °С не наблюдался, но при высевании из пробирок с замороженными бульонными культурами на агар и инкубации чашек в термостате при оптимальной температуре (30 °С), наблюдался характерный рост бактерий A.hydrophila. Данные бактерии могут находиться в замороженном состоянии на среде УГСХА-тр.А.h. до 12 месяцев, в бытовом холодильнике (при температуре +5 °С) до 4 месяцев. При температуре +5 °С в пробирках со средой УГСХА-тр.А.h. наблюдали рост аэромонад спустя часов, в то время как на чашках, вырастали мелкие колонии уже через 24 часа.

Температура +30 °С является оптимальной для роста бактерий A.hydrophila, спустя 24 часа в пробирках наблюдается характерный рост, а на чашках с УГСХА-2А.h. образование колоний. Температура +41 °С считается не приемлемой для роста аэромонад, однако 10 из 12 проверяемых нами штаммов росли при данной температуре как в пробирках с транспортной средой, так и на чашках с УГСХА-2А.h. Референс-штамм также имел характерный рост на данных средах, спустя 24 часа. А вот при температуре +45 °С не наблюдалось роста ни в пробирках, ни на чашках Петри. Соответственно температурные границы роста бактерий A.hydrophila составляют от +5 °С до +41 °С и выживаемость бактерий на среде УГСХА-тр.А.h. при температуре +5 °С достигает 4 месяцев.

ПОДБОР СРЕД ДЛЯ НАРАЩИВАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ МАССЫ LISTERIA MONOCYTOGENES А.В. Козловский - 4 курс, факультет ветеринарной медицины, специальность «Микробиология»

Научный руководитель – аспирант Д.Н. Хлынов ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии В настоящее время проблема листериоза приобретает все большую актуальность в связи с тем что:

• возрастает значение листериоза в инфекционной патологии.

Увеличивается число зарегистрированных случаев у людей.

• 1,6% клинически здоровых женщин являются носителями патогенных видов листерий;

• растет роль групповой и вспышечной заболеваемости, связанных с потреблением пищевых продуктов. Многочисленные эпидемические вспышки и спорадические случаи листериоза в высокоразвитых странах мира (США, Великобритания, Швейцария, Канада, Франция) были связаны с употреблением готовых продуктов пищевой индустрии (сыры, особенно мягкие, мясные полуфабрикаты, салаты и др.), после чего данное заболевание стали рассматривать как одну из важных пищевых инфекций в мире.

• тяжелым течением заболевания у беременных и новорожденных, пожилых людей, лиц, получающих стероидные препараты, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии иммунодепрессанты, злоупотребляющих алкоголем и наркотиками, ВИЧ инфицированных;

• высоким уровнем летальности при генерализованных формах. Так, из 2518 больных листериозом, выявленных в США в 1997 г., госпитализация больных требовалась в 92% случаев, у 20% наступил летальный исход;

• недостаточными знаниями врачей этой патологии.

Целью исследования стал подбор сред для наращивания бактериальной массы Listeria monocytogenes. В нашем распоряжении имелись бактерии сероваров 1А и 4А, которые относятся к I и II серогруппам листерий.

Материалы и методы. В ходе наших исследований мы использовали следующие среды: мясопептонный бульон (МПБ);

мясопептонный агар (МПА);

Оксфорд – агар и глюкозо-глицериновый агар (МАГГА).

Результаты исследований. Бактериальная культура указанных штаммов хорошо растёт в мясопептонном бульоне (МПБ) при 300С. МПБ в первые сутки слегка мутнеет, помутнение равномерное, при встряхивании пробирки наблюдаются так называемые «муаровые волны». Через 2-4 суток бульон в пробирке светлеет, а на дне её образуется слизистый осадок, который при встряхивании поднимается косичкой. Основной причиной отказа от МПБ, как от среды для наращивания бактериальной массы, послужил большой расход и малая выработка, на 4 мл среды получали 0,02 mg бакмассы.

На мясопептонном агаре (МПА) в первые сутки роста обнаруживают мелкие (0,2-0,5 мм в диаметре), прозрачные в проходящем свете, слегка выпуклые колонии. Через 2-3 суток колонии увеличиваются в размере (до 1- мм в диаметре) становятся более плоскими и приобретают сероватый оттенок при падающем свете. Выработка бактериальной массы весьма удовлетворительна на 4 миллилитра 0,12 мг. Одним из важных плюсов является относительно дешёвая цена среды.

На Оксфорд – агаре с селективными добавками, листерии выращенные в течении суток выглядят как мелкие (1 мм), серые колонии окружённые чёрным ореолом. Через 48 часов колонии становятся более тёмными и увеличиваются в размерах (до 2-х мм в диаметре) с чёрным ореолом и углубленным центром. Важным плюсом этой среды послужила выработка бактериальной массы которая составила на 4 мл 0,15 мг. Недостатком же в свою очередь оказалась высокая стоимость этой селективной среды.

Последней средой подвергшейся нашим изучениям стал глюкозо глицериновый агар. Рост L. monocytagenes на МАГГА во многом схож на рост листерий на МПА, в первые сутки мелкие колонии (от 0,2 мм до 0,5 мм в диаметре) прозрачные на свет слегка выпуклые и гладкие. Количество бактериальной массы выработанной с этой среды составило на 4 мл 0,2 мг. По сравнению с вышеперечисленными, наиболее приемлема.

Выводы. Для наращивания бактериальной массы лучше всего послужит глюкозо-глицериновый агар в связи с его относительно дешёвой стоимостью и высопродуктивной выработки бактериальной массы. МПА и Оксфорд-агар следует использовать как среды для расплодки данной культуры Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии клеток, которую в дальнейшем мы будем использовать при разработке метода иммуноферментного анализа листериоза.

Литература 1. Актуальность проблемы, этиология и эпидемиология листериоза http://www.infekcii.net/aktualnost-problemy-etiologiya-i-epidemiologiya-listerioza/#more 3552.

2. Бакулов И.А Котляров В.М. Васильев Д.А. Белоусов В.Е. О серологической диагностике листериоза // Ветеринария, 1988, №10. - С-64-65.

3. Бакулов И.А Котляров В.М. Фирсова Т.Е., Кольпикова Т.Н., Чевелева С.С. Листериоз как пищевая инфекция и современные методы лабораторной диагностики.

4. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П. Микробиология, 2003 г.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД ИНДИКАЦИИ И ИДЕНТИФИКАЦИИ BORDETELLA BRONCHISEPTICA Л. Ракова, Л. Укстина - 4 курс, факультет ветеринарной медицины Научный руководитель – научный сотрудник А.В. Мастиленко ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Бордетеллез – инфекционное заболевание, вызванное мелкой (0,2 0,3х0,5-1,0 мкм) грамотрицательной коккобациллой и характеризующееся развитием острого или хронического воспалительного процесса слизистой оболочки респираторного тракта, сухим кашлем, который часто принимает пароксизмальный характер, снижением общей активности организма, а в совокупности осложнений другими бактериальными или вирусными инфекциями – развитием тяжелых симптомов, характерных для пневмонии [1].

Целью настоящей работы является применение современного молекулярно-генетического метода (ПЦР) для обнаружения Bordetella bronchiseptica [2, 3].

Материалы и методы. В качестве основного метода обнаружения ДНК Bordetella bronchiseptica использовалась полимеразная цепная реакция.

Для обнаружения ДНК Bordetella bronchiseptica были использованы праймеры («затравки»), разработанные на кафедре МВЭиВСЭ ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА».

Для проведения полимеразной цепной реакции были использованы стандартные реакционные смеси производства ООО «Синтол» (г. Москва).

На последнем этапе индикации (детекции) ДНК применялся горизонтальный электрофорез в 2,3% агарозном геле в Трис-борат буфере с рН-8,3.

Для апробации предложенной методики были использованы штаммы Bordetella bronchiseptica из коллекции музея кафедры МВЭиВСЭ ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА».

Метод полимеразной цепной реакции заключается в многократном копировании (амплификации) участка ДНК. Этот участок выбирается экспериментатором и ограничивается синтетическими одноцепочечными ДНК (праймерами).

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Праймеры подобраны таким образом, что ограничивают участок гена BfrZ генома Bordetella bronchiseptica размером 298 пар нуклеотидных оснований (п.о.). Культуры штаммов Bordetella bronchiseptica были подвергнуты этапу выделения ДНК с помощью обратимой сорбции на синтетическом носителе (сорбенте). Для процесса амплификации был использован программируемый термостат-амплификатор «Терцик», программу для которого подбирали соответственно инструкции к стандартной реакционной смеси и расчетным температурам плавления праймеров.

Результаты исследований. После ряда проведенных опытов была определена программа амплификации:

1. 95С – 5 минут – 1 цикл 2. 95С – 10 сек 60С – 10 сек 35 циклов 72С – 20 сек 3. 72С – 1 мин - 1 цикл После проведенной амплификации реакционную смесь наносили в лунки агарозного геля (в состав геля был введен краситель этидиум бромида) и помещали в прибор для проведения горизонтального электрофореза.

Разгоняющим буфером служил Трис-борат с рН-8,3. Затем подключали источник постоянного тока: напряжение 150V, сила тока 15А, продолжительность 25 минут.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 300 п.о.

Рис.1. Электрофорез продуктов амплификации участков гена BfrZ. 11-маркер молекулярного веса M-DNA-100bp (100-3000 п.о.). Штаммы Bordetella bronchiseptica 1 №1, 2- №7, 3- №214, 4- №22067, 5-9 полевые штаммы, 10-отрицательный контрольный образец не содержащий ДНК Bordetella bronchiseptica.

После электрофореза агарозный гель помещали на прибор для визуализации ДНК – траниллюминатор с длинной волны 315нм. ДНК, двигаясь в электрическом поле, одновременно связывается с красителем и при освещении в УФО дает ярко флуоресцирующую полосу оранжевого цвета.

Выводы. В результате проведенной работы были подобраны оптимальные условия для проведения полимеразной цепной реакции с Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии праймерами к участку гена BfrZ генома Bordetella bronchiseptica и определен температурный режим для программируемого термостата-амплификатора.

Проведена детекция полученных продуктов методом горизонтального электрофореза в 2,3% агарозном геле с режимом: напряжение 150V, сила тока 15А, продолжительность 25 минут.

Литература Красноженов Е.П. и др. Микробиологическая диагностика инфекционных заболеваний 1.

// Ростов н/Д: Феникс, 2006.

Ребриков Д.В., Г.А. Саматов, Д.Ю. Трофимов, П.А. Семенов, А.М. Савилова, И.А.

2.

Кофиади, Д.Д. Абрамов. ПЦР в реальном времени. М: Бином. Лаборатория знаний, 2009.

3. Higuchi R., Dollinger G., Walsh P.S., Griffith R. Simultaneous amplification and detection of DNA sequences. Biotechnology, 1992,10:413-417.

4. Julian Parkhill, Mohammed Sebaihia, Andrew Preston at al. Comparative analysis of the genome sequences of Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis and Bordetella bronchiseptica.Nature genetics Advance online publication, 10 August 2003;

doi:10.1038/ng1227.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗДУХА В НОЧНОМ КЛУБЕ К. Арзина, Т. Клевогина - 5 курс, факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., доцент Л.П. Пульчеровская, д.б.н., профессор С.Н. Золотухин ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Начало микробиологическому анализу воздуха было положено в середине прошлого века великим французским ученым Луи Пастером, который в своих экспериментах доказал наличие микроорганизмов в воздухе.

Контакт человека с микроорганизмами в воздухе наблюдается на протяжении всей жизни, и оснований для повышенного внимания данному вопросу предостаточно.

Многочисленные исследования микробного состава воздуха показали, что их достаточно много как в атмосферном воздухе, так и в воздухе закрытых помещений. Микрофлора обнаруженных организмов очень разнообразна, а воздух является для них естественным путем распространения, хотя среда обитания не благоприятная. Учитывая этот факт, влиянию микроорганизмов мы подвергаемся на улице, дома и на рабочих местах, а взаимосвязь между чистотой воздуха и здоровьем населения очевидна.

Воздух закрытых помещений более обсеменен, чем атмосферный. Как показывают наши исследования, микрофлора помещений представлена сапрофитными организмами, палочками и спорами плесневых грибов.

Патогенные микроорганизмы могут определяться в воздухе при наличии больных. Чаще всего в воздушной среде жилых и общественных помещений определяются санитарно-показательные микроорганизмы (стафилококки, стрептококки).

Бактериологический анализ воздуха закрытого помещения подтверждает то, что содержание микроорганизмов в воздухе колеблется в Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии широких пределах в зависимости от санитарно-гигиенического состояния помещений, количества людей, их активности, наличия систем вентиляции и кондиционирования воздуха.

Микроорганизмы представляют собой своеобразную форму организации живой материи. Их отличает беспрецедентная многочисленность, удивительная жизнеспособность, пластичность, повсеместность распространения, обширность сфер взаимодействия с абиогенными и биогенными компонентами. Микроорганизмы способны вступать с организмом человека в самые разные взаимоотношения – от симбиоза до паразитизма.

Мы провели микробиологический анализ воздуха в одном из развлекательных комплексов с целью изучения условий воздушной среды перед началом работы заведения и после.

Материалы и методы. В ходе бактериологического исследования мы определили следующие показатели воздуха:

• общее количество микроорганизмов • санитарно-показательные микроорганизмы воздуха.

Результаты исследований. При проведении исследований нами были получены следующие результаты (таблица 1).

Таблица Микробиологический анализ воздуха в ночном клубе Время исследования при Число микробов Число золотистых в 1м3 воздуха посеве по методу Коха стафилококков и стрептококков в 1 м3 воздуха в 00:00 ч 1000 в 05:00 ч 1850 При качественном исследовании микрофлоры воздуха были выявлены следующие микроорганизмы: бациллы, стафилококки и стрептококки (ринунки 1 и 2), плесневые грибы не выявлены.

Рис.1 Бактерии родов Staphylococcus и Streptococcus Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис.2 Бактерии рода Bacillus В результате проведенных санитарно-микробиологических исследований воздуха были получены следующие результаты:

• ОМЧ воздуха – до начала посещений 1000 м.к./м3 и сразу после закрытия - 1850 м.к./м3, что соответствует показателю чистого воздуха.

• Число золотистых стафилококков и стрептококков было равно м.к./м3.

Выводы. Исследования показали, что микробная обсеменённость воздуха ночного клуба соответствует показателям чистого воздуха для закрытых помещений в зимнее время года.

Литература 1. Санитарная микробиология/ Н.В.Билетова, Р.П.Корнелаева, Л.Г.Кострикина и др. Под ред. С.Я. Любашенко. – М.: Пишевая промышленность, 1980. – 352 с.

2. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.:

Медицина, 1978. – 394 с.

3. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т.: Пер. 9-го амер.изд.Т.2 Беркли Р., Бок Э., Бун Д. И др.;

Под ред Хоуолта Дж. И др. – М.: Мир, 1997. – 800 с.

4. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. // М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2005. - 736 с.

5. Золотухин С.Н., Васильев Д.А. Курс лекций по санитарной микробиологии. //Учебное пособие. Ульяновск.-2002 г., 198 с.

6. Сбойчаков В.Б. Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований. //Учебник. СПб.: Спец.Лит, 2007. – 592 с.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии МИКРОБИОЛОГИЯ ФРУКТОВЫХ СОКОВ О. Адушкина - 2 курс, факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.б.н., доцент Л.П. Пульчеровская ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии До начала 90-х гг. производители фруктовых соков не обращали внимания на патогенные бактерии. Однако, в последние годы из-за увеличения числа заболеваний, вызванных употреблением фруктовых соков, специалисты федеральных служб, врачи, производители и сами потребители стали уделять больше внимания патогенными бактериями во фруктовых соках.

Существует несколько причин, почему производители фруктовых соков должны больше внимания уделять возможной вспышке заболеваний, вызванной их продуктом. Микроорганизмы являются неотъемлемой частью процесса производства соков, они устойчивы по отношению к мойке и дезинфекции фруктов и производственного оборудования, вследствие чего возможно их попадание в сок. Некоторые микроорганизмы являются патогенными и могут привести к заболеваниям и летальному исходу.

Некоторые патогенные вещества устойчивы в кислой среде и могут сохраняться в охлажденных соках на протяжении нескольких дней или недель.

В производстве соков заражение может произойти благодаря различным источникам. К источникам загрязнения относятся поверхность фруктов, внутренние части испорченных фруктов, поверхности оборудования, люди, животные, насекомые, а также воздух или вода в районе производства. Любой из этих факторов может привести к заражению сока. Патогенные бактерии могут присутствовать в производственной среде до того, как в нее попадает сок. Например, работник может внести бактерии на поверхности производственных установок, с которых они будут перенесены в сок.

Существует три ключевых момента, которые необходимо учитывать, когда речь идет о бактериальных патогенах и фруктовых соках:

• патогены заслуживают особого внимания, включая сальмонеллу, Е.coli 0157:H7 и Cryptosporidium parvum, которые не являются термоустойчивыми.

Поэтому их легко удалить из сока путем обыкновенной пастеризации.

• бактериальные патогенны не будут развиваться во фруктовых соках из за их низкого рН. Но, если эти патогенны попадут в сок после пастеризации, они могут оставаться жизнеспособными на протяжении нескольких дней, или даже недель.

• время, в течение которого бактериальные патогенны могут оставаться жизнеспособными, зависят от рН сока, температуры хранения и физиологического состояния микроорганизмов. Обычно их живучесть возрастает при более высоком рН и при хранении в охлажденном виде.

При производстве соков для освобождения их от микрофлоры часто пользуются термической обработкой. Показатели, предъявляемые к данной продукции представлены в таблице 1.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица Нормативы предъявляемые к продукции после термической обработке Соковая Спорообразующие Мезафильные Неспорообразующие Молочнокислые продукция из мезофильные клострадии микроорганизмы, микроорганизмы фруктов и аэробные и плесневые грибы, овощей факультативно – дрожжи анаэробные микроорганизмы рН 4,2 и B. cereus и Cl. botulinum Не допускаются в 1 Не допускаются г (см3) в 1 г (см3) выше,а также и B. polymyxa рН для соков не допускаются в Cl.perfringens 1 г (см3), продукции из не абрикосов, subtilis не допускаются B.

в 1г (см3), персиков,груш более 11 КОЕ/г (см3) прочие не прочие не (1*), (2*) нормируются более КОЕ/г (см3) рН ниже 4, 2, Не нормируются Не Не допускаются Не допускаются в 1 г (см3) а также рН нормируются в 1 г (см3) ниже 3, 8 для соковой продукции из абрикосов, персиков, груш рН 3,7- 4,2 Не нормируются Не допускаются Не допускаются Cl. botulinum и в 1 г (см ) в (1*)(2*) 1 г (см3) Cl. prfringens не допускаются в 1 г (см3), прочие не более КОЕ/г (см3) рН ниже 3,7 Не нормируются Не Не допускаются в Не допускаются нормируются 1 г (см ) в 1 г (см3) рН 4,2 и выше B. cereus и Не допускаются в Не допускаются Cl. botulinum 1 г (см3) B. polymyxa не и в (1*)(2*) 1 г (см3) допускаются в 1 г Cl.

(см3), B. Subtilis не perfringens не более 11 КОЕ/г допускаются (см3), прочие не в 1 г (см3) нормируются (1*) В соковой продукции из фруктов и (или) овощей, хранение которой осуществляется при температуре выше 20 0C, содержание спорообразующих термофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов в 1 г (см3) не допускается.

(2*) В соковой продукции из фруктов и (или) овощей для детского питания содержание мезофильных клостридий в 10 г (см3) и спорообразующих термофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в 1 г (см3) не допускается.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таким образом, качество данной продукции имеет большое значение для здоровья людей.

Литература 1. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.:

Медицина, 1978. – 394 с.

2. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т.: Пер. 9-го амер.изд.Т.2 Беркли Р., Бок Э., Бун Д. И др.;

Под ред. Хоуолта Дж. И др. – М.: Мир, 1997. – 800 с.

3. СанПиН 2.3.2.560-96. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов. М., 1997.

4. Гришин М.А. Технология сушки плодов, овощей и материалов пище-концентратного производства. - М.: Колос, 1995.

5. Гуляев В.Н., Алимова Т.Ж. Справочник для работников лабораторий пище концентратного и овощесушильного производства. - М.: Агропромиздат, 1986.

ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ К.А. Мима - 3 курс, факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., доцент Л.П. Пульчеровская, д.б.н., профессор С.Н. Золотухин ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Эмпирическое применение химических веществ, для лечения заразных болезней известно человечеству с доисторической эпохи. Так, например, аборигены Бразилии лечили «кровавые поносы» корнем ипекакуаны.

Убежденный сторонник химического метода лечения заразных болезней выдающийся швейцарский химик и врач Филипп Теофраст Бомбаст фон Гогенгейм, назвавший себя Парацельсом, предлагал в качестве лечебных средств: ртуть, железо, серу и свинец. Под влиянием его идей во Франции в XVI в. был издан закон об обязательном лечении сифилиса ртутью. В XVII в. в Европу проник метод лечения малярии с помощью коры хинного дерева, издавна применявшийся индейцами в Южной Америке.

Одним из основных звеньев борьбы с инфекционными заболеваниями людей и животных является уничтожение их возбудителей в окружающей среде.

Целью дезинфекции является предупреждение или прерывание передачи возбудителей от инфицированного индивидуума к интактному через объекты внешней среды (факторы передачи).

Используют следующие методы дезинфекции:

- химический, - физический (кипячение, сжигание, ультрафиолетовое облучение), - механический (встряхивание, обработка пылесосом, влажная уборка, проветривание, стирка, мытье), - биологический.

Практически чаще всего используют комбинацию нескольких методов в различных сочетаниях с учетом конструкции объекта, предполагаемой массивности микробной контаминации, свойств дезинфектанта и т.п.

В медицинских учреждениях преимущественно применяют для дезинфекции достаточно высокие концентрации химических веществ, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии обладающих широким спектром микробоцидного действия (дезинфектанты), реже используют сочетание дезинфектанта с температурной обработкой (пароформалиновая дезинфекция) или вместе с поверхностно-активными веществами.

Дезинфицирующие средства (от франц. des- - приставка, означающая уничтожение, удаление, и лат. inficio - заражаю) (дезинфекционные средства), химические соединения, используемые для уничтожения в окружающей среде возбудителей инфекционных болезней человека и животных. В концентрациях, более высоких, чем лечебные, в качестве дезинфицирующих средств применяют также антимикробные лекарственные вещества местного (наружного) употребления.

Современный дезинфектант должен отвечать нескольким основным требованиям, без осуществления которых ни один препарат не может быть рекомендован для применения: микробиологическая эффективность;

безопасность для применения как для персонала так и для пациентов;

совместимость с обрабатываемыми материалами (за "золотой стандарт" здесь принимается воздействие, которое оказывает на материалы глутаровый альдегид);

экономичность;

степень устойчивости к органической нагрузке (например, крови);

скорость действия (требуемая экспозиция);

наличие запаха;

отсутствие воспламеняемости и взрывоопасности;

простота в приготовлении, применении, удалении.

Дезинфицирующие средства можно разделить на группы в зависимости от содержащегося в них активного вещества: хлорсодержащие препараты;

четвертичные аммониевые соединения (ЧАС);

альдегидные средства;

спиртосодержащие;

фенолсодержащие;

средства, содержащие третичные амины и другие.

Спектр антимикробной активности веществ, входящий в состав дезинфицирующих средств представлен в таблице 1.

• Хлорактивные соединения (хлорная известь, хлорамин) – традиционные средства дезинфекции. Механизм уничтожения микроорганизмов свободным хлором окончательно не выяснен. К числу вероятных путей воздействия хлора относят подавление некоторых важнейших ферментных реакций в микробной клетке, денатурацию белков и нуклеиновых кислот. Традиционные хлорсодержащие препараты обладают высокой антимикробной активностью, но имеют резкий запах, раздражающий слизистые оболочки глаз и верхних дыхательных путей, вызывают коррозию металлов, обесцвечивают окрашенные изделия, имеют низкую стабильность при хранении, инактивируются органическими веществами и не обладают моющими свойствами. Современные хлорсодержащие препараты – производные циануровых кислот – как правило, имеют либо композиционный состав, либо модернизированную форму выпуска, что позволяет значительно нивелировать их отрицательные качества.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица Спектр антимикробной активности веществ, входящий в состав дезинфицирующих средств Грам(+) Действующее Оболочные/безоболочные Грибы Микобактерии /грам(-) вещество\Возбудитель вирусы бактерии Глутаровый альдегид Спирты Фенолы Четвертичные аммониевые соединения (ЧАС) Гуанидины Перекисные соединения Иод Спирты -полная - ограниченная эффективность эффективность • Препараты на основе ЧАС для обработки медицинских инструментов должны отвечать многим требованиям. Но первостепенное значение имеет микробиологическая активность. В нашей стране зарегистрировано множество средств, имеющих в своем составе один или несколько ЧАС. Чтобы избежать недостаточной эффективности средства следует выбирать препараты на основе нескольких действующих веществ, многокомпозиционные.

• Альдегиды – глутаральдегид, янтарный альдегид, формальдегид и другие являются веществами с выраженными антимикробными свойствами, включающими активность в отношении всех видов микроорганизмов за счет алкилирования амино- и сульфгидрильных групп протеинов и подавления синтеза последних. Поэтому, несмотря на их токсичность, выраженное раздражающее действие и резкий запах, альдегиды по-прежнему широко используются в клинической практике.

• Спирты. Самые распространенные компоненты антисептиков.

Насчитывается около 14 видов спиртов, но в медицине в основном используются этиловый и изопропиловый спирты. Все спирты обладают широким антимикробным спектром (кроме спор), быстро испаряются, при испарении не оставляют следов.

• Спиртсодержащие многокомпонентные антисептики нашли широкое применение в первую очередь как средства обработки рук и поверхностей.

Примером средства для обработки рук является "АХД-2000-специаль", в котором действующим веществом является этиловый спирт с добавлением хлоргексидина биглюконата, что обеспечивает пролонгированный антимикробный эффект и расширяет спектр активности препарата. Кроме этого в состав входят эфиры жирной полиольной кислоты, играющие роль увлажняющей добавки.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии • Фенолы. Одни из первых дезинфектантов, но в настоящее время в чистом виде не используются из-за их токсичности. Особенностью фенолов является их способность создавать остаточную пленку на дезинфицируемых поверхностях. Препараты, содержащие производные фенолов используются для обеззараживания поверхностей, применяются в косметологии и технических сферах в качестве консервантов.

• Третичные амины (амфотензиды). Совершенно новый тип дезинфектантов, интерес к которым обусловлен их высокой микробиологической надежностью - они активны в отношении бактерий, грибов и вирусов, обладают невысокой токсичностью и хорошими моющими свойствами. Они сочетают в себе свойства поверхностноактивных веществ и, при определенных условиях, свойства четвертичных аммониевых солей. А за счет наличия свободных аминогрупп и атома третичного азота формируют щелочную среду, что способствует повышению их антимикробной активности, особенно в композиции с другими веществами. Препаратов на основе третичных аминов на российском рынке очень мало.


В настоящее время во всем мире существуют определенные тенденции в выборе активных соединений для дезинфектантов, а именно: наиболее широко распространены композиционные препараты, разработанные на основе альдегидов, катионных ПАВ, спиртов, ЧАС. В качестве новых разработок появляются препараты, изготовленные на основе стабилизированной перекиси водорода, надкислот, третичных аминов. Рецептуры на основе галогенов и фенолов (за исключение бифинилола) постепенно выходят из применения.

Уровень активности химических соединений, наиболее часто используемых в рецептурах дезинфицирующих препаратов представлен в таблице 2.

Таблица Уровень активности химических соединений, наиболее часто используемых в рецептурах дезинфицирующих препаратов (Данные общества инфекционного контроля США) Химическое соединение Концентрация Уровень активности Глутаровый альдегид Высокий 2% Третичные амины Высокий 1-4% Формальдегид Высокий 1- 8% Перекись водорода стабилизированная Высокий 2% Соединения фенола Промежуточный 0,5 - 3% ЧАС Низкая 0,1- 0,2% Таким образом, использование дезинфицирующих средств, соответствующих современному научному уровню и всем необходимым требованиям, предъявляемым к дезинфектантам, гарантирует защиту здоровья пациентов и медицинского персонала в лечебно-профилактических учреждениях.

Литература 1. Борисов Л.Б. «Медицинская микробиология, вирусология, иммунология». Москва, 2005.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 2. Поздеев О.К. «Медицинская микробиология». М. «ГЭОТАР Медицина», 2002.

3. Покровский В.К., Поздеев О.К. «Медицинская микробиология». М. «ГЭОТАР Медицина», 1999.

4. Сбойчаков В.Б. Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований. Учебник. СПб.: СпецЛит, 2007. – 592 с.

5. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология.: учебник для мед. вузов/ А.И.Коротяев, С.А.Бабичев. – СПб.: СпецЛит, 2008.

6. Коммунальная гигиена/ под ред. В.Т.Мазаева – 2-е изд.испр и доп. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2005 -304с.

7. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.:

Медицина, 1978. – 394 с.

8. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т.: Пер. 9-го амер. изд.Т.2 Беркли Р., Бок Э., Бун Д. И др.;

Под ред Хоуолта Дж. И др. – М.: Мир, 1997. – 800 с.

МЕТОД БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИЙ ВИДА PSEUDOMONAS AERUGINOSA И.В. Семенков - 5 курс, факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: научный сотрудник А.Г. Шестаков ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Pseudomonas aeruginosa вызывает заболевание «псевдомоноз».

Восприимчивы крупный рогатый скот, свиньи, овцы, птица, пушные звери, пчёлы, рыбы, из лабораторных животных чувствительны белые мыши, морские свинки и кролики. Источник возбудителя больные животные и человек, выделяющие его с различными истечениями, калом, мочой, молоком, со спермой. Факторы передачи возбудителя – инфицированные корма, вода, почва, навоз, подстилка, предметы ухода. Диагноз ставят на основании лабораторных исследований на Pseudomonas aeruginosa. Синегнойная палочка является основным возбудителем госпитальных инфекций. Связано это с тем, что к «псевдомонозу» особенно чувствительны лица с ослабленным иммунитетом: ВИЧ инфицированные, пациенты ожоговых отделений, хирургических отделений, онкологические больные, больные хроническим алкоголизмом и т.д. Отмечена высокая резистентность бактерии к антибиотикам. Конечно нельзя оставить без внимания тот факт, что Pseudomonas aeruginosa вызывает порчу белковых пищевых продуктов (мясомолочные продукты). Контаминированные продукты являются причиной массовой диареи у людей с нормальным иммунитетом и угрозой сепсиса для лиц с ослабленным иммунитетом. Более того, Pseudomonas aeruginosa является возбудителем болезней растений и ухудшает качество агрономических почв за счёт процесса денитрификации.

Не смотря на то, что проблемы опасности синегнойной инфекции очевидны, существующие дифференциально-диагностические среды не позволяют точно проводить дифференциацию Pseudomonas aeruginosa от близкородственных ассоциантов. Окончательная идентификация безпигментных штаммов Pseudomonas aeruginosa и дифференциация от других неферментирующих бактерий требует постановки дополнительных тестов, что Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии увеличивает продолжительность и стоимость исследований. (Илюхин, 1985;

Haynes, 1951;

Jessen, 1965;

Meschede, 1986;

Neu, 1985;

Zierdt, 1985) Мы предлагаем проводить бактериологическую диагностику бактерий вида Pseudomonas aeruginosa по разработанной нами схеме. Схема включает в себя, разработанные нами: среду накопления, селективную среду и тесты бактериологической идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa.

Исследуемый материал засевается в среду накопления, затем из среды накопления пересевается на селективную среду и уже выросшие на селективной среде колонии бактерий засеваются в тесты, для окончательной идентификации бактерий вида Pseudomonas aeruginosa.

Схема бактериологической диагностики бактерий вида Pseudomonas aeruginosa позволяет в течение 72 часов выделять и идентифицировать вышеуказанные бактерии при концентрации 10 м.к./мл.

Литература Илюхин, В.И. Псевдомонадные инфекции в патологии человека / Илюхин, В.И. // 1.

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 1985. – №2. – С. 110 114.

2. Haynes, W.C. Pseudomonas aerugenosa – its characterization and identification / W.C.

Haynes // J. Gen. Microbiol. – 1951. – V. 5, № 6. – P. 939.

3. Jessen, O. Pseudomonas aerugenosa and other green fluorescent pseudomonads / Jessen. O. Munksgaad, Copenhagen, 1965 – P. 244.

Meschede, W. Pseudomonas aerugenosa / W. Meschede // Med. Welt.-1986. – V. 37, №41. – 4.

P. 1269-1272.

5. Neu, H.C. Ecology, clinical significance and antimicrobial susceptibility of Pseudomonas aerugenosa / H.C. Neu // Nonfermentative gram-negative rods. - 1985. – V. 16, P. 117–159.

6. Zierdt, C.H. Pseudomonas aerugenosa: Serology, phase, pyocin / C.H. Zierdt // Nonfermentative gram-negative rods. – New York;

Basel. - 1985. – V. 15 P. 283 – 241.

ВЛИЯНИЕ ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА BACILLUS THURINGENSIS НА АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ БАКТЕРИЙ ВИДА E. СOLI Е. Чумарина*, Н. Романова*, А. Невматуллина*, Е. Пульчеровская ** - 4 курс*, факультет ветеринарной медицины, специальность «Микробиология», 3 курс**, факультет ветеринарной медицины Научные руководители – к.б.н., доцент Н.А. Феоктистова, Климентова Е.Г.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии ФГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»

Бактерии рода Escherichia, включающий типовой вид E. сoli, показатель свежего фекального загрязнения, возможная причина пищевых токсикоинфекций. Представители рода, находящиеся в воде, трактуются как термотолерантные колиформные бактерии, в лечебных грязях – как фекальные колиформные бактерии, в пищевых продуктах - E. сoli.

Целью наших исследований было изучение влияние дельта-эндотоксина в концентрации мкг/мл на Bacillus thuringensis антибиотикочувствительность бактерий вида E. сoli.

Нами был выделен из внутренних органов поросенка (частное хозяйство, п. Октябрьский) штамм E. сoli. Были изучены его тинкториальные, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии культуральные и биохимические свойства, а также антибиотикочувствительность на коммерческом наборе, состоящем из антибиотика.

Методика исследований. На поверхность МПА агара наносилась газоном исследуемая культура E. сoli, обработанная дельта-эндотоксином Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл инкубированная в термостате в течение 1 часа, 2 часов и 3 часов. Газон подсушивали в термостате в течение 20 минут, а потом накладывали диски с антибиотиками. Посевы инкубировали в условиях термостата. Результаты учитывали через 24 часа.

Таблица Результаты исследований по изучению антибиотикочувствительности бактерий рода E. сoli Название антибиотика Культура Культура Культура Культура в норме +токсин в +токсин в +токсин в течение 2 течение течение часов часов 1 часа Тикарциллин/клавулатом/тиментин 75/10 - - - мкг Цефтазидим 30 мкг 3,0 в.р. 1,0 в.р.

- 1,1в.р.

Цефтриаксоном 30 мкг 3,5 п.р. 1,0 в.р. 1,2 п.р., 2,7 в.р.

2,5 в.р.

Цефотаксим 30 мкг 1,2 п.р., 1,1 п.р.

- 1,4 в.р.

Фурадонин 300 мкг 1,1 п.р. 1,5 п.р. 1,9 п.р. 1,5 п.р.

Триметоприм/ сульфаметоксазолом\ 1,5 п.р. 1,8 п.р. 1,5 п.р., 2,0 в.р.

котримоксозол 1,25/23,75 мкг 2,0 в.р.

Ципрофлоксацин 5 мкг 2,5 п.р. 2,0 п.р. 2,0 п.р. Левофлоксацин 5 мкг 2,5 п.р. 2,4 п.р. 2,0 п.р 2,5 п.р.

Офлоксацин 5 мкг п.р, 1,8 п.р. 1,9 п.р. 2,5 п.р.

1, 3,5 в.р.

Норфлоксацин 10 мкг 2,0 п.р. 2,0 п.р. 2,5 п.р. 1,9 п.р., 3,1 в.р.

Гентамицин 10 мкг 2,5 п.р. 1,9 п.р. 1,2 п.р. 1,8 п.р., 2,5 в.р.

Амикацин 30 мкг 1,5 п.р. 1,0 п.р. 1,2 п.р., 2,0 п.р.

2,8 в.р.

Цефепин 30 мкг 3,5 п.р. 3,0 в.р. 2,5 в.р.

Имипенем 10 мкг 3,0 п.р. 2,5 п.р. 2,2 п.р. 2,4 п.р.

Ампициллин 10 мкг 1,5 в.р. 1,5 в.р. 1,5 в.р. 1,5 в.р.

Цефтибутен 30 мкг 3,5 в.р.

- - Цефиксим 5 мкг 1,8 п.р. 2,0 в.р.

- Цефаклором 30 мкг 0,8 в.р. 0,5 п.р. 1,9 п.р., 2,7 в.р.

Цефуроксимом 30 мкг 1,5 п.р. 1,0 п.р. 1,5 в.р. 1,5 в.р.

С ампициллин/сульфактамом 10/10 мкг 2,0 п.р. 0,9 п.р. 1,5 в.р. 0,9 в.р.

С амоксициллин/клавуланат 1,5 в.р. 1,0 п.р., 1,2 в.р. 1,1 п.р., (амоксиклав) 20/10 мкг 1,5 в.р. 1,7 в.р.


Примечание: п.р. – 100% лизис, в.р. – присутствие на зоне лизиса вторичного роста колонии Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Результаты исследований. В результате проведенных исследований было установлено, что дельта-эндотоксин Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл значительно влияет на антибиотикочувствительность бактерий вида E. сoli.

ВЛИЯНИЕ ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА BACILLUS THURINGENSIS НА АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ БАКТЕРИЙ ВИДА STAPHILOCOCCUS AUREUS Е. Чумарина*, Н. Романова*, А. Невматуллина*, Е. Пульчеровская ** - 4 курс*, факультет ветеринарной медицины, специальность «Микробиология», 3 курс**, факультет ветеринарной медицины Научные руководители – к.б.н., доцент Н.А. Феоктистова, Климентова Е.Г.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии ФГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»

Показателем санитарного неблагополучия считается золотистый стафилококк. Именно этот вид стафилококка связан с присутствием людей и некоторых животных. В среднем у здоровых людей золотистый стафилококк обнаруживают в 30% случаев, а у медицинского персонала до 96%. Этот вид стафилококка отличается длительностью выживания и устойчивостью во внешней среде. Он может быть косвенным индикатором загрязнения воздуха вирусами. На роль санитарно-показательных микроорганизмов (СПМО) выдвигаются антибиотикорезистентные стафилококки и микрококки, 5-6 кратное превышение указанных СПМО в воздухе больничных помещений по сравнению с воздухом внебольничных помещений следует оценивать как плохой прогностический признак.

В настоящее время многие болезни, вызываемые микроорганизмами, не поддаются лечению антибиотиками, поэтому проблема поиска альтернативного метода лечения стоит чрезвычайно остро. Изучение влияния дельта-эндотоксина Bacillus thuringensis на микрофлору может дать интересные результаты для разразработки нового антимикробного препарата для лечения заболеваний, вызываемых Staphilococcus aureus.

Нами был получен из музея Научно-исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии штамм Staphilococcus aureus. Были изучены его тинкториальные, культуральные и биохимические свойства, а также антибиотикочувствительность на коммерческом наборе, состоящем из 21 антибиотика.

Целью наших исследований было изучение влияние дельта-эндотоксина в концентрации мкг/мл на Bacillus thuringensis антибиотикочувствительность бактерий вида Staphilococcus aureus.

Методика исследований. На поверхность МПА агара наносилась газоном исследуемая культура Staphilococcus aureus, обработанная дельта эндотоксином Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл инкубированная в термостате в течение 1 часа, 2 часов и 3 часов. Газон подсушивали в термостате в течение 20 минут, а потом накладывали диски с Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии антибиотиками. Посевы инкубировали в условиях термостата. Результаты учитывали через 24 часа.

Таблица Результаты исследований по изучению антибиотикочувствительности бактерий вида Staphilococcus aureus Название антибиотика Культура Культура Культура Культура в норме +токсин в +токсин в +токсин в течение 2 течение течение часов часов 1 часа Тикарциллин/клавулатом/тиментин 75/10 - - - мкг Цефтазидим 30 мкг 2,5 п.р. 0,7 в.р. 1,0 в.р.

Цефтриаксоном 30 мкг 1,7 п.р. 3,0 в.р. 1,1 в.р.

Цефотаксим 30 мкг 3,7 в.р. 1,6 в.р. 2,0 п.р., 3,0 в.р.

Фурадонин 300 мкг 1,8 п.р. 1,7 п.р. 1,6 п.р. 1,6 в.р.

Триметоприм/ сульфаметоксазолом\ 4,0 п.р. 2,2 в.р. 1,0 п.р. 1,9 п.р., котримоксозол 1,25/23,75 мкг 1,5 в.р. 2,1 в.р.

Ципрофлоксацин 5 мкг 1,5 п.р., 3.5 п.р. 2,0 п.р., 2.1 п.р.

3,0 в.р. 3,5 в.р.

Левофлоксацин 5 мкг 1,6 п.р. 1,3 п.р. 1,8 п.р. 1,7 п.р., 3,0 в.р. 3,0 в.р.

Офлоксацин 5 мкг 1,5 п.р., 1,4 п.р. 1,6 п.р., 1,5 п.р., 2,0 в.р. 2,5 в.р. 2,5 в.р.

Норфлоксацин 10 мкг 1,2 п.р., 3,5 п.р. 1,5 п.р., 1,3 п.р., 2,2 в.р. 3,0 в.р. 2,6 в.р.

Гентамицин 10 мкг 2,5 п.р. 1,1 п.р. 2,5 п.р. 2,6 п.р.

Амикацин 30 мкг 0,5 п.р. 3,5 п.р. 1,0 п.р. 2,1 п.р.

Цефепин 30 мкг 1,1 п.р. 0,6 в.р. 1,7 в.р.

Имипенем 10 мкг 1,9 п.р., 2,0 п.р. 2,5 п.р., 2,1 п.р.

3,0 в.р. 4,0 в.р.

Ампициллин 10 мкг 2,5 п.р. 1,2 в.р. 2,7 п.р. 1,2 в.р.

Цефтибутен 30 мкг 1,0 в.р. 1,0 в.р.

- Цефиксим 5 мкг 1,0 в.р. 1,5 в.р. 0,7 в.р.

Цефаклором 30 мкг 1,7 в.р. 0,9 в.р.

- Цефуроксимом 30 мкг 1,9 п.р. 1,5 в.р. 1,7 в.р. 1,9 в.р.

С ампициллин/сульфактамом 10/10 мкг 2,0 п.р. 1,2 п.р. 1,5 в.р. 0,7 п.р.

1,5 в.р.

С амоксициллин/клавуланат 2,0 п.р. 1,4 в.р. 1,0 п.р. 2,4 в.р.

(амоксиклав) 20/10 мкг 1,6 в.р.

Примечание: п.р. – 100% лизис, в.р. – присутствие на зоне лизиса вторичного роста колонии Результаты исследований. В результате проведенных исследований было установлено, что дельта-эндотоксин Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл значительно влияет на антибиотикочувствительность бактерий вида Staphilococcus aureus.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Выводы и предложения. Полученные результаты интересны для дальнейших исследований по разработке нового антимикробного препарата для лечения заболеваний, вызываемых Staphilococcus aureus.

ВЛИЯНИЕ ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА BACILLUS THURINGENSIS НА АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ БАКТЕРИЙ РОДА SALMONELLA Е. Чумарина*, Н. Романова*, А. Невматуллина*, Е. Пульчеровская ** - 4 курс*, факультет ветеринарной медицины, специальность «Микробиология», 3 курс**, факультет ветеринарной медицины Научные руководители – к.б.н., доцент Н.А. Феоктистова, Климентова Е.Г.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии ФГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»

В 30-х годах ХХ века У. Вильсон и Э. Блер предложили сальмонелл в качестве санитарно-показательных микроорганизмов. Сальмонеллы – наиболее распространенные микроорганизмы, вызывающие острые кишечные заболевания (ОКЗ), они могут служить индикатором других ОКЗ с аналогичным патогенезом и эпидемиологией. Количество носителей сальмонелл среди людей и животных значительное. Их довольно часто обнаруживают даже в сточных водах. Разработка препарата для лечения сальмонеллезов не на основе антибиотиков, отрицательно действующих на микрофлору кишечника теплокровных, очень актуальная задача. По литературным данным, дельта-эндотоксин Bacillus thuringensis обладает бактериостатическим и бактериоцидным действием на некоторые виды энтеробактерий. Поэтому, целью наших исследований было изучение влияние дельта-эндотоксина Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл на антибиотикочувствительность бактерий рода Salmonella.

Нами был выделен из внутренних органов поросенка (частное хозяйство, п. Октябрьский) штамм Salmonella. Были изучены его тинкториальные, культуральные и биохимические свойства, а также антибиотикочувствительность на коммерческом наборе, состоящем из антибиотика.

Методика исследований. На поверхность МПА агара наносилась газоном исследуемая культура Salmonella, обработанная дельта-эндотоксином Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл инкубированная в термостате в течение 1 часа, 2 часов и 3 часов. Газон подсушивали в термостате в течение 20 минут, а потом накладывали диски с антибиотиками. Посевы инкубировали в условиях термостата. Результаты учитывали через 24 часа.

Результаты исследований. В результате проведенных исследований было установлено, что дельта-эндотоксин Bacillus thuringensis в концентрации 300 мкг/мл значительно влияет на антибиотикочувствительность бактерий рода Salmonella.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица Результаты исследований по изучению антибиотикочувствительности бактерий рода Salmonella Название антибиотика Культура Культура Культура Культура в норме +токсин в +токсин в +токсин в течение 2 течение течение часов часов 1 часа Тикарциллин/клавулатом/тиментин 75/10 - 1,0 в.р.

- мкг Цефтазидим 30 мкг 2,3 п.р. 2,0 в.р.

- Цефтриаксоном 30 мкг 4,3 п.р. 1,5 в.р. 2,0 в.р. 2,5 в.р.

Цефотаксим 30 мкг 4,5 п.р. 1,9 в.р.

- Фурадонин 300 мкг 1,0 п.р. 1,5 п.р. 1,2 п.р., 1,7 п.р.

1,9 в.р.

Триметоприм/ сульфаметоксазолом\ 2,7 п.р. 1,3 п.р. 0,7 в.р. 1,0 п.р.

котримоксозол 1,25/23,75 мкг 1.5 в.р.

Ципрофлоксацин 5 мкг 1,8 п.р., 1,3 п.р. 3,2 в.р. 2,1 п.р., 3,0 в.р. 3,5 в.р.

Левофлоксацин 5 мкг 1,6 п.р., 2,5 п.р. 1,6 п.р., 1,8 п.р., 2,7 в.р. 2,3 в.р. 3,0 в.р.

Офлоксацин 5 мкг 1,8 п.р., 1,4 п.р. 2,1 п.р., 1,7 п.р., 2,3 в.р. 2,5 в.р. 3,0 в.р.

Норфлоксацин 10 мкг 2,0 п.р. 2,7 п.р. 1,5 п.р. 1,5 п.р., 3,0 в.р.

Гентамицин 10 мкг 1,5 п.р., 1,9 п.р., 1,1 в.р. 1,8 в.р.

2,4 в.р. 2,1 в.р.

Амикацин 30 мкг 1,8 п.р. 2,0 п.р. 0,5 п.р. 1,5 п.р., 2,2 в.р.

Цефепин 30 мкг 2,1 в.р. 2,3 в.р. 2,5 в.р.

Имипенем 10 мкг 4,5 п.р. 2,2 п.р. 2,4 п.р. 2,1 п.р., 3,3 в.р.

Ампициллин 10 мкг 2,1 п.р. 0,9 п.р.

- Цефтибутен 30 мкг 4,0 п.р. 2,8 в.р. 3,0 в.р.

Цефиксим 5 мкг 1,1 в.р. 1,9 п.р. 2,0 в.р. 1,0 в.р.

Цефаклором 30 мкг 2,5 п.р. 0,8 п.р. 1,0 п.р., 1,5 в.р.

1,8 в.р.

Цефуроксимом 30 мкг 2,0 в.р. 1,0 п.р. 2,4 в.р. С ампициллин/сульфактамом 10/10 мкг 2,0 п.р. 1,0 п.р. 1,0 п.р. 1,3 п.р.

С амоксициллин/клавуланат 4,5 п.р. 0,9 п.р. 1,2 п.р.

(амоксиклав) 20/10 мкг Примечание: п.р. – 100% лизис, в.р. – присутствие на зоне лизиса вторичного роста колонии Выводы и предложения. Полученные результаты исследований будут использованы для всестороннего изучения влияния дельта-эндотоксина Bacillus thuringensis на микрофлору теплокровных животных и при разработке схем лечения сальмонеллезов.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ ЭКЗОТИЧЕСКИХ ЖИВОТНЫХ А. Щеголенкова*, Д. Акимов** - 3**,4* курс, факультет ветеринарной медицины Научный руководитель – аспирант О.В. Коровенкова ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии Инфекционные болезни занимают ведущее место среди всех заболеваний террариумных животных. Знание наиболее распространенных инфекционных болезней пресмыкающихся необходимо для людей, имеющих непосредственный контакт с ними, и не только потому, что они наиболее распространены, как сказано выше, но и потому, что некоторые возбудители этих болезней вызывают или могут вызывать сходные заболевания у человека.

Хотя бактериальные инфекции и уступают по частоте встречаемости заболеваниям, вызываемым простейшими, но количество их, зачастую неблагоприятный исход заставляют выдвинуть заболевания амфибий и рептилий бактериальной природы на первое место по значимости.

Целью нашей работы явилось изучение литературных данных по патогенам рептилий и освоение методики бактериологического исследования.

Разработанные в настоящее время научные рекомендации по применению антибиотиков у животных позволяют успешно справляться со многими инфекционными болезнями на ранних стадиях. Это заставляет обращать самое пристальное внимание на изучение клиники этих болезней, чтобы выявить их как можно раньше.

В настоящее время общепризнанно, что во всех случаях инфекционных заболеваний амфибий и рептилий факторами, предрасполагающими к их развитию, являются: неправильное питание с нарушением баланса витаминов и минеральных веществ, недостаток ультрафиолетовых лучей, нарушения санитарно-гигиенического режима и основных правил содержания животных (нарушения температурно-влажностного режима и т. д.).

Американские ученые планируют разработать принципиально новые антибиотики, и в этом им помогут крокодилы, сообщает ABC News.

Исследователи из Парка крокодилов в Дарвине и специалисты из Луизианы обнаружили необычные свойства крови этих зубастых рептилий. Морские крокодилы - самые крупные рептилии на земле - часто гибнут в борьбе за территории, но крайне редко умирают от болезней. Причина тому - особые антитела, которые содержатся в белых клетках крокодильей крови и защищают животное от инфекций.

«Кровь аллигаторов отличается особыми свойствами, поскольку способна убивать многие бактерии и вирусы», – сообщил Мерчент (2008) на весеннем заседании Американского химического общества в Новом Орлеане.

Ученый выделил из сыворотки крови крокодила белки, которые могут воздействовать даже на такие устойчивые бактерии, как представители семейства Staphylococcus aureus. Белки крови аллигаторов - ученый называет их Alligacine – представляют угрозу для 23 видов бактерий. Для проверки этого Мерчент и его коллеги смешали сыворотку крови аллигаторов с Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии культурами бактерий. Через 12 часов большинство из исследуемых микроорганизмов перестали размножаться.

Даже с ВИЧ Alligacine способны справляться. Мерчент и его команда продемонстрировали это, заразив в лабораторных условиях клетки человеческой лимфы ВИЧ, а затем обработав их разжиженной сывороткой крови аллигатора. При помощи 5%-ного раствора сыворотки ученым удалось ликвидировать практически все вирусы. Сами клетки лимфы в результате эксперимента остались живы – по всей видимости, белки сыворотки крови аллигатора, несмотря на всю свою агрессивность, не причиняют вреда человеческим клеткам. В этой связи ученые надеются, что смогут создать на основе Alligacine не только новые антибиотики, но и лекарства против ВИЧ.

Тот факт, что именно иммунная система крокодилов предоставляет арсенал биологического оружия, по мнению ученых, является результатом эволюции. Крокодилам всегда приходилось приспосабливаться к экстремальным условиям обитания. Болота и реки, в которых они обитают, как правило, кишат бактериями и вирусами. Кроме того, в результате битв друг с другом они постоянно получают ранения, через которые в их организм проникают возбудители заболеваний. И только благодаря своей стойкой иммунной системе крокодилы могут дать отпор атаковавшим их микроорганизмам.

Для того, чтобы получить из белков крови крокодила приемлемые для человека лекарства, нужно преодолеть еще несколько препятствий. Как предупреждают исследователи, ни в коем случае нельзя вводить напрямую в кровь человека эти вещества. В конце концов агрессивные субстанции могут погубить и полезные микроорганизмы, вызвав тем самым серьезные побочные эффекты. Кроме того, следует учитывать и то, что белок крови аллигатора будет воспринят иммунной системой человека как чужеродное вещество и отторгнут. В этой связи ученые ставят перед собой цель разработать более слабый искусственный вариант протеинов.

Материалы и методы. Исследования были проведены на базе научно исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Ульяновской ГСХА. Мы освоили методику проведения бактериологического исследования погибшего крокодила, принадлежащего зоомагазину «Тропикана».

Для исследования мы сделали мазки отпечатки из внутренних органов (желудок, печень, селезёнка, пищевод) и окрасили их по Граму.

Кусочки внутренних органов в количестве 35 г засеяли в мясопептонный бульон, а затем на мясопептонный агар.

Результаты исследований. В мазках-отпечатках отметили наличие грамотрицательной микрофлоры.

При посеве на мясопептонный бульон и суточном инкубировании в термостате при t 37 °С регистрировали равномерное помутнение среды и наличие незначительного хлопьевидного беловатого осадка.

При посеве на мясопептонный агар отметили рост, как слившихся, так и изолированных колоний. Характер роста – умеренный. Изолированные Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии колонии были правильной овальной формы, диаметром около 2 мм с ровными краями. Колонии были прозрачными серовато-белого цвета с плоским профилем и гладкой поверхностью, слизистой консистенции и однородной структуры.

Выводы. Для более точной индикации микроорганизмов необходимо дальнейшее исследование с изучением биохимических свойств и типизацией возбудителей по Берджи.

Литература Кудрявцев С.В., Фролов В.Е., Королев А.В. Террариум и его обитатели М. Лесная 1.

промышленность, 1991.

Кудрявцев С.В., Мамет С.В., Фролов В.Е. Рептилии. М., 1995.

2.

М. Bolton. The management of crocodiles in captivity. FAO, Rome, 1989.

3.

4. N. Hermes. Crocodiles killers in the wild. Chartwell books, Inc. 1989.

5. H. Wermuth und P. Mertens. Schildkroten. Krokodile Bruckenechsen. Veb Gustav Fischer Verlag Jena. 1961.

http://big-snake.narod.ru. Энциклопедия экзотических животных 6.

www.protoplex.ru Сайт врачей-аспирантов.

7.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Секция «Актуальные проблемы вирусологии, биотехнологии и иммунологии»

ВИРУС ВАМПИРИЗМА – МИФ ИЛИ РЕАЛЬНОСТЬ?

О. Тен - 4 курс, факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.вет.н., доцент Ю.Б. Васильева ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Всё началось со вспышки жалоб на нападения вампиров в Восточной Пруссии в 1721 году и в Габсбургской монархии с 1725 по 1734. Два известных (и впервые полностью задокументированных властями) случая затрагивали Петера Благоевича и Арнольда Паоле из Сербии. Согласно истории, Благоевич умер в 62 года, но возвращался пару раз после своей смерти, прося еды у сына. Сын отказал и был найден мёртвым на следующий день. Вскоре Благоевич вернулся и нападал на некоторых соседей, которые умерли от потери крови.

В другом известном случае Арнольд Паоле, бывший солдат, ставший фермером, на которого несколько лет назад якобы напал вампир, умер во время сенокоса. После его смерти люди стали умирать и все считали, что это Паоле охотится на соседей.

Эти два инцидента были очень хорошо задокументированы.

Государственные служащие изучили случаи и тела, описали их в докладах и после случая Паоле были изданы книги, которые распространились по всей Европе.

Кто же они – вампиры? Вампиризм – миф или реальность?

Целью нашей работы явился анализ литературных и Интернет источников по данному вопросу.

Однозначного ответа на данный вопрос до сих пор нет. Одни учёные считают, что вампирами называют людей, страдающих генетическим заболеванием – порфирией, другие, что вампиризм вызывают вирусы.

Попробуем разобраться.

Если бы не эта болезнь — не было бы мифов ни о Дракуле, ни о прочих кровопиющих, светобоящихся и клыкастых персонажах. Современная медицина похоронит самую загадочную болезнь в истории человечества — порфирию. Циничная медицина простирает свои стерильные руки над волшебным миром ужасов.

Считается, что этой редкой формой генной патологии страдает один человек из 200 тысяч (по другим данным, из 100 тысяч). Также считается, что болезнь является следствием инцеста. В медицине описано около 80 случаев острой врождённой порфирии, когда болезнь была неизлечима.

Порфирии — это группа наследственных заболеваний, в основе которых лежит нарушение биосинтеза гема, приводящее к избыточному накоплению в организме порфиринов и их предшественников, а именно, порфобилиногена (ПБГ) и -аминолевулиновой кислоты (АЛК).

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Болезнь характеризуется повышенным содержанием порфиринов в крови и тканях и усиленным их выделением с мочой и калом, а так же тем, что организм не может произвести основной компонент крови — эритроциты.

Проявляется фотодерматозом, гемолитическими кризами, желудочно кишечными и нервно-психическими расстройствами.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 



Похожие работы:





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.