авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 11 |
-- [ Страница 1 ] --

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МОРФОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА РАМН

СЕКЦИЯ МОРФОЛОГИИ ОТДЕЛЕНИЯ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК РАМН

НАУЧНЫЙ СОВЕТ ПО

МОРФОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА РАМН

VIII всероссийская конференция

по патологии клетки

сБорник наУЧнЫХ трУДов

11–12 ноября 2010 г.

Москва

УДК 616.091 + 591

ББК 52.5-55.6

C23

РЕДАКЦИОННАЯ КОМИССИЯ:

Председатели Председатель – член-корр. РАМН, профессор Л.В. Кактурский Зам. председателя – профессор О.В. Макарова Ответственный секретарь – докт. биол. наук М.В. Кондашевская Члены комиссии:

проф. Т.Г. Бархина доцент Т.А. Белоусова проф. М.Н. Болтовская докт. биол. наук Г.Б. Большакова докт. мед. наук С.В. Буравков проф. Л.М. Ерофеева канд. биол. наук А.М. Косырева докт. мед. наук Л.П. Михайлова проф. С.В. Савельев канд. мед. наук В.П. Черников проф. В.В. Яглов канд. мед. наук Н.В. Яглова ISBN 978-5-91629-004- С23 Сборник научных трудов VIII Всероссийской конференции по патологии клетки. – М.: МДВ, 2010. – 324 с.

В сборник включены материалы докладов, заявленных на VIII Всероссийскую конференцию по патологии клетки. Представленные работы затрагивают широкий спектр научных вопросов, для решения которых использованы современные мето ды морфологических исследований. Содержание сборника отражает сферы интере сов цитологов, гистологов, молекулярных биологов, эмбриологов, патоморфологов, онкологов, фармакологов и других специалистов в области биологии и медицины.

УДК 616.091 + 591 ББК 52.5-55. ISBN 978-5-91629-004-2 © НИИ МЧ РАМН, 2010 Сборник научных трудов гиБель карДиоМиоцитов при артериальной гипертензии Азова М.М.

Российский университет дружбы народов, Москва Сердечно-сосудистые заболевания, будучи основной причиной смертно сти во всем мире, являются одной из главных проблем современного здраво охранения. Наряду с ишемической болезнью сердца, частым источником развития сердечной недостаточности становится артериальная гипертензия, сопро вождающаяся морфофункциональными изменениями миокарда левого же лудочка (.



.., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По..., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По..., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По.., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По.., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По., 2001 В.И елуйко, Н.А. Кравченко, 2004. По теря кардиомиоцитов выступает одним из ключевых событий в развитии сердечной недостаточности. Гибель клеток может осуществляться тремя принципиально отличающимися способами: некрозом, апоптозом и ауто фагией. Исследования последних лет указывают на наличие взаимосвязи между сигнальными путями, индуцирующими данные процессы (S. Ks- i., 2003 Nishid K., Os K., 2008. Однако именно апоптотическая гибель наиболее значима для тканей миокарда при артериальной гиперто нии. Усиление апоптоза, сопровождающее гипертрофию левого желудоч ка, было показано у спонтанно гипертензивных крыс, крыс с ренальной гипертензией, ангиотензин II-индуцированной гипертензией и на дру -индуцированной гих экспериментальных моделях (R. Hm., 1995 Z. Li., 1997 X. Zhg., 1993. Апоптоз, или программированная клеточная гибель, представляет собой регулируемый процесс, сопровождающийся фрагмен тацией ДНК, конденсацией ядра и образованием апоптозных телец, погло щаемых макрофагами и соседними клетками. Главными компонентами, обе спечивающими процесс апоптоза, выступают каспазы, «рецепторы смерти» на клеточной мембране (s, TNR и др. и митохондрии. Существуют два основных пути инициации апоптоза. Первый (внешний путь реализуется че рез систему связанных с мембраной рецепторов, которые при взаимодействии с лигандами активируют каспазу 8, запуская, таким образом, состоящий из каспаз протеолитический каскад. Второй (внутренний путь не сопровожда ется активацией каспазы 8 и требует участия факторов, высвобождающих ся из митохондрий (А.В. Гордеева и соавт., 2004 S. Ng, P. Gsi, 1995 G.. Ch, 1997. Ey., 1998 B. ss, J-C. i, 2000. Триггерными механизмами апоптоза кардиомиоцитов могут выступать перегрузка, оксидативный стресс, действие цитокинов и др. Одним из глав ных факторов, вызывающих апоптотическую гибель кардиомиоцитов и ги пертрофию миокарда, является перегрузка сердца, сопровождающая ар VIII Всероссийская конференция по патологии клетки териальную гипертензию, что было подтверждено на экспериментальных моделях (крысы и мыши с сужением аорты (E. Tig., 1996 B. Dig., 2000. G., 2003. Однако несомненный интерес представ.,..., ляют исследования, согласно которым в генетических моделях гипертензии, в отличие от экспериментальных, механический стресс не является основ ным индуктором апоптоза, т.к. запрограммированная клеточная гибель и гипертрофия левого желудочка сердца в данном случае были описаны как явления, независящие от величины артериального давления, как в отно шении сроков формирования, так и в отношении наследования (B.. Is., 1998 А.Ю. Постнов и соавт., 2003.





В связи с вышеприведенными данными встает вопрос, не имеющий на се годняшний день однозначного ответа: отличаются ли механизмы инициации апоптоза при различных формах артериальной гипертензии?

Выявление механизмов запуска апоптотической гибели клеток и возмож ности их блокады, может стать теоретической основой разработки стратегии лекарственной терапии сердечной недостаточности при различных формах артериальной гипертензии, а также будет способствовать поиску генетиче ских детерминант, обусловливающих развитие гипертрофии миокарда при первичной артериальной гипертензии.

изМенения БиоаМинов селезёнки и иММУноБиоХиМиЧескиХ показателей крови крЫс при возДействии иММУноМоДУлятороМ в УсловияХ экспериМентального токсиЧеского гепатита Алексеева Л.А., Гурьянова Е.А.

ФГОУ ВПО «Чебоксарский государственный университет им. И.Н. Ульянова», Чебоксары Иммунные реакции, происходящие в организме, приводят как к суще ственным морфологическим изменениям селезёнки, так и к изменениям её нейромедиаторного статуса. Нейромедиаторы представлены во всех цито структурах органа и обеспечивают функции селезёнки наряду с цитокина ми. В настоящее время можно корректировать нарушенные звенья иммунной системы веществами, способствующими её восстановлению. Среди много численных иммуномодулирующих препаратов наиболее адекватны организ му человека природные, естественные иммуномодуляторы. К ним относится Tрансферфактор (Т, являющийся концентратом природных пептидов, по рансферфактор (Т, являющийся концентратом природных пептидов, по лучаемых из молозива коров, полностью очищенным от крупных дисперсных белков. елью нашего исследования явилось изучение влияния Т в различ Сборник научных трудов ных дозах на нейромедиаторный статус селезёнки и показатели крови крыс при экспериментальном токсическом гепатите через 1, 2 и 3 недели приёма Т.

Объектом исследования служила селезёнка 45 белых беспородных крыс самцов массой 180–200 г. при экспериментальном токсическом гепатите (ЭТГ. Последний моделировали двукратным в\м введением 0,2 мл 50 % мас ляного раствора четырёххлористого углерода в дозе 1 г/кг. Выделяли 5 групп животных:1-я – интактные (5 2-я – контрольные крысы, которым в\м вво 5 2-я – контрольные крысы, которым в\м вво 5 2-я – контрольные крысы, которым в\м вво дилось 0,2 мл растительного масла (10 3-я – крысы с ЭТГ (10, 4-я и 5-я группы – крысы с ЭТГ, которым ежедневно давали Т в дозе 0,05 г/кг и 0,1 г/кг. Морфологические признаки гепатита появляются на 5–7-е сутки после второго введения токсиканта. Материал забирали на 7, 14, 21-е сутки после второго введения раствора четырёххлористого углерода. Криостатные срезы толщиной 15 мкм окрашивали люминисцентно-гистохимическим ме тодом алька-Хилларпа в модификации Е.М. Крохиной. Общий анализ кро ви проводился с помощью автоматического гематологического анализатора «МК 4110» (Япония. Количественное определение IgG, и А проводили методом радиальной иммунодиффузии. У крыс с экспериментальным токсическим гепатитом на фоне введения Т в дозе 0,05 г/кг наблюдается восстановление содержания моноаминов в грануляр ных люминесцирующих клетках (ГЛК реактивного центра на 7-е сутки, в крас ной пульпе селезёнки – на 21-е сутки (табл.. На фоне лечения Т в дозе 0,1 г/кг содержание катехоламинов и серотонина в структурах возвращается к норме на 14-е сутки. В анализах крови значительные изменения выявлены в 5-й группе крыс, получавших Т в дозе 0,1 г/кг (у крыс 3-й и 4-й групп показатели крови достоверно не отличались и, в основном, со стороны лейкоцитарного ростка. Число лейкоцитов увеличивается в 1,3 раза за счёт лимфоцитов до 14-дневно го срока эксперимента, затем их процентное содержание несколько снижает ся. Число нейтрофилов с 14-го дня эксперимента увеличивается. Возможно, увеличение числа лейкоцитов в периферической крови связано с повышени ем концентрации катехоламинов в плазме, которые в свою очередь стимули руют клеточный цикл и увеличивают выход зрелых клеток костного мозга в периферическую кровь. Уровень базального и стимулированного фагоцитоза постепенно нарастает. Концентрация Ig в крови имеет 2 пика повышения: через 1 и 3 недели, концентрация IgG – 1 пик на 21-е сутки эксперимента, что свидетельствует о повышении функциональной активности В-клеток и усилении гуморальных факторов защиты под действием Т. Можно предпо ложить как непосредственное действие препарата на синтез и секрецию био генных аминов в ГЛК, так и опосредованное – через увеличение влияния на вегетативную нервную систему. VIII Всероссийская конференция по патологии клетки Таким образом, динамика содержания нейромедиаторов селезёнки и по казателей крови крыс свидетельствуют об иммуномодулирующем действии Т, особенно выраженном в дозе 0,1 г/кг. МорфологиЧеская оценка репаративнЫХ процессов при использовании оБогащенной троМБоцитаМи плазМЫ крови Алексеева Н.Т., Глухов А.А., Остроушко А.П.

Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, Воронеж Структурно-функциональный анализ изменений, возникающих в тканях при использовании различных методов лечения, имеет большое значение для оценки межклеточных взаимодействий в норме и патологии. елью работы явилось выявление особенностей структурной организа ции клеточного и сосудистого компонентов мягких тканей в период форми рования рубца при использовании обогащенной тромбоцитами плазмы крови (ОТПК. Эксперимент выполнен на 14 беспородных крысах-самцах, которые были разделены на контрольную и экспериментальную группы по 7 живот ных в каждой. В обеих группах животным под общим обезболиванием в сте рильных условиях наносили по одной стандартной стерильной ране на перед ней поверхности бедра длиной 1,0 см. Лечение ран у животных контрольной группы не проводили. В опытной группе при лечении ран местно применя ли ОТПК с концентрацией тромбоцитов не менее 1 млн/мкл. Для получения тромбоцитарного концентрата из хвостовой вены крысы забирали кровь по отработанной методике. Забор материала для морфологического исследова ния осуществляли на 14-е сут после нанесения раны. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине, заливали в парафин. Полученные срезы тол щиной 6 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Установлено, что у животных контрольной группы в зоне раны в поверх ностных и глубоких участках дермы сохранялись очаги лейкоцитарной ин фильтрации, что свидетельствовало о наличии умеренной воспалительной реакции. В сетчатом слое наблюдались признаки расстройства кровообраще ния, которые проявлялись многочисленными расширенными сосудами и ста зами эритроцитов. Среди коллагеновых волокон отмечалось большое количе ство малодифференцированных клеток и фибробластов. Эпителизация раны была завершена, но эпидермис в зоне рубца истончен.

В препаратах опытной группы рубец был представлен соединительной тканью, без выраженных признаков воспалительного процесса. Четко опре делялись структурированные волокнистые компоненты, рубцевание раны Таблица Динамика люминесценции катехоламинов (КА) и серотонина (С) (у.е.) в структурах селезёнки крыс с экспериментальным токсическим гепатитом (ЭТГ) и при введении Трансферфактора per os в дозе 0,05 г/кг и 0,1 г/кг Сроки 7-е сутки 14-е сутки 21-е сутки Группы крыс группа 3-я 4-я 5-я 3-я 4-я 5-я 3-я 4-я 5-я ЭТГ ЭТГ ЭТГ 0,1 г/кг 0,1 г/кг 0,1 г/кг Контрольная 0,05 г/кг 0,05 г/кг 0,05 г/кг Исследуемые С С С С С С С С С С КА КА КА КА КА КА КА КА КА КА структуры Адренергические 14,2 14,2 4,5 4,5 3,6 3,6 4,1 4,1 3 3 6,8 6,8 10,3 10,3 4,5 4,5 7,4 7,4 28,4 28, волокна ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±.

cis 0,2 0,2 0,2 0,2 0,09 0,09 0,19 0,19 0,11 0,11 0,12 0,12 0,5 0,5 0,18 0,18 0,15 0,15 0,14 0, Лимфоциты 7,3 7,3 3,5 3,5 4,3 4,3 5,9 5,9 5,8 5,8 4,3 4,3 6,5 6,5 3,1 3,1 4,2 4,2 7,8 7, реактивного ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± центра 0,11 0,11 0,15 0,15 0,19 0,19 0,09 0,09 0,1 0,1 0,2 0,2 0,09 0,09 0,11 0,11 0,16 0,16 0,11 0, лимф. узелка ГЛК реактивного 19,8 19,8 9,75 9,75 18,7 18,7 16,4 16,4 10,8 10,8 13,2 13,2 23,8 23,8 16,3 16,3 14,2 14,2 31,3 31, центра ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± лимф. узелка 0,1 0,1 0,16 0,16 0,14 0,14 0,17 0,17 0,13 0,13 0,12 0,12 0,18 0,18 0,09 0,09 0,12 0,12 0,11 0, Лимфоциты 7,7 7,7 4,8 4,8 3,5 3,5 3,6 3,6 4,6 4,6 5,3 5,3 6,03 6,03 3,5 3,5 7,2 7,2 11,5 11, маргинальной ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± зоны 0,15 0,15 0,08 0,08 0,12 0,12 0,12 0,12 0,17 0,17 0,18 0,18 0,14 0,14 0,13 0,13 0,11 0,11 0,48 0, лимф. узелка Сборник научных трудов Окончание таблицы Сроки 7-е сутки 14-е сутки 21-е сутки Группы крыс группа 3-я 4-я 5-я 3-я 4-я 5-я 3-я 4-я 5-я ЭТГ ЭТГ ЭТГ Контрольная 0,1 г/кг 0,1 г/кг 0,1 г/кг 0,05 г/кг 0,05 г/кг 0,05 г/кг Исследуемые С С С С С С С С С С КА КА КА КА КА КА КА КА КА КА структуры ГЛК 27,1 27,1 не не не не не не не не не не не не не не 14,6 14,6 26,3 26, маргинальной ± ± вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- вы- ± ± ± ± зоны лимф.

0,18 0,18 явл явл явл явл явл явл явл явл явл явл явл явл явл явл 0,15 0,15 0,17 0, узелка 5,9 5,9 3,8 3,8 4,2 4,2 5,8 5,8 3,5 3,5 4,3 4,3 7,1 7,1 2,5 2,5 6,2 6,2 9,02 9, Эритроциты ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± красной пульпы 0,12 0,12 0,16 0,16 0,18 0,18 0,13 0,13 0,1 0,1 0,19 0,19 0,15 0,15 0,05 0,05 0,18 0,18 0,23 0, VIII Всероссийская конференция по патологии клетки 14,8 14,8 Не Не 10,2 10,2 14,5 14,5 не не 10,13 10,13 17,7 17,7 5,3 5,3 14,8 14,8 22,4 22, ГЛК ± ± вы- вы- ± ± ± ± вы- вы- ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± красной пульпы 0,1 0,1 явл явл 0,12 0,12 0,12 0,12 явл явл 0,17 0,17 0,15 0,15 0,1 0,1 0,09 0,09 0,18 0, Примечание: * – достоверные показатели.

Сборник научных трудов было полностью завершено. Вокруг коллагеновых волокон уменьшено коли чество малодифференцированных клеточных элементов. Сосудистая реакция отличалась снижением васкуляризации, что характерно для завершения про цессов рубцевания. Интактный эпидермис был полностью сформирован, в зоне разреза придатки кожи отсутствовали.

Таким образом, использование ОТПК способствовало стимуляции репа ративных процессов. Это выражалось в ускорении формирования зрелых тканей. Преобладание коллагеновых волокон, окруженных фибробластами, на фоне купирования воспалительной реакции, снижения сосудистого ком понента в зоне рубца, в сочетании с достаточным уровнем кровообращения в тканях паравуальной области способствовало образованию нежных рубцов. В опытной группе животных, в отличие от контрольной, четко прослежива лась корреляция между скоростью эпителизации раневой поверхности и со зреванием грануляционной ткани с последующим формированием рубца.

сравнительная Характеристика лиМфоиДнЫХ скоплений в разнЫХ зонаХ поЧек У Детей и взрослЫХ Аминова Г.Г.

НИИ морфологии человека РАМН, Москва Известно, что воспалительные процессы в почках связаны с различными неблагоприятными внешними и внутренними факторами, определяющими характер изменения почечной паренхимы (Альбини Б. и др., 1982 Клара С., 1986 is K.R., N.H., 2005. Когда действие этих факторов оказы.R., R.,.,.H., H.,., Когда действие этих Когда действие вается не столь значительным, реакция почечной ткани ограничивается об разованием локальных инфильтратов. елью данного исследования явилось изучение почек, полученных от практически здоровых городских жителей, погибших от случайных причин, без патологии органов мочевыделительной системы. Исследовались почки в двух возрастных группах: дети в возрасте 4–7 лет и взрослые – 36–60 лет. Секционный материал заливался в парафин, гистологические срезы окрашивались гематоксилином и эозином, методами Ван Гизон, Маллори. Определялась частота присутствия инфильтратов, их морфологические особенности у детей и взрослых, клеточный состав. Клет ки в лимфоидных инфильтратах подсчитывались с помощью сетки С.Б. Сте фанова на стандартной площади среза, равной 880 мкм. Статистическая обработка результатов проведена по программе «STTISTIC 6.0». Анализ результатов – с использованием средней арифметической, ошибки средней, критерия Стьюдента. Различия принимались за достоверные при р0,05.

Как показали наши исследования, инфильтраты в паренхиме почек име ли место в подавляющем большинстве исследованных случаев (более 80 %. VIII Всероссийская конференция по патологии клетки Как у детей, так и у взрослых они состояли преимущественно из скоплений клеток лимфоидного ряда. Локализация, размеры и плотность распределения клеток на стандартной площади среза были различны. Лимфоидные скопле ния могут распределяться по всей паренхиме органа или локализоваться в какой-либо его части. Сравнительно редко лимфоидные инфильтраты отме чаются в капсуле почек и непосредственно под ней, что позволяет предпо ложить их лимфогенное происхождение, т. к. именно капсула почек обильно снабжена хорошо развитой сетью лимфатических капилляров. В корковом ве ществе скопления клеток лимфоидного ряда встречаются наиболее часто. Не сколько реже они отмечаются в мозговом веществе органа. Поскольку лимфа тическая система сосредоточена в соединительнотканной основе почек, здесь она представлена слабее, по сравнению с капсулой, поэтому наличие инфиль тратов в корковом и мозговом веществе почек скорее свидетельствует о пре имущественно гематогенном их происхождении. Не исключен и восходящий путь проникновения возбудителя инфекции, т. к. подобного рода инфильтра ты образуются в стенках чашечек и лоханки почек, а также в нижележащих отделах выделительной системы (Григоренко Д.Е., 2010.

Инфильтраты как у детей, так и у взрослых людей возникают исключитель но в соединительнотканных промежутках паренхимы почек, располагаясь во круг артериол или рядом с ними, тесно контактируют с их стенками, а также структурными элементами почки, но никогда не захватывают клубочковую или канальцевую систему исследуемого органа. Нередко они также плотно прилегают к стенкам венул и лимфатических капилляров. Скопления клеток лимфоидного ряда представлены небольшими образованиями овальной или неправильной формы. Размеры инфильтратов, как и плотность распределе ния клеток в них, различны. В пределах самого инфильтрата распределение клеток может быть плотным и относительно равномерным, тогда скопление клеток имеет округлую или овальную форму в зависимости от того, насколько позволяет соединительнотканная строма почек. В других случаях распреде ление клеток лимфоидного ряда может быть неравномерным. Обычно клетки плотнее располагаются в центральных зонах, тогда как по периферии их кон центрация постепенно снижается. У детей изредка обнаруживаются структу ры с более разреженным центром. В таких случаях центральные разреженные участки содержат большое количество малодифференцированных клеток (бла стов – до 8,6 % и больших лимфоцитов – до 12 %, однако, делящиеся клетки в них обнаружены не были. В лимфоидных скоплениях почек детей и взрослых доминируют малые лимфоциты (соответственно, 58,28 % и 59,73 %. Средние лимфоциты чаще встречаются у взрослых людей (соответственно, 7,62 % и 12,08 %. Несколько реже в инфильтратах взрослых людей встречаются плаз матические клетки (соответственно, 3,97 % и 1,34 %. В отличие от детей, у Сборник научных трудов взрослых людей более высокая доля приходится на гранулоциты: нейтрофилы (у детей – 0,66 %, у взрослых – 1,34 % и эозинофилы (у детей – 0,66 %, у взрослых – 2,68 %. Деструкция клеток примерно одинаково протекает в обе их исследованных группах людей, но макрофагальная реакция более выраже на в детском возрасте.

В стенках чашечек и лоханки лимфоидные скопления встречаются редко, они имеют вытянутую форму, различаются своими размерами, имеют отно сительно невысокую плотность распределения клеток на исследуемой пло щади среза. Чаще всего они располагаются по ходу пучков гладкомышечных волокон, реже – в собственной пластинке слизистой оболочки. В тканях соб ственной пластинки слизистой оболочки чашечек и лоханки клетки лимфо идного ряда встречаются редко, они диффузно распределяются на всем её протяжении. Клетки представлены, в основном, малыми лимфоцитами и не большим числом единичных плазматических клеток. Таким образом, исследования показали, что инфильтраты в почечной па ренхиме здоровых людей встречаются практически постоянно, что свиде тельствует о напряженном состоянии органа как в детском возрасте, так и у взрослых людей. Клеточный состав инфильтратов представлен, главным об разом, клетками лимфоидного ряда. Разница в цитоархитектонике инфиль тратов сводится к увеличенному содержанию плазматических клеток у детей, а гранулоцитов у взрослых. Кроме того, у детей в инфильтратах могут при сутствовать бласты.

экспрессия клаУДинов в эпителиальнЫХ опУХоляХ разлиЧного генеза Бабиченко И.И.

Российский университет дружбы народов, Медицинский факультет, Москва Плотные контакты принимают участие в формировании механических связей между рядом лежащими клетками, сохраняя полярность их располо жения, они представляют один из компонентов клеточной дифференцировки. Плотные контакты состоят из трёх основных видов молекул: окклудина, клау динов и адгезивных молекул контактов, при этом предполагается, что основ ная функциональная нагрузка приходится на клаудины. Несмотря на тот факт, что роль этих белков в процессах онкогенеза изучена мало, можно предпола гать их участие в формировании автономных клеточных популяций, способ ных к инфильтративному росту и процессам метастазирования.

Иммуногистохимическим (ИГХ методом была исследована экспрессия клаудинов (клаудин-1, -2, -3, -5 на различных этапах развития опухолей – от VIII Всероссийская конференция по патологии клетки интраэпителиальных изменений до инвазивных форм рака – в клетках много слойного плоского эпителия (слизистая оболочка рта – СОР, переходного эпителия (уротелий мочевого пузыря и железистого эпителия (эндометрий. Для ИГХ использовали очищенные антитела кроличьей антисыворотки к клаудинам -1, -2, -3, -5 (LbVisi. Визуализацию иммунных комплексов проводили при помощи безбиотиновой системы детекции на основе перок сидазы хрена. Экспрессию белков выявляли на наружной мембране эпители альных клеток. В результате проведенных исследований была выявлена определенная тканевая специфика в экспрессии клаудинов, в различных тканях, как прави ло, отмечалась экспрессия нескольких белков, но с различной степенью выра женности. Для эпителия СОР наиболее информативным был клаудин-1, для уротелия – клаудин-3, для железистого эпителия – клаудины -1, -2 и -3.

В многослойном плоском эпителии СОР по мере снижения дифференци рованности клеток от нормального эпителия до лейкоплакии с признаками плоскоклеточной интраэпителиальной неоплазии (SIN и плоскоклеточного рака отмечалось снижение экспрессии всех исследованных клаудинов, наи более выраженные изменения были характерны для клаудина-1. Потерю нео пластическими клетками СОР белков плотных контактов – клаудинов можно интерпретировать как снижение клеточной адгезии, что представляет важ ный этап прогрессии и метастазирования раковых опухолей. По сравнению с неизмененным переходным эпителием мочевого пузыря, по мере снижения дифференцировки эпителиальных клеток в опухолях с низ ким злокачественным потенциалом, папиллярных уротелиальных карцино мах и инвазивных опухолях отмечалось возрастание экспрессии клаудина-3. Сходные изменения наблюдались нами и при исследовании клаудинов в железистом эпителии эндометрия, так наиболее злокачественные формы аде нокарциномы – серозного типа – характеризовались высоким уровнем экс прессии клаудинов -1 и -3, в то время как в аденокарциноме эндометриоидно го типа преобладала экспрессия клаудина-2.

Наши исследования показывают, что в отличие от опухолей из многослой ного плоского эпителия, в переходном и железистом эпителии опухолевый рост характеризуется высокой экспрессией клаудинов и сопровождает инва зивные свойства раковых клеток. В подобных опухолевых образованиях нами также была выявлена гиперэкспрессия рецепторов к эпидермальному факто ру роста-1 и -2 (EGR и c-bB-2, а также матриксной металлопротеиназы-2 (P-2. Скорее всего, именно подобный комплексный фенотип опухолевых клеток и определяет их высокую выживаемость и злокачественность.

Сборник научных трудов стрУктУрно-фУнкциональнЫе изМенения в паренХиМе щитовиДной железЫ при ишеМиЧеской Болезни серДца и алкогольной карДиоМиопатии Байбаков С.Е., Дронова М.В.

Тамбовский государственный университет им. Г.Р. Державина, медицинский институт, Тамбов, Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, Воронеж В настоящий момент представляется неясным, являются ли изменения функции щитовидной железы благоприятной адаптивной реакцией на бо лезнь, снижая или повышая энергетические потребности тканей, либо не благоприятным ответом, вызывающим повреждение тканей, в частности, гипо- или гипертиреоз и соответствующие морфологические изменения в щитовидной железе (ЩЖ. Однако в доступной литературе эти изменения не описаны с применением современных морфометрических и статистических методик.

елью данного исследования явилось выявление патологических измене ний в щитовидной железе умерших от патологии сердца. В ходе работы были изучены ЩЖ в 150 аутопсийных случаях. Причи ны смерти – патология сердца и травмы (подтверждены результатами пато логоанатомического исследования. Контрольная группа включала аутопсий ный материал – 50 человек, смерть которых была связана с механическими воздействиями. После фиксации в 10% формалине получали серийные сре зы, которые окрашивали гематоксилином. С помощью программы db Phshp CS определяли морфометрические параметры, характеризующие морфофункциональное состояние щитовидной железы: 1 фолликулярный индекс (И 1/2(L+H, где L – наибольший размер фолликула, Н – наи меньший размер фолликула 2 высота фолликулярного эпителия 3 индекс накопления коллоида (ИНК d/2h, где d – внутренний диаметр фолликула, h – высота фолликулярного эпителия 4 отношение площади паренхимы к площади стромы в срезах 5 масса ЩЖ (г и объем ЩЖ (мл.

В 83% случаев (средний возраст 52,1±9,23, соотношение мужчины/жен щины 7/1 при наступлении смерти вследствие ИБС и алкогольной карди омиопатии, отмечались следующие изменения в ЩЖ: диффузный склероз стромы с атрофическими изменениями паренхимы (соотношение площадь паренхимы/площадь стромы в срезе равнялась 1,33. В 64% наблюдений от мечено образование очагов пролиферации, из них размерами до 1 см (латент ные «малые узелки» – 43%, более 1 см – 21% наблюдений (табл. 1.

VIII Всероссийская конференция по патологии клетки Таблица Распространённость узловых образований щитовидной железы (по аутопсийным материалам) Диаметр узла Всего Нозология Менее 1 см 1 см и более ИБС и алкогольная КМП 21% 10% 31% Травмы 7% 4% 11% Итого 28% 14% 42% Морфометрические показатели ЩЖ при патологии сердца представлены в табл. 2.

Таблица Морфометрические показатели щитовидной железы при ИБС и алкогольной кардиомиопатии (КМП) Морфометрические Алкогольная ИБС Контроль показатели ЩЖ КМП Высота фолликулярного 4,32+ 0,22 5,76±0,14 4,5 1± 0, эпителия (мкм олликулярный индекс 156,53±6,06 64,23± 2,76 101, 12± 3, Индекс накопления коллоида 5,84± 0,77 19,76± 0,92 17,62±0, Масса ЩЖ (гр. 21,30±5,48 17,25±5,95 18,80±4, Объём ЩЖ (мл 19,90± 5,42 16,1±4,2 17,6±5, Таким образом, проведенное исследование позволяет констатировать, что функциональная активность щитовидной железы при ИБС повышается (вы сокие значения ИНК и высоты фолликулярного эпителия, низкие значения И, при этом значения массы и объёма ниже, чем в группе контроля. При алкогольной КМП, наоборот, функциональная активность снижена (значения И высокие, а высота фолликулярного эпителия и ИНК – низкие, тогда как значения массы и объёма выше, чем в контроле. Встречаемость узлов раз личного диаметра при ИБС и алкогольной кардиомиопатии – 31%, при трав ме – 11%.

Выводы:

1. При ишемической болезни сердца повышается функциональная актив ность щитовидной железы и увеличивается частота встречаемости узлов.

2. Алкогольная кардиомиопатия сопровождается снижением функцио нальной активности щитовидной железы и увеличением частоты встречае мости узловых образований.

3. Узловые образования встречаются с практически одинаковой частотой при ИБС и алкогольной кардиомиопатией.

Сборник научных трудов 4. При ИБС функциональная активность щитовидной железы повышает ся, тогда как при алкогольной КМП – снижается.

5. Пато- и морфогенез узловых образований при ИБС и алкогольной кар диомиопатии различны.

МорфофУнкциональнЫе осоБенности энДотелиоцитов при осложненноМ теЧении геМоррагиЧеской лиХораДки с поЧеЧнЫМ синДроМоМ Байгильдина А.А., Дубовая Т.К., Лебедева А.И., Вагапова В.Ш.

ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Росздрава», ФГУ «Всероссийский центр глазной и пластической хирургии Росздрава», Уфа Важными компонентами защиты организма от циркулирующих в крови инфекционных агентов, наряду с клетками моноцитарного происхождения, являются клетки эндотелия сосудов. Находясь на границе между кровью и тканями, они первыми вовлекаются в патогенез различных заболеваний, в том числе и геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС, возбуди тель которого – хантавирус – обладает выраженным тропизмом к эндотелию сосудов. Это заболевание занимает в России первое место среди природно очаговых инфекций, характеризуется системным поражением мелких сосу дов и почек. Эндотелий сосудов секретирует вазорегуляторы, про- и антикоа гулянты, факторы роста, адгезивные молекулы и др. Структурные изменения эндотелиальных клеток (ЭК, сопровождающиеся дисбалансом выделения этих веществ, определяются как эндотелиопатия, которая может существен но влиять на течение и прогноз заболевания. елью работы явилась оценка структурно-функционального состояния ЭК сосудов при осложненном течении ГЛПС на основе изучения ультра структуры и особенностей метаболизма ЭК. В программу исследования вошли 48 больных с серологически под твержденным диагнозом ГЛПС в возрасте от 29 до 65 лет с осложнения ми – острой почечной недостаточностью, ДВС-синдромом, инфекционно токсическим шоком, острой дыхательной недостаточностью, разрывом капсулы почек. Аутопсийный материал легких, почек, печени и головного мозга людей, умерших в периоды олигурии и полиурии, фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида, обезвоживали в спиртах по Б. Уикли. Срезы го товили на ультратоме LKB-III 8800 (Швеция, контрастировали 2% раство ром уранилацетата, цитратом свинца по Рейнольдсу, изучали в трансмисси онном микроскопе E-100 CX II фирмы «JEOL» (Япония при увеличениях VIII Всероссийская конференция по патологии клетки 5200–29000 раз. Концентрации эндотелина-1 в плазме крови, sVC-1 и VE-кадгерина в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с использованием тест-наборов Bimdic Gp, Tchc и Bd d Bimdic Gp, Tchc и Bd d Gp, Tchc и Bd d Gp, Tchc и Bd d, Tchc и Bd d Tchc и Bd d и Bd d Bd d d d Sysms (Австрия. Количество циркулирующих ЭК определяли по методу. Hdc. Результаты исследования обрабатывали с помощью пакета про. Hdc. Результаты исследования обрабатывали с помощью пакета про Hdc. Результаты исследования обрабатывали с помощью пакета про. Результаты исследования обрабатывали с помощью пакета про грамм Sisic 7.0 f Widws: определяли медиану и интерквартильный интервал [25% 75%], достоверность межгрупповых различий средних вели чин оценивали по критерию Манна-Уитни. Критический уровень досто Манна-Уитни. Критический уровень досто верности нулевой статистической гипотезы р принимали равным 0,05.

Ультраструктурный анализ показал, что ЭК сосудов печени и почек при ГЛПС повреждаются значительнее, чем ЭК сосудов легких и головного моз га. Большинство ЭК сосудов печени и особенно почек, слущены и практи чески все они находятся в состоянии некробиоза: ядра пикнотичны, мито хондрии разрушены, трубочки эндоплазматического ретикулума укорочены, цитоплазма заполнена мелкими везикулами, вакуолями и остаточными тель цами, глыбчатыми скоплениями рибосом, включениями хантавирусов. Лю минальная поверхность этих ЭК сглажена, на аблюминальной обнаружива ются признаки отрыва от базальной мембраны. В сосудах легких и головного мозга десквамированных ЭК меньше, и повреждения этих клеток менее вы ражены. Ядра этих клеток имеют овальную форму с маргинизированным хроматином, в цитоплазме содержатся вакуоли, микровезикулы и включения хантавирусов. Митохондрии набухшие, с разрушенными кристами люми нальная поверхность клеточной мембраны образует многочисленные выро сты и складки.

Результаты исследования уровня маркеров дисфункции ЭК сосудов в кро ви больных ГЛПС с осложненным течением представлены в таблице.

Таблица Содержание некоторых маркеров дисфункции эндотелия в крови больных ГЛПС при тяжелой форме с осложнениями на фоне базисной терапии период период период контроль показатель олигурии полиурии Эндотелин-1, фмоль/мл 0,07 [0,05 0,16]* 0,124 [0,09 0,19]* 0,4 [0,3 0,55] sVC-1, нг/мл 157 [102 175]* 1675 [1575 1675]* 963 [915 1103] VE-кадгерин, нг/мл 0,66 [0,6 0,8]* 0,52 [0,31 0,61]* 1,07 [1,03 1,08] иркулирующие ЭК, 10 /л 12 [8 14]* 22,5 [18 23]* 4 [2,5 5,5] * – статистическая значимость различий с контролем (р0, Таким образом, ЭК сосудов при осложненном течении ГЛПС претерпе вают как морфологические, так и функциональные изменения, причем струк Сборник научных трудов турной дегенерации подвержены преимущественно ЭК печени и почек. Внутриклеточные повреждения могут быть инициированы как самим хан тавирусом, так и продуктами измененного под его влиянием метаболизма. Снижение метаболической активности ЭК доказывается гипопродукцией эндотелина-1, VC-1 и VE-кадгерина, которые секретируются только ЭК. Полученные результаты указывают на развитие эндотелиопатии при ГЛПС. Следует отметить, что циркулирующие ЭК, содержащие хантавирусы, могут поддерживать дальнейшее распространение возбудителя по системе кровоо бращения, обеспечивая ему «защиту» от действия факторов иммунной систе мы организма.

исслеДование соДержания гликогена в нейтрофильнЫХ гранУлоцитаХ крови в зависиМости от ХиМиЧеского состава приниМаеМой пищи Бакуев М.М., Шахбанов Р.К., Мусаева Д.О.

Дагестанская государственная медицинская академия, Махачкала Важным и почти неизученным вопросом следует считать возможность участия нейтрофильных лейкоцитов в процессах пищеварения. Известный факт, описанный еще Х.С. Коштоянцем в 1950 г., увеличения количества цир г., увеличения количества цир г., увеличения количества цир кулирующих лейкоцитов, названный «пищеварительным лейкоцитозом», ко торое имеет место на высоте пищеварения, не стал предметом дальнейших углубленных исследований с целью выяснения его причин и механизмов.

Можно предположить, что на пищеварение, а конкретно на всасывание продуктов распада пищевых веществ, лейкоциты реагируют как на внедрение или возможное внедрение антигенов во внутреннюю среду. По немногочис ленным литературным данным, имеющимся в настоящее время, это напоми нает реакцию лейкоцитов на наличие в организме воспалительного очага. В этом смысле поступление продуктов распада пищи в рыхлую соединитель ную ткань стенки тонкой кишки можно рассматривать как воспалительный процесс в миниатюре. Поскольку в ходе пищеварения это происходит регу лярно, факт образования большого количества лейкоцитов на пике пищева рительного процесса, вполне объясним.

елью работы было изучение динамики содержания гликогена в нейтро фильных лейкоцитах при приёме пищи разного состава и на разных стадиях пищеварительного процесса. Для её выполнения использовались мазки, приготовленные из лейкомассы здоровых людей (добровольцев, принимавших белковую, жирную и углевод ную пищу.

VIII Всероссийская конференция по патологии клетки Материал для исследования брали через 2, 4, 6 час после приёма пищи и натощак. Окраску мазков проводили по методу Мак-Мануса, с использовани ем реактива Шиффа и 1 % йодной кислоты (Шик-реакция. Через 2 часа после приёма смешанной пищи отмечается достоверный рост содержания гликогена в нейтрофилах крови до 2,21±0,11 (натощак – 1,69±0,08. В последующем (до 4 часов эта тенденция продолжается. Боль шинство нейтрофилов (в основном, сегментоядерные представляются насы щенными продуктами цитохимической реакции.

В последующем снижение концентрации продуктов реакции продолжа ется и к 6 часам приближается к контрольным значениям. В мазках преоб ладают клетки с меньшим содержанием гранул, наряду с которыми нередко встречаются нейтрофилы (почти все сегментоядерные или чрезмерно насы щенные, или слабо насыщенные окрашенными гранулами.

При приёме жирной пищи изменения количественных показателей со держания гликогена в нейтрофилах аналогичны наблюдаемым при приеме белковой пищи. Так, к 2 часам отмечается значительное снижение количе ства ШИК-положительных гранул (1,05±0,06. В мазках преобладают клетки с умеренным и малым содержанием гранул с продуктами цитохимической реакции. В некоторых сегментоядерных нейтрофилах просматривается не равномерность распределения окрашенных продуктов. Картина значительно изменена в мазках, приготовленных через 4 часа после приёма пищи редко встречаются клетки с малым содержанием гранул. Основная масса нейтрофи лов насыщена продуктами реакции. Плотность расположения гранул такова, что вся цитоплазма клеток диффузно окрашена. Гранулярность выявляется только в околоядерной зоне.

Сходное распределение гранул наблюдается в палочкоядерных и юных формах, хотя в последних гранулярность окрашенных продуктов более за метна.

Таким образом, как следует из приведенных в работе данных, относитель но быстрый (через 2 часа рост содержания гликогена в нейтрофильных лей коцитах крови отмечается при приеме углеводной и смешанной пищи. В то же время несколько специфична направленность изменений содержания гли когена при приёме белковой пищи. Так, через 2 часа наблюдается достовер ное снижение количества гранул гликогена, а через 4 часа имеет место такой же рост, который сохраняется и к времени третьего исследования (через 6 ча сов.

Колебания содержания гликогена в нейтрофилах при приеме жирной пищи сходны с теми, что и при белковой. Обобщая эти результаты, можно предпо ложить, что есть определённая взаимосвязь между концентрацией гликогена в плазме крови и степенью насыщения его гранулами нейтрофилов. Данный процесс, по-видимому, совершается в период гранулогенеза в красном кост Сборник научных трудов ном мозге. Это в определённой степени подтверждается наличием зависимо сти между направленностью изменений содержания гликогена в нейтрофи лах и составом принимаемой пищи.

изУЧение процессов апоптоза желУДоЧного эпителия при H. PylorI-ассоциированноМ ХрониЧескоМ атрофиЧескоМ гастрите Балабеков А.В., Чуков С.З., Правдина И.А.

Ставропольская государственная медицинская академия, Ставрополь Одной из актуальных проблем современной медицины является диагности ка и лечение заболеваний желудочно-кишечного тракта. В настоящее время, благодаря идентификации этиологического фактора предраковых заболеваний желудка – H. pylori, появилась реальная возможность предупреждения разви тия рака желудка путем своевременного выявления тех патологических изме нений слизистой оболочки, которые при длительном существовании приводят к развитию неопластической трансформации желудочного эпителия. Существует ряд возможных механизмов, посредством которых H. pylori-инфекция может принимать участие в процессах мутагенеза желу дочного эпителия. Одним из подобных механизмов может быть усиленное клеточное обновление в воспаленной слизистой оболочке. Повышение ин тенсивности клеточного деления увеличивает частоту мутаций вследствие появления ошибок при репликации генов, а также за счет уменьшения време ни для репарации ДНК. Согласно генетической модели E.R. и Vgsi B.., человеческий желудочный канцерогенез представляет собой многоэтапный процесс, свя занный с прогрессирующим накоплением генетических и эпигенетических нарушений на каждом этапе. Эти нарушения включают ряд изменений онко генов, генов-супрессоров опухолей (антионкогенов, регуляторов клеточного цикла, генов-репарантов ДНК, клеточных адгезивных молекул, теломеров и теломеразной активности, а также развитие генетической нестабильности в различных микросателлитных последовательностях ДНК.

Нормальный белок p53 является транскрипциональным фактором и опо p53 является транскрипциональным фактором и опо 53 является транскрипциональным фактором и опо средует различные клеточные функции: регуляцию цикла клеточного деле ния, репарацию ДНК, апоптоз. При различных формах повреждения геном ной ДНК белок p53 может вызывать остановку клеточного цикла на уровне перехода фаз G1 – S, тем самым предоставляя время для репарации ДНК и предотвращая размножение мутантных клеток. При невозможности адекват ной репарации ДНК p53 активирует апоптоз посредством регуляции транс крипции и прямого взаимодействия с Bc-2 и Bx. Аномалии, описанные в ге VIII Всероссийская конференция по патологии клетки не p53 при опухолях у человека, обычно представлены точечными мутациями или аллельными делециями, приводящими к утрате функции p53, вследствие чего этот «страж генома» теряет способность к активации защитных механиз мов – остановки клеточного цикла и апоптоза.

Общеизвестно, что рак желудка развивается с высокой долей вероятно сти в случаях прогрессирования H. pylori-ассоциированного антрального хронического гастрита с распространением поражения на фундальный отдел желудка и формированием хронического атрофического гастрита с исчезно вением главных желудочных желез и появлением нового типа слизистой обо лочки – кишечной метаплазии.

Исследования проведены на 180 пациентах в возрасте от 18 до 80 лет с симптомами диспепсии, у которых при эндоскопическом исследовании диа гностирован H. Pyi-ассоциированный гастрит. Проводили ЭГДС с множе H. Pyi-ассоциированный гастрит. Проводили ЭГДС с множе. Pyi-ассоциированный гастрит. Проводили ЭГДС с множе Pyi-ассоциированный гастрит. Проводили ЭГДС с множе -ассоциированный гастрит. Проводили ЭГДС с множе ственными биопсиями (по 2 биоптата из тела и антрального отдела желудка и один биоптат из области угла желудка, с учетом требований модифициро ванной Сиднейской системы с последующим гистологическим изучением биоптатов.

Иммуногистохимическое исследование проводили на парафиновых срезах толщиной 4 мкм. Для иммуногистохимической идентификации р53 исполь зовали первичные антитела в разведении 1:200 и стрептавидинбиотиновую систему визуализации LSB2 (DCymi, Dm-S. Обработку материала проводили в соответствии с инструкциями производителя, докра ску ядер выполняли гематоксилином Майера. При хроническом атрофическом гастрите экспрессия р53 выявлялась в антральном отделе у 22 из 55 (40,0% пациентов. При развитии атрофии и псевдопилорической метаплазии в кислотопродуцирующих отделах желудка экспрессия р53 выявлялась у 18 из 36 пациентов (50,0% в области инцизуры и у 4 из 7 (57,1% в теле. Все пациенты были H. pyi-позитивными. Как следу ет из полученных данных, экспрессия мутантного протеина р53, приводящая к несостоятельности апоптоза в поврежденной слизистой оболочке, нарас тала при хроническом H. pyi-ассоциированном гастрите в проксимальном направлении, от антрального отдела в направлении большой кривизны тела желудка. Однако, выявленные различия были статистически недостоверны (P 0,05 при сравнении показателей в антральном отделе, в области инцизу P 0,05 при сравнении показателей в антральном отделе, в области инцизу 0,05 при сравнении показателей в антральном отделе, в области инцизу ры и в теле желудка. При анализе частоты экспрессии р53 в зависимости от стадии развития атрофии, нами получены следующие данные. Наибольшая частота экспрес сии р53 обнаружена при умеренной и выраженной атрофии, и эти различия были достоверными при сравнении с неатрофическим гастритом, но недосто верны по сравнению со слабой атрофией. Сборник научных трудов Ядерная экспрессия р53 в желудочных эпителиоцитах в случаях кишеч ной метаплазии выявлялась в антральном отделе у 21 (58,3% пациентов, в области инцизуры – у 20 (58,8% и в теле – у 14 (58,3% пациентов. Все паци енты были H. pyi-позитивными.

Таким образом, при H. pyi-ассоциированном хроническом атрофиче ском гастрите, наибольшая частота экспрессии р53 обнаруживается при уме ренной и выраженной стадиях атрофии. При развитии метапластических изменений экспрессия р53 с большей частотой выявляется при кишечной ме таплазии, чем при псевдопилорической, что свидетельствует о более выра женном нарушении процессов апоптоза с повышением риска малигнизации.

рост клеток кУльтУрЫ спинного Мозга крЫсЫ поД ДействиеМ глицина Балашевич Т.В., Никандров В.Н.

ГНУ Институт физиологии НАН Беларуси, Минск Способность защищать клетки от избыточного действия катехоламинов, глутамата, аспартата, проявлять тормозную нейротрансмиссию практически во всех отделах НС, участие в синтезе глутатиона, белков, порфиринов, азо тистых оснований уже многие годы позволяют использовать глицин в лече нии инсульта, нейропатии, эпилепсии, судорожных состояний, различных нейродегенеративных заболеваний и деменций. Между тем, данные литера туры о влиянии данной аминокислоты на пролиферативную активность, рост и дифференцировку клеток нервной ткани малочисленны и фрагментарны. Более того, всплывают факты повреждающего действия глицина на клетки мозга. По изменению содержания ДНК, РНК и общего белка можно судить о скорости роста, развития и дифференцировки клеток в культуре. С такой позиции целесообразно изучить влияние глицина в широком диапазоне кон центраций на содержание полинуклеотидов и морфологические особенности клеток нервной ткани. Стерильно извлеченные эксплантаты спинного мозга 1–2 сут новорож денных крысят подвергали механическому и ферментативному диспергиро ванию (0,025% раствор трипсина. Клеточную суспензию высевали в чашки Петри (диаметр 35 мм со специальным покрытием в синтетическую пита тельную среду DE, содержащую 15% сыворотки крови (эмбриональная телячья + лошадиная сыворотка, 1:1 и 25 мкг/мл гентамицина. Клетки куль тивировали в СО2-инкубаторе при 37 °С со сменой среды каждые 3 суток. Через 14 суток количество клеток возрастало в 5–9 раз, большинство клеток достигло начальных этапов дифференцировки, а культура стала гетероген ной. Для исследования использовали питательную среду, содержащую 0,5% сыворотки, с целью исключить влияние ростовых факторов и питательных VIII Всероссийская конференция по патологии клетки веществ, содержащихся в сыворотке. На следующий день в среду вноси ли глицин в концентрациях 0,01 0,1 1,0 10,0 25,0 50,0 мМ. По истечении 72 ч определяли содержание РНК, ДНК, белка с использованием двухволно вой спектрометрии, которая описана в работе О. Wbg (1942 по методике Ю.Б. иллиповича (1975. Определение морфологических особенностей кле ток проводили с помощью прижизненной микроскопии (микроскоп «Op», Германия. Статистическую значимость полученных результатов оценивали при помощи теста непараметрического анализа (критерий Манна–Уитни в программе Sisic 6.0. В результате проведённого исследования было показано, что глицин уве личивал долю живых клеток первичной культуры спинного мозга во всём диапазоне концентраций. Оптимальные условия для развития нейронов и астроцитов отмечали при концентрации аминокислоты 0,01–25,0 мМ, а для развития олигодендроглии, которая является наиболее чувствительной к ги поксии и другим негативным факторам, – 25,0–50,0 мМ. В данном исследова нии главным неблагоприятным фактором является продолжительная депри вация сыворотки (72 ч.

Содержание ДНК и РНК в клетках изучаемой культуры под действием глицина на 11–27% превышало контрольные значения, что позволяет пред положить положительное влияние глицина на рост, развитие и пролифера тивную активность клеток спинного мозга. Достоверное увеличение уровня РНК отмечали в концентрациях аминокислоты 1,0 и 10,0 мМ. По результа там прижизненной микроскопии именно в этих концентрациях аминокисло ты дифференцировка нейронов достигала более законченного состояния, чем в контроле или других концентрациях (табл.. Дифференцировка нейронов проявлялась в формировании массивных аксональных и дендритных, дихо томической рамификации отростков, элонгации клеточной сомы, формирова нии тигроидной субстанции и взаимодействий по типу «нейрон–нейрон».

Таблица Содержание нуклеиновых кислот и белка в клетках культуры спинного мозга через 72 ч после влияния Концентрация глицина, мМ Биополимер, Контроль мкг/мл 0,01 0,1 1,0 10,0 25,0 50, 42,11 46,73 48,01 47,58 44,64 42,27 34, Белок ±6,58 ±2,29* ±2,02* ±8,09 ±5,04 ±3,90 ±2, 2,80 2,97 3,08 3,19 3,11 3,00 2, РНК ±0,20 ±0,40 ±0,38 ±0,10* ±0,14* ±0,29 ±0, 2,10 2,31 2,67 2,23 2,21 2,16 2, ДНК ±0,21 ±0,28 ±0,07* ±0,19 ±0,23 ±0,24 ±0, – различия достоверны по отношению к контролю при P 0,05 (5. Результаты представлены как ±s.

Сборник научных трудов Инкубация клеток культуры спинного мозга крыс с глицином в концен трации 0,01–10,0 мМ увеличивала количество внутриклеточного белка на 6–11%. Более высокое содержание глицина в культуральной среде угнетало синтез белка. Возможно, концентрация 50,0 мМ глицина является предпоро говой дозой, при которой цитотоксический эффект данной аминокислоты на чинает преобладать над общеметаболическим.

Изложенные данные позволяют считать, что глицин в концентрации 0,01–50,0 мМ оказывал положительное влияние на жизнеспособность, рост, развитие и дифференцировку клеток первичной культуры спинного мозга крысы в неблагоприятных условиях окружающей среды, что проявлялось в увеличении содержания макромолекул и изменении морфологии клеток. МетоДология патоМорфологиЧеского исслеДования операционного Материала при раке поДжелУДоЧной железЫ Балдин Д.Г., Цыганов С.Е., Сетдикова Г.Р., Паклина О.В.

ГУ Клиническая больница им. С.II. Боткина, Москва, Федеральное медико-биологическое агентство РФ, Клиническая больница №119, Новогорск Непременным залогом успешной диагностики и лечения опухолей подже лудочной железы (ПЖ является правильно полученный и обработанный опе рационный материал. Морфологическое исследование играет основную роль в оценке качества хирургического лечения и определении факторов риска разви тия локального рецидива.

елью работы явилась разработка протоколов морфологического исследо вания операционного материала при резекции поджелудочной железы.

Работа основана па операционном материале, полученном от 36 больных, находившихся на лечении в ГУ им. Боткина и КБ № 119 в 2009–2010 гг. по по воду протоковой аденокарциномы (ПАK – 30 случаев, эндокринноклеточного рака – 6 случаев. Среди больных преобладали мужчины – 29 человек, возраст больных колебался от 35 до 65 лет (средний возраст 50 лет.

Начальным этапом диагностики является подробное и последовательное макроскопическое изучение препарата. Оценивали размеры удаленной части органа или всех составляющих органокомплекса, в результате гастропанкреа тодуоденальной резекции (часть желудка, двенадцатиперстной кишки, дис тальный отдел общего желчного протока, желчный пузырь, начальный отдел тощей кишки, цвет и сохранность архитектоники паренхимы, плотность и ее равномерность. Затем приступали к непосредственному описанию опухо ли ПЖ (размер, цвет, плотность, макроскопическая распространенность на VIII Всероссийская конференция по патологии клетки смежные органы. Изучали изменения протоковой системы, оценивали про ходимость основных протоков зондами измеряли диаметр протоков в наи более узкой и широкой их части, описывали состояние слизистой. Для мор фологической оценки распространения ПK ПЖ брали фрагменты ткани, прилежащие к двенадцатиперстной кишке. Также исследованию подверга лись регионарные лимфоузлы, парапанкреатическая клетчатка со всех сто рон железы. Для оценки радикальности операции исследовали края резекции ПЖ, главного панкреатического и общего желчного протоков.

Предварительно окрашенную цветными чернилами (Микром часть уда ленной ПЖ вырезали параллельными пластинами толщиной 0,5 см, перпен дикулярно к главному панкреатическому протоку. Это позволяло определить правильную ориентацию кусочка, а при необходимости и идентификацию нескольких фрагментов ткани, обрабатываемой в одной кассете и фиксаци ей препарата в 10% нейтральном формалине в течение 24 ч. В дальнейшем пластины железы разрезали на фрагменты размером 1x1 см. Операционный материал изучали на серийных или ступенчатых срезах с целью уточнения характера процесса и гистотопографии рака железы. Гистологические сре зы окрашивали гематоксилином и эозином, при необходимости ставили им муногистохимические реакции. При микроскопическом исследовании ис пользовали следующий протокол: гистологический тип опухоли, степень ее злокачественности, стадию опухолевого процесса по системе pТN, ради кальность оперативного вмешательства, наличие периневральной инвазии, инвазии лимфатических сосудов и вен, изменения в окружающей опухоль па ренхиме железы, а также состояние удаленных лимфоузлов, согласно лимфа тическим коллекторам.

Таким образом, последовательное, подробное и комплексное морфологи ческое исследование операционного материала при раках ПЖ играет клю чевую роль в установлении характера новообразования и его гистогенеза, способствует определению степени структурной и функциональной диффе ренцировки опухолевых клеток, радикальности оперативного вмешательства. Все это играет важную роль в стадировании опухолевого процесса, выявле нии пациентов с высоким риском развития местного рецидива, определении индивидуального прогноза и плана лечения больных раком ПЖ.

Сборник научных трудов распреДеление Маркеров апоптоза в спайкаХ Брюшной полости в зависиМости от органотопиЧеской локализации Барканов В.Б., Воробьев А.А.

Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград Изучение спаечного процесса является важной задачей, решение кото рой может дать «ключ» к пониманию и, в конечном итоге, управлению этим процессом в клинических условиях. Актуальность изучения спаечного про цесса и межклеточных взаимодействий в спайках обусловлено тем, что до 90 % оперативных вмешательств на органах брюшной полости осложняет % оперативных вмешательств на органах брюшной полости осложняет % оперативных вмешательств на органах брюшной полости осложняет ся спайкообразованием (Imdi.N.., 2008. Особый интерес представ Imdi.N.., 2008. Особый интерес представ.N.., 2008. Особый интерес представ.N.., 2008. Особый интерес представ.N.., 2008. Особый интерес представ N.., 2008. Особый интерес представ.., 2008. Особый интерес представ., 2008. Особый интерес представ., 2008. Особый интерес представ., 2008. Особый интерес представ., 2008. Особый интерес представ ляет изучение апоптоза в спайках, так как выраженность данного процесса влияет на прогрессирование спаечного процесса, частоту рецидивов спайкоо бразования после адгезиолизиса и скорость развития спаек (Sd G.., Di Sd G.., Di G.., Di G.., Di.., Di., Di., Di Di md.P., 2002.

Исследование апоптоза в спайках требует не только количественного или морфологического исследования спаек. Важным представляется изучение процесса запрограммированной гибели клеток в структуре самой спайки (Li- Li s T.., 2001. ель настоящего исследования – установить морфологические законо мерности процесса апоптоза в спайках брюшной полости в зависимости от их локализации.

Работа была выполнена на операционном материале спаек, полученных от 30 пациентов. Исследуемые спайки были разделены в зависимости от ме ста прикрепления на участки, припаянные к печени, желчному пузырю и две надцатиперстной кишке. Вторым местом прикрепления во всех случаях был большой сальник. Для проведения морфологического исследования спайки фиксировали в нейтральном 10% формалине, материал заливали в парафин по стандартной методике, срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван Гизон. Иммуногистохимическое исследование проведено с использова нием моноклональных антител к маркеру апоптоза – индуцибельной каспа зе-3 – наборами DCymi (Gsp, Дания. Морфометрическая обра DCymi (Gsp, Дания. Морфометрическая обра (Gsp, Дания. Морфометрическая обра Gsp, Дания. Морфометрическая обра, Дания. Морфометрическая обра ботка цифровых фотографий произведена при помощи программы Img T f Widws,.3.00 (THSCS, S. 2002 и оригинального программного пакета «Ps», 2006, что позволило разделить бинаризированное и негати Ps», 2006, что позволило разделить бинаризированное и негати », 2006, что позволило разделить бинаризированное и негати визированное изображение спайки на 100 областей с определением яркости каждого участка в системе RGB с экспортом в матрицу Exc.

Математическая обработка проводилась непосредственно из общей матри цы данных Exc (icsf, S с привлечением возможностей программ VIII Всероссийская конференция по патологии клетки STTGRPH 5.1 (icsf, S и включала определение показателей сред ней, её среднеквадратичного отклонения и ошибки репрезентативности.


При морфометрическом исследовании спаек было обнаружено, что экс прессия каспазы-3 различается в зависимости от органотопической локали зации. Так, в ткани спаек, фиксированных к печени, относительная площадь, занимаемая иммунопозитивным материалом, составляла 8,63±0,94 %. В спай ках, фиксированных к желчному пузырю, экспрессия каспазы-3 обнаружена на 4,15±0,47 % от общей площади. Спайки, припаянные к двенадцатиперст ной кишке, экспрессировали каспазу-3 на 6,32±1,01 % площади. Распределе ние каспазы-3 на протяжении спаек от места органотопической фиксации до сальника также имело различие (рис. 1.

Рис. 1. Экспрессия каспазы-3 в спайках брюшной полости в зависимости от места органотопической фиксации.

Так, в ткани спаек, фиксированных к печени, экспрессия каспазы-3 име ла вид нормального распределения, с низким уровнем в областях фиксации и высоким уровнем иммунопозитивных клеток в середине спайки. В спайках, адгезированных к желчному пузырю, наибольший уровень каспазы-3 отме чался в области прикрепления к желчному пузырю, в то время как другие участки характеризовались низким уровнем экспрессии каспазы-3. Исследо вание спаек, фиксированных к двенадцатиперстной кишке, показало, что до стоверно значимых различий между экспрессией каспазы-3 в разных участках спаек нет, иммунопозитивный материал относительно равномерно распреде лялся в структуре спаек.

Таким образом, можно говорить о наличии градиента экспрессии каспа зы-3 в структуре спаек брюшной полости с различной органотопической фиксацией.

Сборник научных трудов УльтрастрУктУрнЫе критерии поврежДения клеток ДЫХательной и пищеварительной систеМ при аллергиЧеской альтерации Бархина Т.Г., Голованова В.Е., Гущин М.Ю., Кондратьев В.Е.

НИИ морфологии человека РАМН, Москва В экологически неблагоприятных регионах аллергические заболевания являются наиболее распространенными среди общей заболеваемости. Учи тывая тенденцию данных болезней к омоложению, актуальность проблемы всё время возрастает. Следует особо отметить, что клеточные и особенно суб клеточные изменения при этом касаются разных клеточных популяций и име ют некоторые характерные особенности, обнаруженные при аллергическом рините (АР, бронхиальной астме (БА, атопическом дерматите, частично подтвержденные в эксперименте. Поэтому целью нашего исследования явил ся поиск и анализ ультраструктурных критериев изменений эпителиальных клеток при АР и БА и попытка оценить полученные критерии при экспери ментальном моделировании. Были исследованы соскобы слизистой оболочки из полости носа, бронхо альвеолярные смывы, биоптаты тонкой и толстой кишки пациентов при АР и БА, а также экспериментальный материал (легкие, тонкая и толстая кишка после введения морским свинкам гетерологичных антимитохондриальных антител (имитация аутоаллергической альтерации. Материал был исследо ван на полутонких срезах при помощи сканирующей (СЭМ и трансмиссион ной (ТЭМ электронной микроскопии.

Установлено, что при аллергических заболеваниях дыхательной системы (АР и БА наблюдаются морфофункциональные сдвиги не только в клетках респираторных органов, но и в органах пищеварительной системы и в клет ках периферической крови.

При исследовании эпителиальных клеток слизистых оболочек носа и бронхов установлено, что реснитчатые (РК и бокаловидные клетки (БК подвергаются значительным изменениям с определенными характерными признаками. В РК отмечены 3 основных ультраструктурных признака: 1 деформация, сглаживание или утолщение ресничек 2 просветление гиало плазмы и нуклеоплазмы с локусами внутриклеточных отеков 3 деструкция органелл, ответственных за белковый синтез. Эти 3 признака главенствуют в cлизистой оболочке как носа, так и бронхов. Ультраструктурные изменения в БК отличаются значительной гетерогенностью: 1 отечность, гипертрофия и гиперплазия БК 2 перерастянутость секреторными гранулами, нарушение целостности апикальных мембран 3 при ТЭМ отмечены гетерогенные по VIII Всероссийская конференция по патологии клетки электронной плотности гранулы муцина, нарушения целостности апикаль ных мембран, значительные повреждения ядер, признаки готовности клеток к апоптозу. Схожие изменения наблюдаются в эпителии органов пищеварительной системы. Следует особенно отметить однотипность изменений БК обеих си стем, что подкрепляется фактом единства гистогенеза эпителия дыхательной и пищеварительной систем и межтканевым единством: бронхиальный и аль веолярный эпителий и эпителиальная выстилка пищеварительной системы относятся к системе пограничных тканей.

При сравнительном анализе изменений, выявленных в эпителии тонкой и толстой кишки, следует отметить увеличение количества и степени структур ных нарушений в дистальном направлении, схожие изменения эпителиоци тов и однотипность повреждений митохондрий.

Как и в дыхательной системе, отмечена особая причастность к патоло гическому процессу именно БК тонкой и толстой кишки. Они находились в разной стадии накопления секрета, что создавало яркую мозаичность сре зов ворсинок и крипт. Многие БК были перерастянуты секреторными гра нулами, отмечены признаки клазматоза. При ТЭМ наблюдалась отечность клеток, просветление гиалоплазмы, расширение пространства упорядочен ных и сглаженных интердигитаций, нечеткие контуры боковых мембран. В переполненных БК наблюдались гетерогенные по электронной плотности гранулы муцина, значительные повреждения ядер. В цитоплазме выявлена гиперплазия свободно лежащих полисом, изменения эндоплазматического ретикулума, редукция комплекса Гольджи, отмечено исчезновение внутри митохондриальных электронноплотных включений.

При исследовании тканей толстой кишки на полутонких срезах наблюда лись более выраженные структурные нарушения: расширение межклеточных промежутков, отечность и расслоение стромы, хаотичность коллагеновых фибрилл, вакуольная дистрофия энтероцитов. На ультратонких срезах тол стой кишки наблюдалась яркая общая реакция митохондрий эпителиальных клеток: резкое набухание, увеличение расстояния между наружными и вну тренними кристами, фрагментация и дискомплексация крист, гомогенизация матрикса. В матриксе митохондрий обнаружены миелиноподобные структу ры, кристаллоидные и концентрические фигуры, признаки неполноценно сти мембран. В энтероцитах наблюдались изменения, свидетельствующие о нарушении белкового обмена, просветление гиалоплазмы и нуклеоплазмы, перераспределение митохондрий к апикальной части клеток. Субмикроско пические изменения в БК были разнообразные: структурные нарушения ре Сборник научных трудов гистрировались от дна крипт до апикальной части, наблюдалось чередование «светлых» и «темных» БК, все клетки имели гетерогенные секреторные гра нулы, обнаруживались деструктивные изменения ядер и ядрышек, отмеча лись изменения метаболического характера. Выявленные ультраструктурные нарушения в эпителиальных клетках ды хательной и пищеварительной систем свидетельствуют об их активном во влечении в процесс аллергической альтерации. Характерные ультраструк турные повреждения клеток разных органов отражают полиспецифичность аллергических и аутоаллергических процессов и их широкое влияние на раз ные системы организма.

влияние окислительного стресса на локализацию и свойства яДрЫшкового Белка фиБрилларина в кУльтУре клеток Hela Барыкина Н.В.

Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва Ядрышко – специализированный клеточный компартмент, служащий для образования рибосом в состав ядрышек клеток человека HL входит око HL входит око входит око ло 700 белков. Отличительной особенностью ядрышка является его высокая чувствительность к внешним воздействиям, особенно тем, которые вызыва ют клеточную смерть. Под действием стрессовых факторов ядрышко изменя ет общую структурную организацию и функциональную активность, о чем свидетельствуют, в частности, изменения локализации ключевых ядрышко вых белков. Большинство реакций клетки на внешние стимулы сопровождается изме нением окислительно-восстановительного баланса, что связано с образова нием активных форм кислорода. Роль активных форм кислорода в изменении функционального и белкового состояния ядрышка на данный момент неиз вестна. елью данной работы являлось изучение воздействия окислительно го стресса, вызываемого перекисью водорода (Н2О2 на локализацию и под вижность белка фибрилларина, участвующего в транскрипции, а также на функциональную активность ядрышка клеток человека в целом.

Эффекты воздействия окислительного стресса на локализацию фибрилла рина изучали с помощью метода непрямой иммуноцитохимии. Подвижность белка ядрышка исследовалась методами иммуноблоттинга и RP с помощью конфокальной лазерной микроскопии. ункциональная активность ядрышка VIII Всероссийская конференция по патологии клетки оценивалась методами РНК-ДНК гибридизации i si, визуализации транс крипции с помощью предшественников БрУТ и 5-флуороуридина, а также путем гель-электрофореза суммарной клеточной РНК. Кроме того, мы сопо ставили ответ ядрышка с изменением состояния других систем клетки, вклю чая митохондрии и цитоскелет, в ответ на окислительный стресс.

Воздействие 50–100 мкм Н2О2 в течение 0,5–2 часов приводит к суще ственному изменению локализации фибрилларина: фибрилларин мигриро вал в нуклеоплазму, тогда как в нормальных клетках белок располагался в виде фокусов в ядрышке.

Воздействие 100 мкМ Н2О2 не вызывает массовой гибели клеток, о чём свидетельствуют данные микроскопического анализа, а также выявление маркерного белка поздних стадий апоптоза, PRP-1, на иммуноблотах. Изменения в локализации белка совпадают с дезорганизаци ей митохондрий, о чём свидетельствует прижизненная окраска клеток кра сителем TRE. Миграция фибрилларина из ядрышек сопровождается за. медлением электрофоретичекой подвижности белка. Реакция фибрилларина происходит одновременно с реорганизацией актинового и тубулинового ци тоскелета. Данные конфокального анализа показали, что после воздействия окислительного стресса существенно изменяется доля мобильной, т. е. актив ной, фракции белка.

Полученные результаты позволяют заключить, что белок ядрышка фи брилларин быстро и, более того, специфичным образом реагирует на окис лительный стресс, вызываемый в клетках HL пероксидом водорода. Изменение в локализации белка происходит после 30 мин воздействия окис лительного стресса. А уменьшение электрофоретической подвижности уже в течение первых 5 мин инкубирования с Н2О2 свидетельствует в пользу из менения молекулярной массы фибрилларина в результате окислительного стресса. Хорошо согласуются с полученными данными наблюдения об из менении доли мобильной фракции фибрилларина после фотообесцвечива ния области ядрышка. Работа имеет не только фундаментальное значение, но представляет также практический интерес в связи с тем, что окислительный стресс, сопровождающийся изменением морфофункционального состояния ядрышка, связан со многими заболеваниями, в частности, с болезнями Альц геймера и Паркинсона. Сборник научных трудов перифериЧеское ввеДение лиганДов Мю-опиоиДнЫХ рецепторов изМеняет соДержание Бета-энДорфина в МежклетоЧноМ пространстве поясной корЫ Мозга крЫс и повеДение животнЫХ при МоДелировании эМоционального стресса Башкатова В.Г., Колпаков А.А., Умрюхин А.Е., Судаков С.К.

НИИ морфологии человека РАМН, НИИ нормальной физиологии им. П.К. Анохина РАМН, Москва Установлено, что эндогенная опиоидная система мозга наряду с други ми нейротрансмиттерными системами играет важную роль в механизмах эмоционального стресса. Известно, что структура опиоидных рецепторов и эндогенных опиоидных пептидов в НС и на периферии одинакова, од нако центральные и периферические функции эндогенной опиоидной си стемы различны, что достигается избирательной проницаемостью гемато энцефалического барьера (ГЭБ для большинства опиоидных пептидов. В связи с этим, центральные и периферические функции эндогенной опи оидной системы исследуются раздельно. В наших недавних экспериментах показано, что центральное и периферическое звено эндогенной опиоидной системы функционируют как единое целое, взаимодействуя между собой по принципу реципрокности. елью данной работы явилось изучение влияния лигандов мю-опиоидных рецепторов, не проникающих через ГЭБ, на выделение бета-эндорфина из нервных окончаний передней поясной коры мозга, а также на показатели эмо циональности крыс в условиях моделирования эмоционального стресса. Работа выполнена на 102 половозрелых крысах-самцах Вистар. Экспери менты проводились в соответствии с требованиями приказа № 267 МЗ Р (19.06.2003 г.. Первая часть исследования была посвящена определению со держания бета-эндорфина в мозге крыс до, во время и после действия стрес сорных факторов. Содержание бета-эндорфина в межклеточном простран стве поясной коры мозга крыс определяли с помощью метода микродиализа с последующим проведением иммуноферментного анализа в полученных диа лизатах. Первый диализат собирали в условиях свободного поведения крыс за 1 ч до стрессорной нагрузки, второй – во время 1 ч иммобилизации крыс на платформе, а третий – в условиях свободного поведения крыс в течение 1 ч после их освобождения от стрессорной нагрузки. Определение уровня тревожности проводили путем тестирования животных в приподнятом кре стообразном лабиринте (ПКЛ. Для оценки состояния депрессивности крыс использовали тест Порсолта («принудительное плавание». Для проведения биохимических и поведенческих экспериментов животные были разделены VIII Всероссийская конференция по патологии клетки на 3 группы. Крысы контрольной группы получали дистиллированную воду, животные 1-ой группы – раствор антагониста мю-опиоидных рецепторов ме тилналоксона и животные 2-ой группы – раствор агониста этих рецепторов лоперамида. В результате экспериментов установлено, что иммобилизационный стресс приводил к незначительному увеличению концентрации бета-эндорфина в межклеточном пространстве передней поясной коры мозга крыс. Внутри желудочное введение антагониста мю-опиоидных рецепторов метилналок сона вызвало трехкратное увеличение содержания этого пептида в поясной коре. Однако, введение агониста лоперамида привело лишь к несуществен ному снижению выброса бета-эндорфина. Иммобилизационный стресс на фоне введения лоперамида вызвал выраженный выброс бета-эндорфина из нервных окончаний передней поясной коры, в то время как введение метил налоксона практически не влияло на изменения уровня бета-эндорфина при стрессе. В результате проведения поведенческих экспериментов было обнаружено, что введение как лоперамида, так и метилналоксона приводило к снижению уровня тревожности животных. Наибольшие изменения наблюдались после введения агониста мю-опиоидных рецепторов лоперамида. При исследова нии поведения животных в тесте «принудительное плавание» было показано, что после введения антагониста мю-опиоидных рецепторов метилналоксона происходит увеличение общего времени погружений и уменьшение времени активного плавания. При введении агониста этих рецепторов лоперамида по добных изменений не наблюдалось. Таким образом, установлено, что периферическое введение лоперамида оказывает, в основном, анксиолитическое действие, в то время как перифе рическое действие метилналоксона выражается в основном в депрессивном влиянии. Эти результаты коррелируют с полученными данными об усилении выброса бета-эндорфина из нервных окончаний в коре мозга крыс при пери ферическом введении метилналоксона. Введение лоперамида вызывало неко торое уменьшение выброса бета-эндорфина, однако эмоциональный стресс приводил к массивному выбросу бета-эндорфина, чего не наблюдалось при введении метилналоксона. По-видимому, именно это и обуславливало проти вотревожное действие лоперамида. Полученные данные в очередной раз подтверждают гипотезу реципрок ного взаимодействия центрального и периферического звеньев эндогенной опиоидной системы. Подавление активности периферических опиоидных рецепторов, вероятно, располагающихся в слизистой оболочке желудочно кишечного тракта, приводит к увеличению выделения бета-эндорфина в по ясной коре мозга крыс, что свидетельствует об активации центрального зве Сборник научных трудов на эндогенной опиоидной системы. Активация периферических опиоидных рецепторов лоперамидом приводит к подавлению активности центрального звена, по-видимому, в основном за счет обнаруженного нами ранее, суще ственного снижения плотности опиоидных рецепторов в коре мозга, а не в ре зультате снижения выброса бета-эндорфина из окончаний нервных клеток. Работа выполнена при поддержке гранта РИ № 08-04-00780.

влияние сеМакса на Морфологию МиокарДа и Уровень апоптоза карДиоМиоцитов при развитии инфаркта МиокарДа У крЫс Бердалин А.Б., Гаврилова С.А., Голубева А.В., Буравков С.В., Кошелев В.Б.

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва Ранняя реперфузия при инфаркте миокарда (ИМ уменьшает размеры зоны некроза и улучшает качество жизни пациентов. Однако как клиницисты, так и экспериментаторы отмечают, что при ИМ страдают регионы сердца, напрямую не задетые ишемией, возможно из-за сократительного стресса или из-за воздей ствия на миокард факторов воспаления, а реперфузия не всегда способна улуч шить состояние этих зон. В наших более ранних исследованиях Семакс, нейро протекторный пептид (фрагмент АКТГ4-7, примененный в острую стадию ИМ благоприятно влиял на ремоделирование миокарда, нормализовывал баланс между энергообеспечиващим и сократительным аппаратами кардиомиоцитов, улучшал рабочие характеристики миокарда, не влияя при этом на размер зоны некроза (Гаврилова С.А., Голубева А.В. и др., 2008. Мы предположили, что Се макс может улучшать состояние условно интактного миокарда. Именно состоя ние и количество ткани миокарда, не затронутой ишемией, является определяю щим в прогнозе у пациентов с ИМ.

елью нашего исследования являлась оценка влияния Семакса на морфоло гию миокарда крысы и уровень апоптоза кардиомиоцитов в условиях ишемии и ишемии-реперфузии в особенности в регионах сердца, непосредственно не за детых ишемией. Необратимую ишемию и реперфузию после 2,5-часовой ишемии моделиро вали на самцах Rs gics по методу Селье (Гаврилова С.А., 2006. Про Rs gics по методу Селье (Гаврилова С.А., 2006. Про gics по методу Селье (Гаврилова С.А., 2006. Про gics по методу Селье (Гаврилова С.А., 2006. Про по методу Селье (Гаврилова С.А., 2006. Про бы забирали из зоны риска и областей, непосредственно не задетых ишемией: передней стенки левого желудочка (ПС верхней части боковой стенки левого желудочка (БС и межжелудочковой перегородки (МП через 3 сут после опе рации. Семакс вводили в/бр в дозе 150 мг/кг через 15 мин и через 2 ч 15 мин от начала коронароокклюзии. Пробы фиксировали по стандартным методикам для проведения гистологического анализа на светооптическом уровне и окрашивали VIII Всероссийская конференция по патологии клетки гематоксилином-эозином. Апоптоз выявляли методом TNEL-анализа при по TNEL-анализа при по -анализа при по мощи набора ppTg (CHEICON.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 11 |
 

Похожие работы:





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.