авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:   || 2 | 3 | 4 |
-- [ Страница 1 ] --

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

«Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии» УГСХА

Ульяновская МОО «Ассоциация

практикующих ветеринарных врачей»

ВОПРОСЫ

МИКРОБИОЛОГИИ, ЭПИЗООТОЛОГИИ И

ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ

«Актуальные проблемы

инфекционной патологии и

биотехнологии»

Материалы II-й межвузовской студенческой научной конференции 30-31 марта 2009 года Ульяновск 2009 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 631 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии / Материалы II-й межвузовской студенческой научной конференции. – Ульяновск: УГСХА, 2009.– 120с.

Сборник содержит материалы исследований студентов ВУЗов Ульяновской области по актуальным проблемам микробиологии, вирусологии, иммунологии и биотехнологии. Рассмотрены вопросы диагностики, лечения и профилактики инфекционных заболеваний людей и животных. Приводятся современные методы исследования пищевых продуктов и их санитарная оценка.

Для научных работников, преподавателей, аспирантов, студентов биологических, медицинских и ветеринарных специальностей.

Редакционная коллегия:

Д.А. Васильев, зав.каф.МВЭиВСЭ (гл. редактор), С.Н. Золотухин, декан ФВМ (зам. гл. редактора), Ю.Б. Никульшина, отв. по НИРС каф.МВЭиВСЭ (отв. редактор) Авторы опубликованных статей несут ответственность за патентную чистоту, достоверность и точность приведённых фактов, цитат, статистических данных и прочих сведений. Статьи приводятся в авторской редакции.

© ФГОУ ВПО «УГСХА», кафедра МВЭиВСЭ Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Основные тематические направления конференции:

Новые методы исследований в микробиологии и вирусологии;

Актуальные проблемы биотехнологии и иммунологии;

Современные методы исследования пищевых продуктов;

Вопросы ветеринарно-санитарной экспертизы пищевых продуктов;

Эпидемиология и эпизоотология особо опасных, малоизученных, экзотических инфекций;

Методы диагностики, лечения и профилактики инфекционных болезней животных и людей.

Секции:

«Новые методы исследований в микробиологии»

«Актуальные проблемы вирусологии, биотехнологии и иммунологии»



«Современные проблемы эпизоотологии и эпидемиологии»

«Современные методы исследования и ветеринарно-санитарной экспертизы пищевых продуктов»

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Секция «Новые методы исследований в микробиологии»

Бактериофаги – «пожиратели бактерий»

Вагин А.С. – студент 2 курса ФВМ Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Первые сообщения о растворении микроорганизмов появились в конце XIX – начале XX столетий. В 1898 году русский учёный Н.Ф. Гамалея обнаружил, что при обработке дистиллированной водой бацилл сибирской язвы выделяется специфическое вещество, которое обусловливает просветление взвеси сибиреязвенных палочек и растворяет свежевыращенную культуру. Это специфическое вещество исследователь назвал бактериолизином и высказал мнение, что оно образуется бактериями при их распаде. Однако отсутствие в то время экспериментального материала не позволяло ему сделать окончательный вывод об этом феномене [4].

Оставалась без внимания и работа F. Twort, который в 1915 году при посеве оспенного детрита на питательный агар обнаружил среди колоний белого стафилококка стекловидные колонии. Фильтрат из последних, разведённый 1:6, образовывал стекловидные колонии на газоне стафилококковой культуры, на основании чего автор предположил, что действующим началом является новая, более низкая, чем у бактерий, форма живых существ, состоящая из протоплазмы или энзимов, способная возникать и размножаться эндогенно. Позднее канадский микробиолог Д'Эрелль опубликовал обширные материалы, привлекшие всеобщее внимание к феномену растворения микробов. Учёный обнаружил в фильтрате из испражнений выздоравливающего больного, страдающего тяжёлой формой дизентерии, вещество, которое при пересеве растворяло свежевыделенную культуру палочки Шига, при этом активность вещества при каждом пересеве увеличивалась. На основании проведенных исследований Д'Эрелль создал новую, весьма привлекательную теорию о том, что наблюдаемое им растворение дизентерийных бактерий вызывается не веществом, а живым существом – ультрамикроскопическим паразитом бактерий, невидимым в обычном микроскопе даже при самом сильном увеличении. Образуемые им стерильные пятна на газоне агаровой культуры, по представлению исследователя, есть не что иное, как колонии размножившихся живых существ, которых он назвал бактериофагами, что в переводе с греческого означает «пожиратели бактерий». Это название используется до настоящего времени, хотя оно и не отвечает в полной мере современным представлениям о природе фага и его взаимодействии с бактериями, отражая лишь одну из сторон этого процесса – лизис микробной клетки [1, 2].

После открытия явлений бактериофагии Д'Эрелль развил учение о том, что бактериофаги патогенных бактерий, являясь их паразитами, играют Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии большую роль в патогенезе инфекций, обеспечивая выздоровление больного организма, а затем создания специфического иммунитета. Это положение привлекло к явлению бактериофагии внимание многих исследователей, которые предполагали найти в фагах важное средство борьбы с наиболее опасными инфекционными болезнями человека и животных [4].





В настоящее время известны фаги почти у всех видов патогенных и сапрофитных бактерий.

Первые попытки практического использования бактериофагов были предприняты в медицине с лечебно-профилактической целью. Имеются сообщения, свидетельствующие о положительном лечебно-профилактическом действии препаратов бактериофагов, использованных во время эпидемии холеры, при дизентерии и других желудочно-кишечных инфекциях [2].

Бактериофаги можно выделить из различных материалов, где находятся или могли находиться бактерии, в которых фаг размножается.

При выделении фагов из объектов внешней среды исследователи чаще всего использовали два метода. Сущность первого состоит в том, что исследуемый материал фильтруют через бактериальные фильтры, полученные фильтраты высевают с индикаторными бактериями в питательный бульон, который инкубируют в термостате при 37С в течение 14-18 часов. Сущность второго метода сводиться к тому, что материал, из которого выделяют фаг, помещают в жидкую питательную среду совместно с индикаторной культурой, после чего культуру фильтруют через бактериальные фильтры. Полученный фильтрат исследуют на наличие фага на плотных и в жидких питательных средах.

Выделенные из внешней среды фаги, как правило, характеризуются неоднородностью и представляют собой смесь фагов. Для изучения биологических свойств фага и дальнейшей работы с ним необходимо использовать «чистые» линии. С этой целью исследователи проводят клонирование бактериофага или селекцию клона фага методом многократного пассирования фага на индикаторной культуре с периодической отвивкой характерной негативной колонии в питательный бульон с культурой лизируемого микроорганизма [3].

Несмотря на огромное число фагов, обнаруженных у бактерий, их морфологическое разнообразие весьма ограничено. Как правило, фаг имеет оболочку – капсид, внутри которого находится линейная двухцепочная ДНК;

реже носителем генетической информации служит ковалентно замкнутая кольцевая одноцепочная ДНК либо даже РНК. У большинства фагов капсид представляет собой полиэдрическую структуру с отростком и базальной пластиной в качестве органеллы адсорбции либо без них и содержит определенное количество ДНК. Однако у немногих фагов капсид имеет нитевидную форму;

сборка фаговой частицы при этом осуществляется вокруг ДНК и длину зрелого фага определяет длина ее молекулы.

Процесс репродукции бактериальных вирусов условно можно разбить на несколько, более или менее, последовательных стадий, хотя один процесс Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии постепенно переходит в следующий: адсорбция, инфицирование, репликация фага и лизис клетки [1, 2].

Значение бактериофагов для лабораторной диагностики ряда инфекций этот биологический объект не только не утратил, а, наоборот, начал привлекать к себе всё более пристальное внимание исследователей. С каждым годом повышается значимость бактериофагов как высоко специфического диагностического средства, позволяющего надёжно дифференцировать возбудителей бактериальных инфекций, а порой проводить более детальную дифференциацию отдельных вариантов внутри данного вида. Возможность фагоидентификации основана на специфичности действия фагов, которая может быть настолько выражена, что позволяет дифференцировать не только отдельные виды, но и отдельные штаммы того же вида микробов.

Метод фагодиагностики давно используется в лабораторной практике для идентификации различных видов микроорганизмов [5].

Литература Адамс М. Бактериофаги. – М.: Медгиз, 1961. – 521 с.

1.

Гольдфарб Д.М. Бактериофагия. – М.: Медгиз, 1961. – 299 с.

2.

Золотухин С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических 3.

биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий:

Автореф. дис. … д-ра биол. наук. – Ульяновск, 2007. – 39 с.

Крылов В.Н. Фаготерапия // Химия и жизнь. – 2002. – № 3. – С. 11-15.

4.

Ревенко И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. – Киев:

5.

Урожай, 1978. – С. 88.

Диагностика бактериальных болезней рыб Смолькина С., Бахаровская Д. – ст-ки 2 курса ФВМ Руководитель: Померанцев Д.А.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Бактериальные болезни рыб являются наиболее опасными, так как в условиях водной среды вести борьбу с ними очень сложно. На характер проявления и течения бактериальных болезней большое влияние оказывают технологические условия воспроизводства рыб и степень интенсификационных процессов, общий уровень культуры производства рыбы на каждом биотехническом цикле её выращивания и содержания.

У рыб, культивируемых в условиях промышленного рыбоводства и выращиваемых в естественных рыбохозяйственных водоёмах, а также на рыбозаводах по воспроизводству лососевых, осетровых, сельдевых и других видов рыб, возбудителями бактериальных болезней чаще всего являются патогенные формы бактерий, относящиеся к родам: Aeromonas, Pseudomonas, Vibrio, Chondrococus, Cytophaga, Mycobacterium и некоторые другие. Однако наи-большее практическое значение имеют аэромонозы рыб – аэромоноз карпов, аэромоноз(фурункулёз) лососевых, псевдомоноз карповых рыб, бактериаль-ная гибель плавников, вибриоз, миксобактериоз, микобактериоз.

Симптомы многих заболеваний похожи, к тому же рыба может быть поражена Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сразу несколькими болезнями, поскольку ослабленная болезнью рыба легко поражается бактериальной инфекцией. Поэтому иногда постановка диагноза достаточно сложна. Для бактериальных болезней диагноз ставят комплексно по результатам бактериалогических исследований с учетом эпизоотологических данных, клинических признаков и патологоморфологических изменений.

Бактериологические исследования. Для доказательства бактериальной этиологии болезней рыб необходимо выделить возбудителя из организма больных рыб, идентифицировать его по культурально-морфологическим, антигенным и биологическим признакам, воспроизвести болезнь на здоровых рыбах, повторно выделить (реизолировать) возбудителя от экспериментальных животных. Все эти исследования проводят по общепринятой схеме с учетом особенностей организма рыб и возбудителей болезней.

Лабораторная диагностика бактериальных болезней рыб Патологический материал от больных рыб Посевы на МПБ, МПА, Микроскопия мазков кро дифференциальные среды ви и отпечатков органов Выращивание первичных Окраска по Грамму, окрас- Миксобактерии, ми культур ка на оксидазу кобактерии и др.

Чистые культуры сем.Vibrionaceae и др.

I.Изучение биохи- II.Определение пато- III.Изучение антигенных мических свойств генности свойств 1.Среды Гиса 1.Заражение рыб того 1.Капельная РА со же вида смесью сывороток 2.Среда Хью-Лейфсона 2.Клинические признаки 2.Капельная РА с моно валентной сывороткой 3.Протеолитическая 3.Реизоляция возбудителя 3.Пробирочная РА с активность и др. моновалентной сыво роткой.

Бактериологические посевы проводят вначале с пораженных участков кожи, мышц, жаберной ткани, крови и асцитной жидкости, а после вскрытия полости – обязательно с печени, почек и селезенки. Первичные бактериологические посевы проводят на МПБ, МПА и некоторые дифференциальные среды.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Целью наших дальнейших исследований будет определение распространенности, видового состава и интенсивности бактериальных заболеваний рыб в рыбопромысловых хозяйствах Ульяновской области.

Идентификация бактерий вида Pasterella multocida по биологическим свойствам Асулян К.В., Лаптева Н.Д. – студентки 2 курса ФВМ Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Вид Pasterella multocida вызывает заболевание пастереллез. Пастереллез (геморрагическая септицемия) – инфекционная болезнь с преимущественно аэрогенным механизмом передачи, характеризующаяся разнообразным клиническим проявлением – от бессимптомного носительства до тяжелых септических форм. Воротами инфекции являются органы дыхания, возможен алиментарный путь заражения и через поврежденную кожу [1, 3].

Для идентификации бактерий вида Pasterella multocida используются тесты на биохимические свойства [2].

Целью исследования является идентификация бактерий вида Pasterella multocida с помощью биохимических свойств, особенностей роста на различных питательных средах.

Материалы и методы В качестве исследуемого материала был использован штамм бактерий вида Pasterella multocida, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии ветеринарно-санитарной экспертизы УГСХА.

Для работы с ним использовали следующие питательные среды:

мясопептонный бульон (МПБ), бульон Хоттингера, мясопептонный агар (МПА), кровяной мясопептонный агар.

Для получения изолированных колоний применяли метод посева штрихом на чашках с плотной питательной средой. Пробирки и чашки Петри с посевами инкубировали при 37°С в течение 24 часов. Для изучения цитологических свойств проводили окраску по Граму.

Идентификацию культуры проводили по биохимическим тестам, используя среды Гисса с глюкозой, маннитом, сахарозой, маннозой;

способности разжижать желатин и тест на подвижность.

Результаты исследований Штамм бактерий вида Pasterella multocida засевали в МПБ и бульон Хоттингера. В МПБ рост культуры сопровождался сначала слабым помутнением, через 24 ч наблюдали просветление среды и выпадение на дно пробирки осадка, поднимающегося при встряхивании в виде косички.

В бульоне Хоттингера рост культуры проявлялся аналогичным образом – сначала слабым помутнением, затем наблюдали просветление среды и выпадение на дно пробирки осадка, поднимающегося при встряхивании.

Исследуемую культуру окрашивали по Граму. В мазках полученных из бульонной культуры обнаружили грамотрицательные короткие с Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии закругленными концами овоидные палочки – биполяры, расположенных одиночно или попарно. При окраске по методу Ольта была обнаружена капсула.

Бульонную культуру посеяли на плотные питательные среды. Через часа культивирования при температуре 37С просматривали посевы исследуемого материала для выявления характерных особенностей роста колоний. На 1,5% МПА исследуемая культура росла в виде прозрачных, мелких (до 1,5 мм в диаметре), округлых с ровными краями, имевших слизистую консистенцию и серый цвет колоний.

Для изучения биохимических свойств суточную агаровую культуру высевали на среды Гисса с глюкозой, маннитом, сахарозой, маннозой, в молоко, желатин, на кровяной сывороточный агар. Образование индола выявляли с помощью индикаторных бумажек. Выделенная культура сбраживала глюкозу, сахарозу, маннозу. Маннит, молоко и желатин данный микроорганизм не ферментировал. Исследуемый микроорганизм образовывал индол, не лизировал эритроциты (табл. 1).

Таблица Биохимические свойства бактерий вида Pasteurella multocida Ферментируемые вещества Pasteurella multocida глюкоза + сахароза + маннит манноза + молоко желатин образование индола + Выводы Таким образом, по культуральным, тинкториальным и морфологическим свойствам исследуемая культура подтвердила принадлежность к виду Pasteurella multocida.

Литература Васильев Д.А., Золотухин С.Н., Никишина Н.М. Методы общей бактериологии. 1.

Ульяновск, 1998.

Доморадский И.В. Возбудители пастереллезов и близких к ним заболеваний. – М.:

2.

Медицина, 1971.

Конопаткин А.А. Эпизоотология и инфекционные болезни сельскохозяйственных 3.

животных. – М.: Колос, 1984.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Применение тест-систем для ускоренной идентификации микроорганизмов при изучении ферментативных свойств бактерий Yersinia pseudotuberculosis Гурьянова О.П. – студентка 2 курса ФВМ Руководители: Катмакова Н.П., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Инфекция, вызываемая Y. pseudotuberculosis, относится к зоонозам и занимает важное место среди кишечных инфекций [2]. Заболевание встречается повсеместно, хотя и неравномерно. В последние десятилетия получены многочисленные данные о циркуляции Y. pseudotuberculosis на всей территории России и стран СНГ [3,5]. Псевдотуберкулез занимает значительное место в инфекционной патологии человека, проявляясь в виде эпидемических вспышек и спорадических заболеваний [3]. В ветеринарной практике распространение иерсиниозных инфекций (в частности, иерсиниоза и псевдотуберкулеза) подтверждают исследования, проведенные в Саратовской, Ульяновской и других областях [2]. Для псевдотуберкулеза характерна зимне весенняя сезонность заболеваемости, выявлена связь с синантропными грызунами, доказана возможность распространения инфекции через пищевые продукты и сравнительно высокая восприимчивость людей к данной инфекции [1,4]. Общность морфологических, культуральных и биохимических признаков иерсиний, а также сходство с другими представителями кишечных бактерий затрудняет дифференциальную диагностику этих микроорганизмов.

Бактериологический метод часто применяют для диагностики псевдотуберкулеза и иерсиниоза, однако, эффективность такого метода бывает ограничена сроками исследования материала от начала заболевания. Одним из важных этапов бактериологического метода индикации возбудителя является изучение ферментативных свойств данного микроорганизма, который не всегда удобен, так как требует приготовления специальных дифференциально диагностических сред. Преимуществом готовых наборов сред для ускоренной видовой идентификации микроорганизмов является быстрота выполнения исследований, а также достаточно небольшой срок (максимум 24 часа) учета результатов.

В связи с этим целью наших исследований явилось изучение ферментативных свойств бактерий вида Yersinia pseudotuberculosis с помощью тест-систем для ускоренной идентификации микроорганизмов.

Материалы и методы В работе использовали наборы сред для ускоренной идентификации микроорганизмов, выпускаемые НИИЭМ имени Пастера. В качестве исследуемых культур использовали штаммы Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica, полученные из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы.

Подтверждение идентификацию) биохимических свойств (видовую исследуемых штаммов устанавливали с помощью определителя бактерий Берджи.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Для изучения ферментативных свойств исследуемые культуры засевали на 1,5 % МПА газоном. Посевы культивировали при 37 °С в течение 18- часов. Среды для определения ферментативных свойств разливали в лунки полистироловой планшетки по 4 капли. Исследуемую культуру бактериологической петлей вносили в лунку и тщательно перемешивали. При необходимости в соответствии с методикой добавляли стерильное вазелиновое масло. Параллельно ставили контроль – среды в лунках без добавления культуры. Планшетку с посевами культивировали в термостате при 37 °С.

Изменение окраски среды по сравнению с контролем расценивали как положительную реакцию. Результаты учитывали через 1-3, 4-6, 18-24 часов.

Результаты исследований и обсуждение Результаты проведенной работы представлены в таблице 1.

Выводы Изучены биохимические свойства 6 штаммов Y. pseudotuberculosis и штамма Y. enterocolitica. Установлено, что метод ускоренной идентификации микроорганизмов является простым, нетрудоемким, достаточно чувствительным, удобным в использовании.

Таблица Биохимические свойства бактерий видов Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica Y. pseudotuberculosis Y. entero Тесты colitica РЯЗ №19 ВИЭВ 09 ВИЭВ 01№7 0630 III ВИЭВ ЛЕНЧ III Лактоза - - - - - - Маннит + + + + + + + Сахароза - - - - - - + Манноза + + + + + + + Арабиноза + - + - - + + Глюкоза + + + + + + + Сорбит - - - - - - + Сероводород - - - - - - Лизиндекарбо - - - - - - ксилаза Орнитиндекарбо - - - - - - + ксилаза Уреаза + + + + + + + Эскулин + + + + + + + Литература Антонюк В.Я., Чеснокова М.В., Климов В.Т. и др. Результаты 1.

эпизоотологического наблюдения в антропургическом очаег псевдотуберкулеза. – Инфекции, обусловленные иерсиниями // Материалы II Всероссийской научно практической конференции с международным участием. – СПб. НИИЭМ им.

Пастера, 2006.-153 с.

Зыкин Л.Ф., Щербаков А.А., Хапцев З.Ю. Иерсиниоз и псевдотуберкулез 2.

сельскохозяйственых животных. – Саратов, 2002, 67 с.

Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседнова Н.Н. Псевдотуберкулез. – М.:

3.

Медицина, 1990, 237 с.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Иерсинии и иерсиниозы. Под ред. проф. Ценевой Г.Я.. – Санкт-Петербург, 4.

2006, 168 с.

Ющук Н.Д., Ценева Г.Я., Кареткина Г.Н., Бродов Л.Е. Иерсиниозы. – М.:

5.

Медицина, 2003, 208 с.: ил. – ISBN 5-225-04652- Идентификация бактерий вида Ornithobacterium rhinotracheale по биологическим свойствам Певчева Т.О., Фадеева Е.И., Иванова А.С. – студентки 2 курса ФВМ Руководители: Разорвина А.С., Васильев Д.А.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Возбудитель орнитобактериоза посредством генетического метода на данный момент классифицируют и определяют как Ornithobacterium rhinotracheale (ORT), относящемуся к rRNA суперсемейству V [2].

Ornithobacterium rhinotracheale характеризуют как патогенный микроорганизм, способный вызывать самостоятельное заболевание с поражением респираторного тракта, а также ослабляя иммунную систему, предполагает проникновение вторичной микрофлоры в организм птицы в возрасте старше 10 недель, приводящей к ее гибели [1,3].

Присутствие Ornithobacterium rhinotracheale в промышленной и дикой птице показывает, что во всем мире есть потенциальный резервуар возбудителя [4].

Цель работы изучить основные биологические свойства штаммов бактерий вида Ornithobacterium rhinotracheale, по которым происходит идентификация возбудителя.

Материалы и методы Для решения поставленной цели проводились исследования со штаммами бактерий вида Ornithobacterium rhinotracheale K282 и К33, полученных из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Ульяновской ГСХА по общепринятым методикам.

Был проведен сравнительный анализ ростовых характеристик орнитобактерий на средах, используемых для оптимального культивирования изучаемых референс-штаммов: кровяной агар, содержащий 5-10% дефибринированной овечьей крови, PPLO агар, триптозо-соевый агар, бульон Хоттингера, сердечно-мозговой экстракт.

Для установления видовой принадлежности использовали тесты, которые наиболее полно характеризуют ферментативные свойства бактерий вида Ornithobacterium rhinotracheale.

Результаты исследований На кровяном агаре через 48 часов инкубации при 37°С Ornithobacterium rhinotracheale появлялись небольшие серые или серо-белые колонии, непрозрачные, с красноватым оттенком, зона гемолиза отсутствует. На PPLO агаре формируются мелкие, 0,5-1 мм колонии, молочного цвета, округлой формы, гладкие, блестящие, непрозрачные. Колонии бактерий Ornithobacterium rhinotracheale имеют специфический запах, схожий с запахом Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии масляной кислоты. Бактерии грамотрицательные, полиморфные палочки, не растут на агаре МакКонки, Дригальского, Эндо.

При изучении ферментативных свойств получены следующие данные:

каталаза отрицательные, интенсивное синие окрашивание дисков для исследования на оксидазу говорит о положительной реакции на цитохромоксидазу, индол и сероводород не образуют, на среде Симмонса цитрат не утилизируют, желатин не разжижают.

При ферментации углеводов производят слабое сбраживание с образованием газа лактозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, маннозу. Не сбраживают ксилозу, сорбит, маннит, арабинозу, дульцит.

Выводы В результате проведенных исследований были изучены основные биологические свойства и подтверждена принадлежность штаммов бактерий к виду Ornithobacterium rhinotracheale.

Литература 1. Back, A., G. Rajashekara, R. Jeremiah, D, Halvorson and K. Nagaraja, 1998b. Tissue distribution of Ornithobacterium rhinotracheale in experimentally infected turkeys. The Vet. Rec., 143: 52-53.

2. Hafez, H. M., 1998. Current status on the Laboratory diagnosis of Ornithobacterium rhinotracheale "ORT" in poultry. Berliner und Mnchener Tierrztliche Wochenschrift, 111:143-145.

3. Vandamme, P., P. Segers, M. Vancanneyt, K. Van Hover, R. Mutters, J. Hommez, F.

Bisgaard, K. –H. Hinz, W. Mannheim (1994): Description of Ornithobacterium rhinotracheale gen.nov.sp.nov. isolated from the avian respiratory tract. Int. J. of Sys.

Bacteriol. 44, 24-37.

4. Van Empel, P., H. van den Bosch, P. Loeffen and P. Storm, 1997. Identification and serotyping of Ornithobacterium rhinotracheale. J. Clin. Microbiol., 35:418-421.

Изучение вопросов распространения и диагностики бордетеллёза Тарасова Л.*, Зайнудинова Л.*, Губкина Н.**, Букина Е.** – студентки 3* курса специальность «Микробиология», 4** курса ФВМ Руководители: Васильева Ю.Б., Семанина Е.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Кошачий бордетеллез является болезнью, открытой относительно недавно, в девяностых годах XX-го века. Однако его распространение и роль в заболеваемости и смертности котят, а иногда и взрослых кошек заставляет тщательно изучать эту болезнь с целью ее предупреждения и своевременного лечения.

Бордетеллёз - высококонтагиозное, инфекционное заболевание, характеризующееся общим недомоганием, развитием острого воспалительного процесса слизистой оболочки респираторного тракта, сухим, болезненным кашлем, рвотой, прогрессирующим исхуданием и массовой гибелью животных. В настоящее время установлено, что B.bronchiseptica не только вызывает самостоятельное заболевание домашних животных, но и передается от них человеку, вызывая патологию дыхательных путей.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Следует отметить, что в нашей стране указанная болезнь мало изучена и часто диагностируется как патология невыясненной этиологии. Поэтому особого внимания заслуживает вопрос дальнейшего более полного изучения механизма заражения, передачи данного агента со своевременным, быстрым и точным его выделением и идентификацией Первый случай острой респираторной болезни, связанной с бордетеллезной инфекцией, произошел в Великобритании в колониях уличных кошек (H. Elliott, 1991).

Затем бордетелла была выделена у породистых кошек во время вспышки острых респираторных болезней в 1998 году. Клинические обследования породистых кошек в Великобритании и США показали, что инфекция, вызванная бордетеллой, широко распространена. При лабораторном исследовании домашних кошек бордетелла была выделена в 4,9% случаев в Великобритании и 6,1% - в США (H.C. McArdle et al., 1994;

J.D. Hoskins et al., 1998). Серологические исследования показали, что 72% исследуемых животынх в Великобритании и 24,1% в США имели антитела к B.

Bronchiseptica (H.C. McArdle et al., 1994;

A.J Speakman, 1997). При исследовании кошек в Великобритании авторами установлено бордетеллоносительство у 3-11% исследованных животных (H.C. McArdle et al., 1994;

A.J Speakman, 1997, S. H. Binns et al., 1999).

Особенно часто это заболевание наблюдается при скученном содержании кошек. В условиях питомника бордетеллёз зачастую осложняется пастереллёзной, аденовирусной, гриппозной и другими инфекциями, протекая по типу ассоциированной болезни. Котята 10-ти недельного возраста более восприимчивы к бордетеллёзу (S. E. Turnguist, Ostung, 1997).

Передача инфекции от больных животных происходит контактным или аэрогенным путями, а также возможна через инфицированные корма, воду, а также грызунов.

Клинические признаки появляются после инкубационного периода.

Начальный признак поражения: депрессия, чихание, анорексия, пирексия и серозные истечения из глаз и носа. Истечения позже становятся гнойными из за вторичной инфекции.

Особого внимания заслуживает вопрос разработки своевременных, быстрых и точных методов выделения и идентификации Bordetella bronchiseptica.

Мы предлагаем для постановки диагноза на бордетеллёз кошек использовать следующую схему. Берём глубокие мазки из глотки на селективную среду: бордетелл-агар с 0,004% цефазолином, выделяем чистые культуры, проводим микроскопию с окраской по Граму, оценку роста на обычных и селективных, жидких и плотных средах, определяем биохимические свойства (ферментация сахаров, тесты с оксидазой, уреазой и индолом), оцениваем подвижность для видового типирования бордетелл. Для серодиагностики мы рекомендуем проводить сывороточно-капельную реакцию агглютинации (СКРА) и пробирочную реакцию агглютинации (РА).

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Применение данной схемы лабораторной диагностики возможно при исследовании распространения бордетеллёза кошек на территории г.Ульяновска, проведении анализа эпизоотической ситуации в регионе.

Тест-система позволяет в достаточно короткие сроки поставить точный диагноз, следовательно, назначить своевременное эффективное лечение на основании антимикробной чувствительности выделенных от животных изолятов Bordetella bronchiseptica.

Литература 1. Binns, S. H., Dawson, S., Speakman, A. J., Cuevas, L., Hart, С A., Bennett, M., Morgan, K. L. & Gaskell, R. M. Feline bordetellosis: prevalence and risk factors for infection. // Veterinary Record. – 1999. - №17. – Р. 458-461.

2. Elliott H. Bordetella bronchiseptica in a closed cat colony. // Vet Rec. - 1991. - №129. – Р.

474.

3. Hoskins J.D., Williams J., Roy A.F. et al: Isolation and characterization of Bordetella bronchiseptica from cats in southern Louisiana. // Vet Immunol Immunopathol. - 1998. №65. – Р. 173.

4. McArdle H.C, Dawson S., Coutts A.J., Bennen M., Hart С.A., Ryvar, R., Gaskell R.M.

Seroprevalence and isolation rate of Bordetella bronchiseptica in cats in the UK. // Veterinary Record. – 1994. - №135. – Р. 506-507.

5. Speakman AJ, Binns SH, Dawson S, et al: Antimicrobial susceptibility of Bordetella bronchiseptica isolates from cats and a comparison of the agar dilution and E-test methods.

// Vet Microbiol. - 1997. -№54. – Р. 63.

6. Turnquist S.E., Ostlund E. Calicivirus outbreak with high mortality in a Missouri feline colony. // Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. – 1997. - № 9. – Р. 195-198.

Методы выделения бактерий рода Citrobacter из воды открытых водоёмов Пульчеровская Е.О.*, Керчев В.** – студентка 2* курса ФВМ, ученик 8** класса Руководители: Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

81 школа им. Генерала Карбышева, Ульяновск Вода крайне необходима для нормального функционирования организма человека, животных и растений, поскольку составляет основу их внутренней среды. Она также является и источником распространения возбудителей заболеваний человека, животных и рыб.

Так, например, в зоне Северного Кавказа и других регионах циркулирует ряд инфекционных болезней рыб, в том числе и цитробактериоз, что тормозит производство и снижает товарные и санитарные качества рыбных продуктов.

Пораженная C.freundii рыба опасна для употребления в пищу людям, а рыбные продукты способны вызывать у человека пищевые токсикоинфекции, воспаление моче- и желчевыводящих путей, отиты, остеомиелиты и менингиты (В.П. Рагинская, 1973).

Nimbargi Pradhakar M., Hiremath Annapurna B., et al в (1985 ) в Индии провели исследование поверхности тела и внутренней полости рыб, живущих в загрязненных хозяйственно-бытовыми стоками водоемах, с использованием общепринятых методических приёмов. Потенциально-патогенные для Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии человека бактерии выделялись с поверхности тела, из жабр и пищеварительного тракта рыб. Всего на различных частях тела рыб было обнаружено 12 видов микроорганизмов, среди которых были бактерии рода Citrobacter.

Karunasagar I., et al (1992) сообщают о гибели породных групп карпа вследствие соматической инфекции, вызванной Citrobacter freundii. Авторы отмечают геморрагические пятна на коже, глазах, в основании плавников. Из образцов крови, почек, печени, селезенки были выделены и идентифицированы C. freundii. Результаты изучения вирулентности показали, LD50 находились в пределах 105-106 для мышей и рыб.

Dos Fernandes Viera Regine Helena, et.al. (1996) провели бактериологический анализ проб морской воды с побережья Fortaleza, взятых с 3 мая по 22 октября 1995 г. В результате проведенных исследований были выделены микроорганизмы принадлежащие к семейству Enterobacteriaceae среди которых также были бактерии рода Citrobacter.

Из приведенных данных следует, что данный микроорганизм попадает в воду открытых водоёмов в результате хозяйственной деятельности человека, со сточными водами, а также с фекалиями больных и здоровых людей и животных.

Из выше сказанного можно сделать вывод, что бактерии рода Citrobacter можно обнаружить в речной воде и объектом своих исследований мы выбрали реку Волга.

Для этого мы отобрали пробы воды и исследования проводили по общепринятой методике.

Основой идентификации бактерий рода Citrobacter является изучение ферментативных свойств.

Род Citrobacter объединяет группу ферментативно родственных бактерий, названных так благодаря их способности утилизировать цитрат (citrus- лимон, bacter- мелкие палочки) и использовать его в качестве единственного источника углерода. Название было предложено C. Wercam, G.

Gjillen (1932), а также U.E. Mankuburen (1948).

Современная классификация рода включает следующие виды:

Citrobacter freunfii, C. coseri, C. amalonaticus, C. farmeri, C. youngae, C. braakii, C. rodentum, C. wermanii и два до сих пор безымянных вида. Для них предложены названия C. gillenii и C. murliniae.

Согласно литературным данным, факторы патогенности у данного рода изучены не достаточно, т.к. до настоящего времени не разработаны экспериментальные модели патогенеза инфекции. Возможно, основные факторы патогенности цитробактеров – микроворсинки, жгутики, энтеротоксин и поверхностный белок адгезии, которые отсутствуют у авирулентных штаммов.

Бактерии рода Citrobacter образуют мелкие, прямые, подвижные палочки. Факультативные анаэробы. Температурный оптимум – 370 С, оптимальная рН - 7,2. Спор и капсул не образуют. В мазках располагаются одиночно и парами. По Граму окрашиваются – грамотрицательно.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Цитробактеры хорошо растут на простых питательных средах, утилизируют цитрат как единственный источник углерода. На среде Эндо лактозоположительные варианты цитробактера образуют колонии, окрашенные в розовый или красный цвет, но лишенные типичного для кишечной палочки металлического блеска;

у лактозоотрицательных вариантов колонии бесцветные или сероватые с розовым оттенком, более тёмным в центре. На среде Плоскирёва лактозоотрицательные штаммы Citrobacter образуют слегка опалесцирующие выпуклые колонии, окрашенные в тон среды (слегка розовые);

лактозоположительные колонии имеют более интенсивную окраску с темным центром. На висмут-сульфит агаре через часов инкубации цитробактеры дают обильный рост, образуя светло-зеленые, коричневые или черные колонии без окрашивания участка среды под колонией. Рост их на этой среде более обильный, чем сальмонелл и отличается неприятным запахом. Основой идентификации Citrobacter являются их ферментативные свойства. Они утилизируют цитрат в среде Симмонса, образуют газ в глюкозе, ферментируют лактозу в разные сроки (встречаются лактозоотрицательные штаммы), а также ферментируют маннит, рамнозу, сорбит, арабинозу, ксилозу, мальтозу, не ферментируют инозит. Не обладают лизиндекарбоксилазой, фенилаланиндезаминазой и желатиназой. Большинство штаммов образуют сероводород и не образуют индол. Они вариабельны в отношении сахарозы, салицина, дульцита, раффинозы и адонита.

Положительны в реакции с метиловым красным и отрицательны в реакции Фогеса-Проскауэра. Вариабельность некоторых ферментативных признаков Citrobacter положена в основу их разделения на виды (таблица 1).

Таблица Отличительные признаки бактерий группы C.freundii (Покровский, Поздеев и др., 1999 г.) Тест C.freundii C.youngae C.braakii C.werkmanii C.sedlakii Образование индола - - - - + Утилизация цитрата + + + + + Разложение мочевины + + + + + Орнитин декабоксилаза - - + - + ± Утилизация малоната - - + + Образование кислоты из:

± ± - сахарозы + - ± ± - дульцита + - + - мелибиозы + - + - + В результате проведенных исследований нами был выделен один штамм бактерий названного рода (Citrobacter freundii).

Существуют еще методы идентификации и идентификации бактерий рода Citrobacter, которые позволяют определить родовую и видовую принадлежность выделенной культуры микроорганизмов без изучения ферментативных свойств в течение 48 часов вместо 5-7 суток, что позволяет значительно сократить сроки и затраты на диагностические исследования.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Одним из таких методов является фагодиагностика (М.Адамс;

Д.М.Гольдфарб (1961);

В.Я.Ганюшкин (1988);

Т.И.Кольпикова, Бакулов И.А. и др. (1990, 1992).Методы фагодиагностики являются специфичными, не требуют больших затрат времени, материалов и общедоступны лабораториям всех уровней.

РНФ с применением набора фагов по технике выполнения является простым, чувствительным и специфическим методом диагностики, позволяющим за относительно короткий срок (11-12 час.) обнаружить искомые бактерии в концентрации 102-104 микробных клеток в 1 г (мл) исследуемого материала в присутствии посторонней микрофлоры, без выделения чистой культуры микроорганизма. Бактериологическим методом такую концентрацию микроорганизмов обнаружить, как правило, не удаётся.

Таким образом, мы считаем, что индикация бактерий рода Citrobacter в воде открытых водоемов необходима при определении загрязнения их хозяйственно-бытовыми стоками любыми доступными методами и имеет большое практическое значение.

Литература:

1. Адамс М. Бактериофаги. – Москва, 1961. – с. 15-44.

2. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии.

Учебное пособие. – Ульяновск, 1988. – с. 45-49.

3. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований.

М.: Медицина, 1978. – 394 с.

4. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т.: Пер. 9-го амер.изд.Т.2 Беркли Р., Бок Э., Бун Д. И др.;

Под ред Хоуолта Дж. И др. – М.: Мир, 1997. – 800 с.

Выделение и идентификация стафилококков из сточных вод животноводческого комплекса «Октябрьский»

Галкина Е.В., Ефремова Л.Г. – студентки 2 курса ФВМ Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Стафилококки (Slaphylococcus) — грамположительные сферические клетки, обычно располагающиеся в виде скоплений, неподвижны, не образуют спор, легко окрашиваются всеми анилиновыми красителями. Как патогенные микроорганизмы они были идентифицированы одними из первых. В 1881 г.

Земмер впервые описал стафилококковое заболевание у кроликов. Затем эту болезнь под разными названиями, в зависимости от локализации и характера поражений, описывали многие авторы [1, 4].

По классификации Берги, стафилококк относится к 14-й группе рода микрококков (Micrococcaceae). Большинство стафилококков совершенно безвредны: из упомянутых 14 видов, только 3 способны вызывать заболевания:

золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis) и сапрофитный стафилококк (Staphylococcus saprophyticus) [3].

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Стафилококки – чрезвычайно распространенные представители микрофлоры кожи и слизистых у многих видов млекопитающих, в том числе и у человека. Они вызывают множество заболеваний, в том числе поверхностные и глубокие гнойные инфекции, интоксикации, инфекции мочевых путей. Среди возбудителей больничных инфекций они занимают второе по частоте место [2].

Нужно отметить, что в возникновении стафилококковой инфекции главную роль играет снижение функции иммунной системы. В нормальном, здоровом организме иммунитет настроен таким образом, что проникновение и размножение таких микробов как стафилококк практически исключается или становится возможным только при нарушении целостности тканевых барьеров.

Для постановки диагноза выделенный штамм стафилококка должен обладать коагулазопозитивными свойствами (т.е. коагулировать плазму крови при культивировании) или гемолитическими свойствами (т.е. образовывать зону гемолиза при культивировании на кровяном агаре). При отсутствии таковых свойств у выделенного микроорганизма диагноз на стафилококкоз следует признать сомнительным [4].

Материалы и методы Лабораторные опыты проводились с двумя пробами сточных вод, взятых с территориальных участков животноводческого комплекса «Октябрьский», которые в дальнейшем по плотности масс определили как жидкая и густая пробы.

Для идентификации стафилококков использовали следующие питательные среды: для выделения стафилококков – мясопептонный бульон (МПБ), кровяной агар;

для идентификации кокков – агар с добавлением 6,5% NaCl, агар с добавлением 10% NaCl, агар с добавлением 4% дегидратированной желчи КРС. Все среды готовились в лабораторных условиях и подвергались стерилизации.

Результаты исследований Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 24 часов.

Выросшие колонии делили пополам и из одной половины готовили препараты, окрашивали по Граму и микроскопировали. Микроскопирование колоний на этапах, где колонии прорастали, доказывало во всех случаях присутствие стафилококков. Характеристика роста на различных питательных средах отражена в таблице 1.

Для проведения реакции на фермент каталазу (для дифференциации от стрептококков и энтерококков) брали чашку Петри с колониями, проросшими на агаре добавлением 6,5% NaCl. На любую колонию, предположительно стафилококков, наносили каплю 3% перекиси водорода. Подтверждением стафилококков являлось вспенивание поверхности колонии.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица Характеристика роста исследуемых проб на различных питательных средах № ПИТАТЕЛЬНАЯ РОСТ ФОРМА КОЛОНИЙ ЦВЕТ КОЛОНИЙ ГЕМОЛИЗ П/П СРЕДА диффузное помутнение с последующим МПБ + (нет) (нет) выпадением рыхлого осадка круглые, слегка возвышающиеся над агар с поверхностью агара добавлением белый + (нет) колонии с ровными 6,5% NaCl краями, диаметром 2 – 3 мм (ЖИДКАЯ) 1 проба круглые, слегка агар с возвышающиеся над белый, иногда + добавлением поверхностью агара кремовый, (нет) колонии, диаметром светло-желтый 10% NaCl 3 мм агар с добавлением 4% (нет) (нет) (нет) дегидратирован ной желчи КРС круглые колонии с значитель четко выраженными кровяной агар желтый ная зона + краями, диаметром гемолиза 0,5-1 мм диффузное помутнение с последующим МПБ + (нет) (нет) выпадением рыхлого осадка круглые, слегка возвышающиеся над агар с поверхностью агара добавлением белый + (нет) колонии с ровными 6,5% NaCl краями диаметром 2-3 мм (ГУСТАЯ) 2 проба круглые, слегка агар с возвышающиеся над белый, иногда добавлением поверхностью агара кремовый, + (нет) колонии, диаметром светло-желтый 10% NaCl 3 мм агар с добавлением 4% (нет) (нет) (нет) дегидратирован ной желчи КРС круглые колонии с значитель четко выраженными кровяной агар желтый ная зона + краями, диаметром гемолиза 0,5-1 мм Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Дальнейшую идентификацию проводили с помощью молока с метиленовой синью, в случае свертывания и пептонизации молока после суток с момента посева в него культуры, можно было утверждать о наличии стафилококков.

В результате опыта обе культуры дали положительную реакцию, следовательно, в обоих случаях в пробах находились стафилококки.

Результаты исследований биохимических свойств (цветной ряд Гиса на сахара) отражены в таблице 2. Наблюдение за цветным рядом велось в течение 14 дней.

Таблица Изучение биохимических свойств выделенных стафилококков 1 проба 2 проба Сахара (ЖИДКАЯ) (ГУСТАЯ) маннит +/- + мальтоза + глюкоза + + сахароза - + липаза + +/ После этого исследования стало возможным предположение о том, что в пробе №1 находится St.intermedis, а в пробе №2 - St.aureus.

Выводы В результате проведенных исследований, из двух проб было выделено два штамма стафилококков. Дополнительные ферментативные тесты показали, что выделенные культуры относятся к видам St.intermedis и St.aureus.

Литература Демина М.Ф. и др. Болезни кроликов. – М., 1959.

1.

Кузнецова Е.А. Микробная флора полости рта и ее роль в развитии патологических 2.

процессов. – М., 1996.

Диагностика и лечение основных инфекционных заболеваний в современных 3.

условиях. – Минск, 1990.

Авакян А.А., Кац Л.Н., Павлова И.Б. Атлас анатомии бактерий патогенных для 4.

человека и животных. – М., 1972.

Выделение и идентификация бактерий вида Streptococcus agalactiae Сульдина Е.В., Чернова Т.Л. – студентки 2 курса ФВМ Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Streptococcus agalactiae, род Streptococcus, этиологический агент маститов крупного рогатого скота. Мастит – это воспаление молочной железы, которое является сложной реакцией организма, возникающей в ответ на действие болезнетворных факторов, характеризуется патологическими изменениями как в тканях, так и в секрете молочной железы [2].

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Мастит снижает продуктивность крупного рогатого скота и влияет на качество молока. Воспаление вымени, вызванное агалактийным стрептококком очень заразно и легко передается от одной коровы к другой.

На долю мастита стрептококковой этиологии в различных регионах страны приходится 30 – 48 % от числа коров, больных маститом бактериологического происхождения [2].

Основным возбудителем мастита (28 – 85 % случаев) оказывается именно Streptococcus agalactiae, отнесенный к серологической группе В, который по сравнению с другими стрептококками значительно лучше приспособился к условиям существования в молочной железе коров, где он хорошо размножается [3].

Цель нашей работы выделение и идентификация Streptococcus agalactiae из проб молока от больных маститом коров животноводческого комплекса «Октябрьский».

Материалы и методы Для исследования мы взяли 16 проб молока от коров больных маститом и с подозрением на данное заболевание. Для идентификации микроорганизма мы использовали следующие среды: кровяной агар, мясопептонный бульон, агар с добавлением 6,5 % NaCL, агар с добавлением 4 % дегидратированной желчи крупного рогатого скота и дифференциально-диагностические среды Гисса. Исследования проводились по общепринятым методам [1, 4, 5].

Результаты исследований Для выделения культуры возбудителя, исследуемый материал мы высевали на мясопептонный агар с добавлением 10 % стерильной дефибринированной крови барана, так как на обычных средах Streptococcus agalactiae растет слабо. По истечении срока инкубации в термостате при оптимальной температуре для данного микроорганизма – 37-38°С, мы обнаружили рост на 15 из них, проба «14+» роста не дала. На кровяном агаре Streptococcus agalactiae растет в виде мелких (точечных) блестящих сероватых колоний, окруженных зоной гемолиза типа –. Подходящие под описание колонии мы пересевали в мясопептонный бульон и культивировали в течение суток. Затем чтобы исключить стафилококковую и энтерококковую инфекции, культуру с мясопептонного бульона засевали на агар, содержащий 6,5 % NaCl и агар с добавлением 4 % дегидратированной желчи крупного рогатого скота.

Три из пятнадцати исследуемых культур роста на указанных средах не дали. С этих трех заинтересовавших нас культур мы сделали мазки и окрасили их по Граму. При микроскопии мы обнаружили короткие цепочки из мелких чуть сплющенных или овальных клеток, окрашенных в сине-фиолетовый цвет.

Удостоверившись, что выделенные культуры относятся к роду Streptococcus, мы провели ряд тестов по изучению ферментативных свойств. Для обнаружения сахаролитических ферментов исследуемые культуры бактерий засевали на малый «пестрый» ряд Гисса (глюкоза, лактоза, манит, мальтоза, сахароза). После культивирования в термостате при оптимальных условиях установили, что исследуемые культуры разлагают глюкозу, сахарозу, мальтозу, лактозу и не расщепляют манит. Параллельно изучали Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии редуцирующую способность культур, использовав молоко с добавлением метиленового синего тест на каталазу. Редуцирующей способности выявлено не было;

бактерии каталазоотрицательные.

Выводы Таким образом, в результате проведенных исследований удалось выделить и идентифицировать из проб молока от коров больных маститом штамма бактерий вида Streptococcus agalactiae.

Литература Рекомендации по индикации и итенсификации стафилококков и стрептококков. – 1.

Новочеркасск, 1976.

Карташева В.М., Ивашура А.И. Маститы коров. – М.: Агропромиздат, 1988.

2.

Ивашура А.И. Маститы коров. – М.: Колос, 1972.

3.

Васильев Д.А., Золотухин С.Н., Никишина Н.М. Методы общей бактериологии. – 4.

Ульяновск, 1998.

Исследование санитарного состояния воздуха в помещениях биотехнологического факультета Головачева М.А., Уба С.Г., Шуть А.К. – студенты 2 курса БФ Руководитель: Викторов Д.А.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Состояние здоровья человека зависит от многочисленных факторов окружающей среды. Важным объектом среды обитания, способным оказать существенное влияние на здоровье является воздушная среда. Определенное значение при проведении микробиологического анализа воздуха имеют такие загрязнители, как биологические аэрозоли (бактерии и грибы).

Микробиология воздуха помещений жилых и общественных зданий во много раз превышает обсемененность наружного воздуха, что объясняет способность микроорганизмов вступать с организмом человека в самые разные взаимоотношения – от симбиоза до паразитизма.

Болезнетворные микробы попадают в воздух из почвы и с выделениями больных людей и животных. В воздухе могут находиться определенное время возбудители вирусных инфекций, а также туберкулеза, сибирской язвы, столбняка и др. Аэрогенным путем передаются болезни вирусной этиологии.

Распространяясь очень быстро, они поражают большое количество людей и животных.

Люди и животные, пораженные инфекцией дыхательных путей, при чихании, кашле выделяют в воздух множество капелек жидкости, в которых содержатся патогенные микробы. Мельчайшие из этих капель часами могут удерживаться в воздухе во взвешенном состоянии и переноситься с потоком воздуха на большие расстояния. Впервые открыл возможность передачи инфекций через воздух с помощью "мелких брызг" русский ученый П. Н.

Лащенков.

Микроорганизмы можно обнаружить в каплях и бактериальной пыли.

Возбудители катаров верхних дыхательных путей, гриппа и др. находятся во Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии взвешенном состоянии в каплях бактериального аэрозоля. Возбудитель туберкулеза, стафилококки, споры возбудителя сибирской язвы, хорошо переносящие высыхание, длительное время сохраняются в бактериальной пыли. Выживаемость патогенных микроорганизмов, находящихся в каплях, пыли, зависит от биологических свойств возбудителя, а также температуры и влажности воздуха.

Провести исследование воздуха в помещениях Цель:

биотехнологического факультета УГСХА седиментационным методом.

Задачи:

Определить количество микроорганизмов, находящихся в 1 м 1.

воздуха в помещении 21 аудитории биотехнологического факультета УГСХА;

Определить количество микроорганизмов, находящихся в 1 м 2.

воздуха в вестибюле;

Определить количество микроорганизмов, находящихся в 1 м 3.

воздуха в коридоре вблизи буфета;

Провести первичную идентификацию выделенных культур – 4.

описание колоний микроорганизмов и окраска мазков по Граму.

Материалы и методы:

1. Микробиологическое исследование воздуха проводили в соответствии с методическими указаниями по седиментационному методу, описанному в следующей литературе: “Микробиологические методы исследования” под редакцией Лабинской, второе издание, 1978 г.

2. Данные исследования включают следующие этапы работы: подготовка лабораторной посуды и питательных сред, взятие проб воздуха для исследования, учёт роста на чашках Петри с питательными средами, микроскопическое исследование выявленных микроорганизмов, первичная идентификация выделенных культур.

3. Бактериальные питательные и селективные среды.

Отечественные питательные среды:

а) по ГОСТу 10444 селективная питательная среда для выделения сибиреязвенного микроба производства НИИ вакцины и сывороток г.

Ставрополя с добавлением полимиксина М - 0,025 г. и триметаприма - 0,025 г.

б) МПА Импортные питательные среды:

“Среда Плоскирёва” фирмы “Difco”.

“Агар Сабуро” фирмы “Difco”.

Ход исследования: 3 набора чашек Петри с питательными средами оставляли открытыми на 15 минут в помещениях, в которых необходимо определить чистоту воздуха: помещение 21 аудитории биотехнологичекого факультета, вестибюль, коридор вблизи буфета. Затем помеченные чашки Петри переворачивали крышкой вниз и помещали в термостат при 37C. Учёт результатов проводили 2 раза: спустя 24 часа и 48 часов культивирования.

Чашки Петри с агаром Сабуро культивировали в условиях комнатной температуры (20-23C) в течение 7 суток.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Учёт результатов количественных показателей микробного состава исследуемого воздуха. Анализ полученных результатов через сутки выявил отсутствие интенсивного роста колоний микроорганизмов. В связи с этим возникла необходимость довести продолжительность опыта до 48 часов.

Через двое суток культивирования в термостате был выявлен интенсивный рост микроорганизмов. При подсчёте колоний были получены следующие результаты, приведённые в таблице 1.

Таблица Подсчёт колоний микроорганизмов через 48 часов культивирования на мясо пептонном агаре и на среде Плоскирева Образцы воздуха Количество колоний микроорганизмов МПА Среда Плоскирева 1. Вестибюль 6 2. 21 аудитория 3 3. Коридор вблизи буфета 13 Согласно методике седиментационного метода на площади 100 см2 в течении 5 минут оседает примерно столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 литрах воздуха. Исходя из этого, был проведён подсчёт микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 исследуемого воздуха.

Площадь чашки Петри:

Sчашки =r2 = 3,14*52 = 78,5 см На 100 см2 за 15 минут оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 30 л воздуха, На 78,5 см2 – x литров x = 30*78,5/100 = 23,55 литров.

То есть, в 23,55 литрах исследуемого воздуха содержалось столько микроорганизмов, сколько колоний выросло на чашке Петри при условии, что они находились открытыми в исследуемом помещении в течение 15 минут.

Согласно этому утверждению, проводился расчёт количества микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 (1000 литрах) исследуемого воздуха:

В 1 м3 воздуха в вестибюле содержалось: 6*1000/23,55 = микроорганизма в 1 м3 воздуха. В 1 м3 воздуха 21 аудитории содержалось:

3*1000/23,55 = 127 микроорганизма в 1 м3 воздуха. В 1 м3 воздуха в коридоре вблизи буфета содержалось: 13*1000/23,55 = 552 микроорганизма в 1 м воздуха. Полученные данные представлены в таблице 2.

Таблица Количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 воздуха в исследуемых помещениях Образцы воздуха Количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 воздуха 1. Вестибюль 2. 21 аудитория 3. Коридор вблизи буфета Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Первичная идентификация выделенных культур микроорганизмов Для первичной идентификации выделенных культур микроорганизмов было проведено описание их колоний на плотных питательных средах (МПА) и окраска мазков по Граму.

На чашке Петри с мясо-пептонным агаром, используемой для оценки образца воздуха в вестибюле был выявлен рост 2 типов колоний:

1. Колонии белого цвета, поверхность матовая, края неровные, размер 4- мм. При окраске данных микроорганизмов по Граму и микроскопии мазков обнаруживались грам-положительные бациллы.

2. Колонии шаровидной формы, белого цвета, полупрозрачные, край ровный. Размер 2 мм. Окраска мазков по Граму выявила грам-положительных стафилококков.

Из воздуха 21 аудитории были выделены микроорганизмы, дающие колонии белого цвета, круглой формы с ровным краем, размер 1 мм. При их микроскопии были выявлены грам-положительные диплококки.

В образце воздуха коридора вблизи буфета были выявлены микроорганизмы, дающие рост 3 типов колоний:

1. Форма круглая, выпуклая, цвет желтоватый, форма края ровная, размер колоний 1 мм. Приготовление мазка данного типа колоний, его окраска по Граму и дальнейшая микроскопия позволила обнаружить грам-положительные кокки в присутствии небольшого количества грам-отрицательных палочек.

2. Колонии круглой формы, молочного цвета, размером 2-3 мм. При микроскопии выявлялись грам-положительные кокки и грам-отрицательные палочки.


3. Колонии круглой формы, молочно-белого цвета, размером 2 мм. При микроскопии обнаруживались грам-положительные кокки.

Учёт результатов на среде Сабуро Анализ роста плесневых и дрожжевых грибов, для типирования которых использовалась среда Сабуро, проводился через неделю культивирования при комнатной температуре (20-23C). При подсчёте всех выросших на данной среде колоний, а так же отдельно колоний плесневых грибов, были получены результаты, приведённые в таблице 3.

Таблица Подсчёт колоний микроорганизмов через 7 суток культивирования на среде Сабуро Образцы воздуха Количество колоний микроорганизмов Всего В том числе колонии плесневых грибов 1. Вестибюль 4 2. 21 аудитория 8 3. Коридор вблизи буфета 4 Расчёт количества микроорганизмов и спор плесневых грибов, содержащихся в 1 м3 исследуемого воздуха проводился по аналогичной методике.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии В 23,55 литрах исследуемого воздуха содержалось столько микроорганизмов, сколько колоний выросло на чашке Петри при условии, что они находились открытыми в исследуемом помещении в течение 15 минут.

Расчёт общего количества микроорганизмов, способных к росту на среде Сабуро:

В 1 м3 воздуха в вестибюле содержалось:

4*1000/23,55 = 169 микроорганизмов способных к росту в 1 м3 воздуха.

В 1 м3 воздуха 21 аудитории содержалось:

8*1000/23,55 = 340 микроорганизмов способных к росту в 1 м3 воздуха В 1 м3 воздуха в коридоре вблизи буфета содержалось:

4*1000/23,55 = 169 микроорганизмов способных к росту в 1 м3 воздуха Расчёт количества спор плесневых грибов:

В 1 м3 воздуха в вестибюле содержалось:

1*1000/23,55 = 42 споры плесневых грибов в 1 м3 воздуха.

В 1 м3 воздуха 21 аудитории содержалось:

6*1000/23,55 = 255 спор плесневых грибов в 1 м3 воздуха В 1 м3 воздуха в коридоре вблизи буфета содержалось:

3*1000/23,55 = 127 спор плесневых грибов в 1 м3 воздуха Полученные данные представлены в таблице 4.

Таблица Количество микроорганизмов, способных к росту на среде Сабуро содержащихся в м3 воздуха в исследуемых помещениях Количество колоние-образующих единиц в 1 м Образцы воздуха Всего В том числе спор плесневых грибов 1. Вестибюль 169 2. 21 аудитория 340 3. Коридор вблизи буфета 169 Выводы: Данными исследованиями установлено, что содержание микробных клеток в воздухе помещений биотехнологического факультета соответствует допустимым нормам и колеблется в пределах от 120 до единиц в 1 м3. С помощью методов первичной идентификации выделенных культур были выявлены грам-положительные кокки и бациллы, а так же незначительное количество грам-отрицательных палочек. Исследование проб воздуха на содержание плесневых и дрожжевых грибов показало, что их общее число находится в пределах 170-340 единиц в 1 м3, из них спор плесневых грибов — 40-250 в 1 м3 воздуха.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Распространенность бактерий вида Enterococcus faecalis в объектах внешней среды Емелина О.В., Карманова М.С. – студентки 2 курса ФВМ Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Энтерококки, входящие в состав нормальной микрофлоры пищеварительного тракта человека, играют важную роль в обеспечении колонизационной резистентности слизистых. В то же время они являются представителями группы условно-патогенных бактерий, способных вызывать аутоинфекцию. Поэтому их обнаружение в объектах ветеринарно-санитарного надзора свидетельствует о биологической контаминации изучаемого объекта.

Среди представителей этого рода нередко встречаются и патогенные варианты, вызывающие различные воспалительные и септические процессы у людей и животных. Литературные данные свидетельствуют о том, что патогенные энтерококки являются опасными и проблемными нозокомиальными патогенами, вызывая до 16% инфекций мочевыводящих путей, до 12% раневых инфекций и до 9% септических процессов у людей [1].

Они также могут быть причиной маститов, эндометритов, раневых инфекций у взрослых животных, а также сепсиса, желудочно-кишечных и респираторных заболеваний у молодняка [2, 3, 4].

Поскольку из патологического материала чаще всего выделяют E.faecalis, то в большинстве случаев приходиться идентифицировать именно эти этот вид.

Целью наших исследований явилось выделение и идентификация E.faecalis из объектов внешней среды.

Материалы и методы Исследовали два образцы сточных вод животноводческого комплекса «Октябрьский». В качестве питательных сред использовали: мясопептонный бульон, солевой бульон, содержащий 6,5 % хлорида натрия, энтерококкагар, мясопептонном агар с концентрацией NaCl 6,5 %, мясопептонный агар с 40 % желчи, агар с теллуритом калия. Для установления видовой принадлежности использовали тесты, которые наиболее полно характеризуют ферментативные свойства бактерий вида E.faecalis.

Результаты исследований Исследуемые пробы сточных вод, которые в количестве 0,5 мл засевали в пробирки с 5 мл бульона, содержащем 6,5 % хлорида натрия. Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 24 часов. Из среды накопления, где были отмечены признаки роста, осуществляли посев на энтерококкагар. В качестве индикатора в энтерококкагаре содержится 2,3,5-трифенилтетразолий хлорид (ТТХ). Его применение основано на дегидрогеназной активности энтерококков: бесцветный водный раствор ТТХ под воздействием вырабатываемых энтерококками дегидрогеназ переходит в трифенилформазан, который окрашивает среду в красный цвет.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии По истечении 24 часов инкубирования посевов на энтерококкагаре наблюдали плоские крупные колонии с ровными краями, белые или бледно окрашенные с небольшим кремовым или розовым оттенком, а также малиновые. Оба типа колоний делили пополам и из одной половины готовили препараты, окрашивали по Граму и микроскопировали. При обнаружении в мазках грамположительных кокков вторую половину колонии пересевали в пробирки с питательным бульоном и инкубировали в аналогичных условиях в течение 18-24 часов.

Для дифференциации от стафилококков ставили тест на каталазу, а от стрептококков – способность расти на мясопептонном агаре с концентрацией NaCl 6,5 % и на мясопептонном агаре с 40 % желчи.

Изучение биохимических свойств бактерий проводили на средах Гиса:

ферментация углеводов (глюкоза, лактоза, арабиноза), многоатомных спиртов (сорбитол, маннитол). Для дифференциации до вида определяли устойчивость изолята к теллуриту калия и способность редуцировать 2,3,5 трифенилтетразолий хлорид.

Выводы В результате проведенных исследований удалось выделить и идентифицировать 2 штамма E.faecalis.

Литература Макушенко А.С. Энтерококки: экологическое и клиническое значение в 1.

современных условиях // Лабораторная диагностика. – 2002. – № 3.

Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Методические 2.

рекомендации. – М., 1996.

Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований.

3.

Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. – М.: Медицина, 2004.

Седов В.И. Лабораторная диагностика энтерококковой инфекции. Методические 4.

рекомендации. – Иваново, 1983.

Изучение возбудителей туберкулеза Петрова Н.Н., Чернова Ю.В. - студентки 2 курса ФВМ Руководители: Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н.

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

По данным ВОЗ, примерно 1/3 всего населения Земли инфицирована Mycobacterium tuberculosis. От туберкулеза ежегодно умирают 3 млн. человек.

Род Mycobacterium (mucos- гриб, bacterium- палочка) включает в себя много видов, как патогенных, так и непатогенных. К патогенным относятся микобактерии, вызывающие заболевание у людей (Myc. tuberculosis), животных (Myc. bovis), птиц (Myc. avium-intracellulare), мышей (Myc. murium) и микобактерии туберкулёза холоднокровных - рыб, змей, лягушек, черепах (Myc. poikilotermum). Сюда же относятся возбудители проказы (Myc. leprae) и паратуберкулёза крупного рогатого скота (Myc. paratuberculosis).

Наряду с истинными возбудителями от животных, человека, с объектов внешней среды изолируют так называемые атипичные, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии неклассифицированные, анонимные микобактерии, отличающиеся по своим свойствам от туберкулёзных и друг от друга.

Раньон делит атипичные микобактерии на четыре группы:

• первая - фотохромогенные микобактерии, приобретающие тёмно оранжевую окраску при выращивании на свету. В полной темноте они не образуют пигмента. Основной представитель- Myc. kansassii;

• вторая - фотохромогенные микобактерии, приобретающие ярко оранжевую окраску и на свету, и в темноте. Основные представители - Myc.

scrofulaceum, Myc. gordonae, Myc. aquae и др.;

• третья - нефотохромогенные микобактерии. Могут быть неокрашенными или иметь желтовато-оранжевые оттенки. Однако пигментация не зависит от экспозиции на свету. Основные представители этой группы Myc. intracellulare, Myc. battey;

• четвертая - быстрорастущие микобактерии. В течении недели при температуре 25 и 370С они образуют колонии. Представители- Myc. phlei, Myc.

smegmatis, Myc. fortuitum.

Микобактерии туберкулеза – кислото-, спирто - и щелочеустойчивые микроорганизмы, неподвижны, спор и капсул не образуют, жгутиков не имеют. Их типичная форма - стройные или слегка изогнутые палочки с закругленными краями. Размеры клеток одной и той же культуры могут значительно варьировать - длина от 1,5 до 4, ширина от 0,2 до 0,5 мкм.

Микобактерии туберкулеза способны размножаться в строго аэробных условиях на соответствующих элективных питательных средах, содержащих в определенных соединениях углерод, азот, водород и кислород. Из минеральных веществ жизненно необходимыми оказались магний, калий, сера и фосфор. Стимулирующее влияние на рост туберкулезных микобактерий оказывают соли железа и некоторые другие элементы. Возбудители туберкулеза, особенно птичьего вида, характеризуется наличием пленки, рыхлой, матовой, крошкоподобной или сплошной, морщинистой и соответствующего цвета.

На плотных средах микобактерии растут в виде колонии, которые могут быть гладкими (S – форма) или шероховатыми (R – форма), крошкоподобными мелкими либо крупными, блестящими или матовыми, в виде единичных обособленных или же сплошными скоплениями, в виде морщинистого налета белого или белого с желтоватым оттенком, или же другого цвета.

Для посева диагностического материала используют разнообразные питательные среды, среди которых можно выделить 3 основные группы:

• плотные питательные среды на яичной основе;

• плотные или полужидкие питательные среды на агаровой основе;

• жидкие синтетические и полусинтетические питательные среды.

Каждая из этих сред имеет положительные и отрицательные особенности. В связи с этим для повышения результативности культурального метода рекомендуется применять посев диагностического материала одновременно на 2-3 питательные среды разного состава.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии В России культуральные исследования диагностического материала традиционно осуществляются на плотных яичных средах. Существует большое количество плотных питательных сред, и разные лаборатории используют различные среды: Левенштейна-Йенсена, Петраньяни, Гельберга, Финна, Мордовского (среда «Новая»), Аникина (А-6 и А-9), Попеску и др.

Заражение туберкулезом происходит воздушно – капельным и воздушно – пылевым путем, иногда через корма, объекты среды обитания, обсемененные микобактериями туберкулеза. При аэрогенном заражении первичный инфекционный очаг развивается в легких, а при алиментарном – в мезентериальных лимфатических узлах.

При туберкулезе иммунитет нестерильный, длящийся до тех пор, пока в организме находятся живые микобактерии туберкулеза. Роль живых бактерий туберкулеза в происхождении иммунитета выявил Р. Кох в опыте повторного заражения больных туберкулезом морских свинок.

Вакцину против туберкулеза предложили в 1924 году французские ученые Кальметт и Герен. В результате 230 пересевов культуры, непрерывно подвергавшейся воздействию желчи, эти авторы получили стойкий вариант с определенными биологическими свойствами. Штамм этот назван культурой БЦЖ. В ветеринарной практике вакцину БЦЖ применяют в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах.

Литература 1. Т.С. Костенко, Е.И. Скаршевская, С.С. Гительсон. «Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии.» – М.: Агропромиздат, 1989.

2. Н.А. Радчук, Г.В. Дунаев, Н.М. Колычев и др. «Ветеринарная микробиология и иммунология.» – М.: Агропромиздат, 1991.

3. Борисов Л.Б. «Медицинская микробиология, вирусология, иммунология». Москва, 2005.

4. М.П.Зыков, Т.Б.Ильина Потенциально патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов. М., «Медицина», 1978, 176 с.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Секция «Актуальные проблемы вирусологии, биотехнологии и иммунологии»

Влияние препарата «УГСХА-08» на урожай и накопление тяжелых металлов в семенах фасоли Трусова О.А., Куклина Н.Г. - студентки 5 курса естественно – географического факультета Руководители: Пузакова А.И., Тигунов А.Е.

ФГОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет им И.Н.

Ульянова»

По мере увеличения спроса на экономически выгодную и экологически чистую сельскохозяйственную продукцию расширяется перечень новых стимуляторов роста – современных биопрепаратов, применяемых в растениеводстве в разных регионах страны. О целесообразности внедрения новых биопрепаратов можно говорить, только если соблюдается технология их применения (дозы, сроки, способы обработки и т.п.) и комплексно используются традиционные средства повышения продуктивности и устойчивости сельскохозяйственных культур. Соответственно, возникает необходимость изучения эффективности действия предлагаемых препаратов на физиолого-биохимические процессы, качество и урожай растительной продукции с учетом особенностей каждого конкретного региона и его почвенно-климатических условий.

В Ульяновской области исследуются перспективы использования биологического стимулятора роста и развития растений «УГСХА-08», представляющего собой продукт жизнедеятельности эндосимбиотических грибов и микроорганизмов.

В нашей работе изучалось влияние препарата «УГСХА-08» на урожай и накопление тяжелых металлов в семенах фасоли сорта «Розовая».

Исследования проводились на агробиологической станции УлГПУ в 2007- гг. Почва- чернозем среднегумусовый, рН- 6,9. Агротехника возделывания фасоли - общепринятая для -зоны, посев вариантов - на делянках 5 м2, повторность - 3-кратная. Схема опыта предусматривала варианты: 1)контроль, 2)«УГСХА - 08», 3) N30P90K60, 4)«УГСХА-08» + N30P90K60. NPK вносили в виде азофоски. Использовали предпосевную обработку семян «УГСХА-08» в концентрации 1:1000 за 2 часа до посева. Содержание тяжёлых металлов в семенах определяли на атомно-адсорбционном спектрофотометре в агрохимслужбе г. Ульяновска.

Результаты опытов показали, что обработка препаратом «УГСХА-08»

приводит к увеличению урожая семян (табл. 1), но максимально - при сочетании с NPK.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица 1.

Влияние препарата «УГСХА-08» на урожай семян фасоли Вариант 2007 г. 2008г.

Общая масса от Общая масса от % % семян с 1 контроля семян с 1 контроля растения, г. растения, г.

1. Контроль 237,0 100,0 180,0 100, 2. «УГСХА - 330,0 140,0 309,0 171, 08»

3. N30P90K60 335,0 143,0 300,0 166, 4. «УГСХА-08» 380,0 161,7 325,0 180, + N30P90K Урожайность фасоли в 2007 г. во всех вариантах оказалась выше, что связано с большей суммой осадков за период вегетации (2007 г. - 203,8 мм, 2008 г. - 150,0 мм;

норма - 180 мм). Внесение в почву NPK также как и обработка фасоли «УГСХА - 08» приводила к увеличению урожая семян как в 2007, так и в 2008 г. Максимальное эффект увеличения урожая отмечен на варианте «УГСХА-08» + N30P90K60.

Таблица 2.

Содержание тяжелых металлов в семенах фасоли, мг/кг Вариант 2007 год 2008 год Сu РЬ тм Сu РЬ Ni тм Zn Cd Ni Zn Cd Контроль 1. 12,5 4,5 0,12 0,08 0,54 17,75 2,7 1,0 0,06 0,03 - 3, 2. "УГСХА-08" 18,6 5,6 0,16 0,09 0,45 24,90 3,2 1,3 0,07 0,03 - 4, 3. N30P90K60 15,5 4,6 0,19 0,10 0,34 20,70 2,5 0,8 0,05 0,03 - 3, 4. "УГСХА-08" 20,3 5,1 0,23 0,10 0,38 26,10 2,4 0,7 0,05 0,02 - 3, + N30P90K 50,0 30,0 5,0 0,30 1, ПДК ---------- Как показал анализ урожая, в условиях меньшего количества осадков усиливается положительный эффект обработки препаратом «УГСХА-08»:

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии увеличение урожая по сравнению с контролем в 2007 г. составило 40%, а в 2008 г. - 71,7 %. Содержание тяжелых металлов в семенах фасоли под влиянием «УГСХА-08» превышало контроль и в 2007, и в 2008 г., но было значительно ниже ПДК. Сумма тяжелых металлов (тм) оказалась выше, чем в контроле, на 59,0%, в 2008 г. - лишь на 21,4%. (см табл. 2) В условиях оптимального увлажнения 2007 г. внесение NPK в комплексе с обработкой семян препаратом «УГСХА-08» и внесение NPK без обработки заметно усиливало аккумуляцию ТМ растениями. И напротив, условия меньшего количества осадков 2008 г. в вариантах NPK и NPK +«УГСХА-08» приводили к снижению суммарного накопления ТМ, причем в исследуемых образцах не обнаруживалось ионов никеля.

Таким образом, результаты наших исследований позволяют сделать следующие выводы:

1) предпосевная обработка семян фасоли препаратом «УГСХА-08»

увеличивает урожай;

2) эффект увеличения урожая при использовании «УГСХА-08»

усиливается в условиях недостаточного увлажнения и на фоне комплексного минерального удобрения;

3) в условиях оптимального водного режима и минерального питания применение препарата «УГСХА-08» приводит не только к увеличению урожая, но и стимулирует поступление микроэлементов (включая тяжелые металлы) и их накопление в семенах;

4) эффекта усиления аккумуляции ТМ в условиях недостаточного увлажнения и оптимального минерального питания при использовании «УГСХА-08» не наблюдается.

Применение биостимулятора (УГСХА 08) роста растений при выращивании ячменя Вильданова О.В.*, Горшков И.Г.** - студенты 4 курса* и 5 курса** естественно географический факультета Руководитель - к.б.н., доцент Батраков В.В.

ГОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н.Ульянова»

Важным направлением в научных исследованиях является оценка перспективности использования в практике сельхоз производителей новых биостимуляторов для увеличения продуктивности и устойчивости сельскохозяйственных культур, а также улучшения качества продукции.

Наша работа была посвящена изучению влияния биостимулятора роста на качество полученного урожая и накопления микроэлементов, включая тяжелые металлы, ячменя сорта Заозерский - 85. Опыт проводился по следующей схеме:

контроль – предпосевная обработка семян ячменя фунгицидами;

опыт – предпосевная обработка семян ячменя фунгицидами и биостимулятором.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии При выращивании ячменя на опытной делянке проводилась обработка растений по всходам в конце мая и на стадии формирования колоса в конце июня, в концентрации 1:10000, объёмом 1,5 мл биостимулятора на 1 га. После сбора урожая зерно ячменя было изучено на предмет минеральных веществ.

Данные изучения минеральных элементов в опытной и экспериментальной пробах представлены в таблице № 1.

Таблица № 1.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 

Похожие работы:





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.