авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 9 |

«ФГАОУ ВПО "Казанский (Приволжский) федеральный университет" Сервис виртуальных конференций Pax Grid Акутальные проблемы биохимии и бионанотехнологии III ...»

-- [ Страница 2 ] --

Сl снижен во всех трех группах, но наибольшее снижение в 2 раза отмечено в стадии СПИДа. Ca снижался в 2 раза в первой и третьей группе, и повышался в второй группе больных, Na был не достоверно снижен в1-й и повышался в 3-й группе больных. Хлор присутствует во всех органах и тканях, участвует в обмене веществ, входит в состав Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" биологически активных соединений организма и является незаменимым химическим элементом(5). С обменом натрия тесно связан метаболизм хлора в организме содержание которого было достоверно снижено у ВИЧ-инфицированных. Вместе с калием и натрием хлор обеспечивает нормальный водно-солевой обмен. Соотношение этих элементов всегда должно быть сбалансированным, так как они поддерживают нормальное осмотическое давление межклеточной жидкости. Кислотно-щелочной дисбаланс, который может появиться вследствие нарушения равновесия между этими элементами, вызывает различные заболевания у ВИЧ инфицированных. Снижение содержания кальция более чем в полтора раза у ВИЧ – инфицированных указывает на нарушенный кальциевый метаболизм, который связан с другими важными металлами и анионами:

калием, натрием, магнием, железом, кобальтом, что влияет на процессы гомеостаз и обменные процессы организма, которые взаимосвязаны с работой иммунной системы (Рис.1).

Наибольшее снижение Zn отмечалось во второй группе ВИЧ-инфицированных пациентов, по видимости присоединение оппортунистических инфекций, нарушение всасываемости, оказывает свое влияние на содержание цинка, а он влияет на функции Т и В лимфоцитов, при дефиците которого нарушается синтез антител. Цинк входит в состав более 300 металлоферментов, среди которых – карбангидраза, щёлочная фосфатаза, РНК- и ДНК-полимеразы, тимидинкиназные карбоксипептидазы, алкогольдегидрогеназа.

Ключевая роль цинка в синтезе белка и нуклеиновых кислот объясняет нарушения роста и заживления ран, наблюдающиеся при дефиците этого элемента. Он участвует в регуляции синтеза стероидных, тиреоидных и других гормонов и регуляции работы иммунной системы, в наших исследованиях выявилось незначительное снижение цинка у ВИЧ-инфицированных, что нашло свое отражение в работе их иммунной системы.

Содержание Ва было снижено во всех трех группах, но при индивидуальном анализе обнаружилось повышение Ва у определенных женских лиц, которые употребляли определенные краски для окрашивания волос. Соединения бария по свойствам близки к соединениям кальция, он проявляет сходство с кальцием и по кинетике распределения, и по способам выведения из организма (3).




Fe было достоверно снижено, почти в 2 раза ((23,5±6,3 мкг/г) во всех трех группах. Известно, что железо – жизненно важный элемент, входящий в структуру дыхательного пигмента эритроцитов (гемоглобина). Метаболизм железа меняется и при ВИЧ-инфекции. На Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" усвоение железа влияет поступление фосфатов, оксалатов, кальция, цинка, витамина Е и др. (10,11,18) Достоверное снижение Fe во всех группах ( р0,05) ВИЧ-инфицированных, доказывает, что коррекция данного микроэлемента внесет свое положительное воздействие на состояние ВИЧ-инфицированного.

Sr был повышен во всех группах. Стронций явился одним из микроэлементов, который оказался повышенным у ВИЧ-инфицированных в 1,7 раза, повышение его отмечалось во всех стадиях. По литературным данным этот микроэлемент оказывает цитопротективный эффект. Поступающий в организм с пищей стронций всасывается относительно слабо. Избыток стронция может вызывать изменения в минеральном обмене костной ткани. Содержание стронция в волосах отражает экспозицию организма к этому элементу и коррелирует с его концентрацией в костях(10).

Сu был достоверно значительно (в 5 раз) снижен (5,6±2,4 мкг/г) во всех трех группах. Медь в организме человека существует в двух состояниях – Cu2+ и Cu1+;

а лёгкий переход между ними обеспечивает её окислительно-восстановительные свойства. Симптомы дефицита меди включают нейтропению, анемию (не чувствительную к препаратам железа), остеопороз, различные поражения костей и суставов, сниженную пигментацию кожи, неврологические симптомы и нарушения работы сердца(11). Дефицит всасывания меди может наблюдаться при диффузных заболеваниях тонкого кишечника, что и можно наблюдать у наших пациентов (рис. 2).

Анализ следующей группы показал, что Hg была достоверно снижена в 3 раза во всех трех группах и более выраженное снижение наблюдалось в 3-й группе больных (0,06±0,03 мкг/г). В крови более 90% ртути связано с эритроцитами (гемоглобином). Неорганическая ртуть выделяется с мочой, органическая – секретируется в желчь, поступает в желудочно-кишечный тракт, и затем снова всасывается в кровяное русло.

Аg был достоверно снижен во всех трех группах, более значительное снижение в 2 раза определялось в 3-й группе больных (0,07±0,006 мкг/г).

У ВИЧ-инфицированных пациентов выявлено снижение содержания серебра, особенно в последней стадии заболевания. В зависимости от дозы, серебро может как стимулировать, так и подавлять фагоцитоз. Под влиянием серебра повышается количество иммуноглобулинов классов А, М, G, увеличивается процентное содержание абсолютного количества Т-лимфоцитов. По видимости сниженное количество серебра имеет сове отражение на снижении иммунологлобулинов класса А,М,G и Т-лимфоцитов.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Значительное достоверное снижение Sb в 5 раз определялось во всех группах (0,05±0,035 мкг/г). Сурьма не является жизненно необходимым элементом, хотя, в малых количествах, как и мышьяк, может действовать как стимулятор физиологических процессов и при хронической интоксикации могут наблюдаться сердечные аритмии. Снижение сурьмы у ВИЧ-инфицированных в 5 раз, по видимости нашло свое отражение в нарушении физиологических процессов при данном заболевании, выражающееся в воспаление слизистой дыхательных путей, глаз, дерматитах. (11).





As был достоверно снижен во всех группах больных и наибольшее снижение в 3-й группе (0,03±0,015 мкг/г). Концентрация мышьяка у ВИЧ-инфицированных пациентов определили сниженной в 4 раза. В низких концентрациях мышьяк можно отнести к условно необходимым элементам, взаимодействуя с тиоловыми группами белков, цистеином, глутатионом, липоевой кислотой и влияет на окислительные процессы в митохондриях. Его дефицит приводит к снижению противоопухолевого иммунитета (6).

Cd был достоверно снижен в 5 раз во всех трех группах (0,03±0, мкг/г). В крови более 95% кадмия находится в эритроцитах. Токсические эффекты кадмия определяются конкуренцией с другими металлами за соединение с ферментами и нарушением их активности, связыванием его с различными белками с их последующей денатурацией и изменением свойств. Дисбаланс кадмия в организме ВИЧ-инфицированных приводить к анемии, поражению печени, кардиопатии и развитию гипертонии.

Со был достоверно снижен во всех трех группах в 3 раза, с некоторым повышением во 2-й группе, не достигающим нормы, наибольшее снижение Со было в 3-й группе (0,01±0,004 мкг/г). Как известно кобальт - компонент витамина В12, необходимого для синтеза ДНК, процессов кроветворения, функционирования нервной системы и многих других процессов. Дефицит кобальта – причина тяжёлых заболеваний:

пернициозной анемии, фуникулярного миелоза, мегалобластной анемии (), по нашим данным выявлено достоверное снижение кобальта( р0,001) у всех больных с ВИЧ инфекцией, причем в стадии СПИД выявляется более выраженное снижение, что усугубляет состояние ВИЧ-инфиицированного в нарушениях процессов кроветворения, анемии и нарушениях работы ЦНС.

У пациентов с ВИЧ - инфекцией обнаружено достоверное снижение концентрации Au в волосах в 2,7 раза (рис.3). Золото жизненно необходимым элементам не относится, хотя может проявлять Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" биологическую активность в отношении некоторых ферментов. В организме человека содержится менее 10 мг золота, около 50% его концентрируется в костях. По литературным данным с препаратами золота, связывают проявление дерматитов с эозинофилией. А также аллергические и аутоиммунные реакции и влияние на почки и печень, гемопоэз. Прямой корреляции между терапевтическими дозами, концентрацией золота в моче и сыворотке и клиническими эффектами не выявлено, хотя кожные аллергические реакции чаще отмечали у пациентов с более высокой концентрацией в крови данного элемента.

При рассмотрении следующей группы элементов были выявлены следующие нарушения: Ni был достоверно снижен у ВИЧ-инфицированных пациентов во всех трех группах в 3 раза по сравнению с нормой (2,5±0,1 мкг/г). Никель предположительно, входит в структуру некоторых белков (в т. ч. фермента уреазы), РНК, ДНК. Его дефицит проявляется задержкой развития организма, атрофией семенников, анемией, гиперхолестеринэмией и снижением запасов гликогена, что находит свое отражение у ВИЧ-инфицированных детей.

Br был повышен в 1-й группе больных с СД4 и снижен в два раза во 2 и 3 группах. Бромид натрия участвует в процессе активации пепсина, активизирует функционирование некоторых ферментов. В частности, речь идет о липазах, амилазах поджелудочной железы, участвующих в эффективном переваривании углеводов, жиров. Считается, что бром – незаменимый микроэлемент, оказывающий прямое воздействие на работу центральной нервной системы, щитовидной железы. соединения брома участвуют в деятельности эозинофилов – клеток иммунной системы. Пероксидаза эозинофилов окисляет бромид-ионы до бромноватистой кислоты, которая помогает разрушать чужеродные клетки, в том числе и раковые. Недостаток брома в пище приводит к бессоннице, замедлению роста и уменьшению числа эритроцитов в крови.

I был повышен в 1 группе больных в 6 раз, в 3 –й группе больных снижение сохранялось, а во 2-й группе был в пределах нормальных значений. роль йода в организме - участие в функционировании щитовидной железы, обеспечение образование ее гормонов — тироксина и трийодтиронина. Участие в росте, участие в дифференциации клеток всех тканей. Участие в метаболизме всех видов и теплообразовании (посредством поглощения кислорода и митохондриального дыхания с регуляцией протонного шунта (6).

Mn был не значительно снижен во всех группах. Являясь эссенциальным элеменом и кофактором более чем 30 ферментов, участвующих преимущественно в реакциях фосфорилирования, он имеет Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" свое значении в иммунных реакциях ВИЧ-инфицированного.

Cr,Se,U были также снижен во всех группах.

Rb был выражено достоверно снижен во всех группах, наибольшее снижение в 20 раз было в группе с СД4 больше 500 (0,1±0,05 мкг/г) (рис.

4), выступает в роли синергиста калия (действует с ним совместно и принимает участие в одинаковых функциях и движениях). Местами концентрации этого минерала являются костные ткани, головной мозг, яичники, легкие, а также незначительное его количество присутствует в мягких тканях. Основными функциями, которые выполняет рубидий, считаются: • замещение в различных процессах калия (активирование ферментов, что особенно важно для нормального пищеварения);

обладание антигистаминными свойствами (является довольно сильным стимулятором активизации противоаллергических реакций организма.

Содержание йода в волосах коррелирует с уровнем поступления его в организм, хотя эта зависимость не является однозначной. Снижение уровня йода в волосах при экологических исследованиях выявлялось у 59% жителей йоддефицитных районов. При заболеваниях щитовидной железы может наблюдаться как понижение уровня йода в волосах и ногтях (чаще), так и его повышение (5,6). В наших исследованиях выявлено значительное повышение йода у ВИЧ-инфицированных, что предполагает необходимость коррекции данного нарушения для нормализации работы щитовидной железы, а через нее и всей эндокринной системы. Избыток йода может быть причиной тяжёлой патологии: щитовидной железы (тиреотоксикоз), поражений кожи и дыхательных путей, ощущению усталости, слабости, депрессии, оказывать тератогенное действие на плод, аллергозов. Марганец в нашем исследовании снижен при ВИЧ инфекции в 2 стадии вторичных оппортунистических инфекций, являясь – жизненно важным для человека элементом, он входит в состав многих металлоферментов, действует также в качестве неспецифического активатора ферментов. К числу магнийзависимых ферментов относят супероксиддисмутазу (митохондриальную), пируваткарбоксилазу, аргиназу, гликозилтрансферазу. В активации некоторых ферментов ионы Mn2+ могут быть заменены Mg2+, Co2+ или другими двухвалентными ионами.

Считается, что изменения метаболизма марганца могут вносить свой вклад в симптомы развивающейся энцефалопатии при тяжёлых поражениях печени вследствие нарушения его экскреции с желчью.

По литературным данным недостаток Cr у человека порождают соматическую патологию, связанную с изменяющими локализацию болями, изъязвлениями и поражениями со скудным отделяемым;

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" сердечно-сосудистыми болезнями;

канцероматозом;

гиперхолестеринемией;

поражениями поджелудочной железы и кишечника, диабетом;

болезнями почек (гематурия, альбуминурия);

различными неврологическими болевыми синдромами и зудом.(7). В наших исследованиях Сr достоверно снижен ( р0,05) у ВИЧ инфицированных во всех группах. По видимости снижение хрома у ВИЧ инфицированных имеет свое лепту в дисбаланс работы всех систем ВИЧ-инфицированного больного.

Селен - жизненно необходимый для человека микроэлемент. Он важен для нормальной тиреоидной функции и нормальной работы иммунной, репродуктивной, сердечно-сосудистой и нервной систем.

Описано более 30 биологически активных селенсодержащих белков.

Селен функционально связан с витамином Е. Уровень селена плазмы снижается в период острой фазы ответа организма на воспаление и инфекции (21). Даже небольшой дефицит селена, может быть вовлечён в изменения тиреоидной, иммунной и репродуктивной функций организма, а также способен приводить к психическим нарушения. Дефицит селена отмечен в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний, увеличении вирулентности вирусов и снижении защиты организма от некоторых видов рака. У наших пациентов был достоверный дефицит селена, который коррелировал с иммунологической недостаточностью во всех группах ВИЧ- инфицированных, что показывает его влиянии на снижение иммунитета ВИЧ-инфицированных больных.

Анализ литературных данных показал, что изучены различные показатели обмена большинства незаменимых микроэлементов более чем при 100 заболеваниях. При помощи металлов-микроэлементов активируются ферменты, играющие решающую роль в биохимических процессах. Значительный материал накопленный по изучению механизмов активации, дифференцировки и регуляции отдельных популяций Т и В – клеток, делают возможным и необходимым рассматривать эффект микроэлементов в тесной взаимосвязи с процессами нормального иммунного ответа, позволяет определить конкретные точки приложения микроэлементов на те или иные стороны метаболизма, конкретных лимфоидных субпопуляций (9). В заключении можно сделать следующие выводы: выраженный дисбаланс макро и микроэлементного состава ВИЧ-инфицированных, выражающийся тенденцией к значительному снижению макро- и микроэлементов по мере прогрессирования ВИЧ-инфекции, с корреляцией с CD лимфоцитами, показал, влияние данных элементов на состояние иммунной и других систем организма ВИЧ-инфицированных.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Т.о. проведенные нами исследования по содержанию макро и микроэлементов у ВИЧ-инфицированных выявило:

- нарушение 22 из 26 исследованных макро и микроэлементов.

- снижение К, Cl, Ca, Na,Sc, Fe, Co,Zn,Cr,Se,Ag, Br, Ni, Cu, Sb, La, Au, As, Hb,Cd,Ba и увеличение I, Sr.

- изменение содержания как эссенциальных так и токсичных элементов, большей частью в сторону снижения, наибольшее снижение определялось в группе пациентов в конечной стадии СПИДа.

Проведенные нами исследования доказывают участие ряда макро и микроэлементов в формировании иммунологической недостаточности ВИЧ-инфицированного и подтверждают важность баланса макро и микроэлементной системы организма ВИЧ-инфицированного человека для нормального функционирования как его иммунной системы, так и эндокринной, нервной и сердечно-сосудистой систем. В связи с этим нарушения макро- и микроэлементной системы, выявленные у ВИЧ – инфицированных пациентов имеет свое значение в патогенезе данной инфекции, коррекция их имеет свое большое значение при проведении лечения данной патологии. Учетом выявленных нарушений ВИЧ-инфицированным предлагалось питание с добавлением микроэлементов.

Среди наблюдаемых ВИЧ – инфицированных положительный клинический результат был получен в 85 % случаев. В 10% случаев пациенты частично следовали полученным рекомендациям, в 5% случаев пациенты не смогли следовать полученным рекомендациям, в связи с чем не получили желаемого эффекта. В 100% случаев большое значение имела долгосрочность применяемой диеты и рекомендаций.

23% ВИЧ –инфицированных ухудшили полученный результат в связи с нарушением рекомендаций. Однако при восстановлении подобранной диетотерапии, они вновь получили хороший клинический результат. На фоне индивидуально подобранной диетотерапии ВИЧ – инфицированные пациенты прибавили в весе, повысили работоспособность, получили клиническое и иммунологическое улучшение состояния, изменилось психологическое состояние, повысился интерес к жизни.

Заключение. Специальная диетотерапия при ВИЧ – инфекции способствует улучшению самочувствия, компенсирует потери питательных веществ, предотвращает обезвоживание. Дополняет медикаментозную терапию и способствует ее проведению. Смягчает тяжесть симптомов способствует прибавки в весе, нормализует психологическое состояние, улучшает клиническую и иммунологическую картину. Медицинские работники должны учитывать Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" симптомы, характер питания и особенности лечения, взаимодействие лекарственных средств с пищей.

Рис. 1. Содержание Cl, Ca, Na, K, Zn в зависимости от содержания СД-4 лимфоцитов у ВИЧ - инфицированных.

Рис. 2. Содержание Ba, Fe, Sr, Cu в зависимости от содержания СД- показателей показателей у ВИЧ- инфицированых.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Рис. 3. Содержание Hg, Ag, Sb, As, Au, Co, La, Sc в зависимости от сожержания СД-4 лимфоцитов у ВИЧ- инфицированных.

Рис. 4. Содержание Ni, Br, I, Mn, Cr, Se,U, Rb в зависимости от СД- показателей у ВИЧ- инфицированных.

Литература 1. Абдуллаева Ш.Л. Роль микроэлементов в регуляции иммунитета в организме (обзор): научное издание / М.А. Абдуллаева // Новости дерматовенерол. и репродукт. здоровья. -Т., 2005. - №1. – C.99- 2. Авдеева Е.В., Куркин В.А Иммуномодулирующие фитопрепараты:

спрос и предложение // Ремедиум. - 2007. - № 3. - C. 26- 3. Авцын А.П. Недостаточность эссенциальных микроэлементов и ее проявление в патологии. // Архив патологии. - 1993. - № 3. - С.3- Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" 4. Азизов В. А. Макро - и микроэлементозы у больных с ишемической болезнью сердца в условиях высокогорья северо-западных районов Азербайджана : научное издание / В. А. Азизов, В. С. Мамедова // Медицинский журнал Узбекистана. -Ташкент, 2009. - N1. - С. 52- 5. Азизова Д. Макроэлементный спектр волос женщин с удаленными яичниками, проживающих в зоне эндемического зоба / Д.Ш.Азизова // Проблемы репродукции. - М., 6. Барашков Г.Микроэлементы в теории и практике медицины :

научное издание / Г. Барашков, Л. Зайцева // Врач. - М., 2004. - №10. С. 45-48.

7. Бельмер С.В. Микроэлементы, пробиотики, кишечная микрофлора, иммунитет // Ж. Педиатрия.- 2009. - Том 87. - № 3. - С.7- 8. Ребров В.Г., Громова О.А. Витамины, макро- и микроэлементы // Иммунология.- 2008. - № 5 – С.84- 9. Скальный А.В., Рудаков И.А. Биоэлементы в медицине. М.: Изд. дом «Оникс 21 век»: Мир, 2004 - 272 с.

10. Спиваковский Ю.М., Спиваковская А.Ю. Микроэлементы и их роль в жизни человека (сообщение 2): научное издание // Мед. сестра. - М., 2006. - №1. - С. 39-41.

11. Berni Canani R., Passariello A. Mechanisms of action of zinc in acut diarrhea // Curr Opin Gastroentrol. - 2010. - P. 1 - 2.

12. Chimienti F., Seve M. Zinc homeostasis –regulating proteins. // Curr.Drug. Targets. -2003. - P. 323 – 328.

13. Gomez Y., Arocha F., Espinoza F. et al. Zink levels in prostatic fluid of patients with prostate pathogies // Invest. Clin. - 2007. – V. 48. - № 3. - P.

287 - 294.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" АНАЛИЗ РАССТОЯНИЙ МЕЖДУ АТОМАМИ ИНГИБИТОРА И АТОМАМИ АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ АКТИВНОГО ЦЕНТРА АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ХОДЕ ДИНАМИКИ Аюпов Р. Х., Акберова Н. И., Тарасов Д. С.

Казанский (Приволжский) федеральный университет aurusta@mail.ru В ходе изучения взаимодействия производного пиридоксина и аминокислотных остатков активного центра ацетилхолинэстеразы (АХЭ) [1,2] рассматривается изменения расстояний между атомами ингибитора и атомами аминокислотных остатков. Для анализа расстояний была проведена динамика в программе NAMD 2.8. Анализировались расстояние между атомами О гидроксильной группы Ser203 и С карбамоилированного фрагмента производного пиридоксина «а», атомом N того же фрагмента и атомом О гидроксильной группы Tyr124;

связи между С и N, С и О ингибитора (рис.1).

Анализ динамики показал (рис.2) (первые 4 значения не учитывались), что колебание связей между атомами C-N, C-O не существенно и находятся в диапазоне от 1,29 до 1,41 (среднее 1,36 ) и от 1,28 до 1,42 (среднее 1,35 ) соответственно. Однако, данные по связи С-О косвенно подтверждают, что существуют расстояния, которые могут стать переходным моментом для разрыва связи и тем самым подтверждают предложенный ранее общий механизм ингибирование фермента производными пиридоксина [3]. Расстояние между не связанными атомами (пунктиром на рис.1) колебались в более широких пределах. Так между О и С от 3,54 до 4,68, а среднее расстояние равно 3,92. Расстояние между О и N от 3,15 до 4,67, а среднее равнялось 3,86. Предполагается, что изменения расстояний между этими атомами зависимы друг от друга, так как аминокислотный остаток Tyr124 участвует в стабилизации ингибитора, благодаря чему возможно дальнейшее прохождение лиганда и его связывание с Ser203. Но проведенный краткий анализ динамики по этим атомам явно это не показал и поэтому будут продолжаться поиски всех возможных факторов для подтверждения или опровержения предложенного механизма ингибирования фермента.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Рис. 1. Положение лиганда после динамики в активном центре Рис. 2. Динамика расстояний между атомами Литература 1. Аюпов, Р.Х., Акберова Н.И., Тарасов Д.С.. Докинг производных пиридоксина в активном центре холинэстераз. // Учен.зап.Казан.ун-та.

Сер.Естеств.Науки – 2011. – Т. 153, кн. 3. – С. 107-118.

2. Аюпов, Р.Х., Акберова Н.И., Тарасов Д.С. Взаимодействие производного пиридоксина с активным центром ацетилхолинэстеразы // Учен.зап.Казан.ун-та. Сер.Естеств. науки - 2012.- Т. 154, кн. 2.

3. Стрельник А. Д. Синтез и биологическая активность некоторых производных пиридоксина: Дис. … канд. хим. наук. — Казань, 2010. — 128 с.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" МОДЕЛИРОВАНИЕ ПИЩЕВЫХ СИСТЕМ С РЕГУЛИРУЕМЫМ СОДЕРЖАНИЕМ ЖИРОВ Базарнова Ю.Г., Шаталов И. С., Шаталова А.С.

СПб НИУ информационных технологий, механики и оптики Институт холода и биотехнологий shataloff.iv@gmail.com В последнее время наблюдается тенденция увеличения количества твердых животных жиров в пищевых рационах, что повышает риск развития ряда заболеваний [3,4,5]. Одним из путей решения данной проблемы может служить замена в рецептурах продуктов твёрдых жиров на жидкие масла, которые содержат такие незаменимые биологически активные компоненты как жирорастворимые витамины и полиненасыщенные жирные кислоты [5]. Регулируемое введение в рецептуры пищевых систем жидких жиров способствует повышению питательной ценности и усвояемости готовых пищевых продуктов.

Однако жидкие жиры нестабильны при хранении и в высокой степени подвержены порче. Кроме того, применение их в мясопереработке затруднено, поскольку предполагает большую длительность и сложность технологического процесса, что, в конечном итоге, снижает эффективность производства.

Одним из способов устранения недостатков при использовании жидких жиров является их инкапсуляция. Данный метод внесения жидких жиров обладает очевидными преимуществами:

увеличение сроков хранения;

q возможность получения порошкообразных субстанций;

q исключение взаимодействия с внешними факторами;

q достижение контролируемого высвобождения жира.

q В данной работе предварительно был получен препарат инкапсулированного жира с помощью метода, основанного на двойном эмульгировании с последующей полимеризацией белковых частиц дисперсной фазы с помощью трансглутаминазы [2, 7]. В качестве инкапсулята было выбрано кукурузное масло, обладающее высоким содержанием витамина Е, а также хорошими органолептическими показателями. При выборе инкапсулянта было решено остановиться на изоляте соевого белка (ИСБ) т. к. он показал наилучшее из Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" протестированных белков сродство к трансглутаминазе и хорошие эмульгирующие свойства.

На начальном этапе была приготовлена белково-жировая эмульсия (кукурузное масло-ИСБ) М/В, содержащая фермент трансглутаминазу.

Полученная эмульсия медленно вносилась в кукурузное масло, содержащее эмульгатор (SPAN 60), т. о. была получена двойная эмульсия M/В/М, которая далее подвергалась экспозиции в течение часов при 37 о С, в течение которой в ней протекали реакции полимеризации, ИСБ «сшивался», при этом в системе возникали капсулы. Далее они были отфильтрованы, промыты и высушены.

Полученный препарат инкапсулированного кукурузного масла применялся далее в рецептурах фаршевых продуктов смешанного состава, в качестве которых были выбраны мясорастительные колбасы.

В ходе эксперимента были выбрано две базовые рецептуры для фаршевых основ, отличающиеся между собой процентным содержанием мясной составляющей (куриная грудка) и выбранными растительными компонентами (морковь-свекла (1)/пророщенный маш-грибы (2)), и две рецептуры, содержащие инкапсулированный жир в количестве 30% от общего содержания жира ((1') и (2')). Подобные фарши, как правило, отличаются сниженной жироудерживающей способностью (ЖУС) вследствие уменьшенного содержания мяса в них, т.к. эта способность характеризуется, в основном, адсорбцией жира за счет гидрофобных участков белковой молекулы.[1].

В наших исследованиях было получено увеличение ЖУС в опытных образцах с инкапсулированным жиром, соответственно на 9,5 (1') и 13 (2') %. причем остальные функционально-технологические (ВУС, ВСС) и органолептические показатели оставались неизменными. Такое увеличение может объясняться тем, что предварительно инкапсулированные жидкие жиры механически лучше удерживаются фаршевой системой.

Таким образом, в данной работе показан принципиально новый подход к регулируемому введению жиров в пищевые продукты с целью улучшения их функциональных и технологических свойств, в частности, ЖУС. Данный метод внесения предполагает контролируемое высвобождение этих жиров непосредственно в кишечнике и не оказывает видимого влияния на органолептические показатели готовых изделий, поэтому может применяться в рецептурах диетических и функциональных продуктов.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Литература 1. Серегин С.А.Химия пищи: Методический комплекс / Кемеровский технологический институт пищевой промышленности. – Кемерово, 2003. – 69с.

2. Шаталов И.С. Способ инкапсулирования жиров и масел с использованием препарата трансглутаминазы//Сборник трудов молодых ученых 65-й Студенческой научно-технической конференции, 2012, ч. 2. сс 81- 3. Michael Miller et al. Triglycerides and Cardiovascular Disease: A Scientific Statement From the American Heart Association, 18 April http://www.circ.ahajournals.org/content/123/20/ 4. Plummer, Michelle R.;

Hasty, Alyssa H. Atherosclerotic lesion formation and triglyceride storage in obese apolipoprotein AI-deficient mice The Journal of Nutritional Biochemistry, Volume 19 (10) Elsevier – Oct 1, 5. Talayero B.G., Sacks F. M. The role of triglycerides in atherosclerosis.

Department of Nutrition, Harvard School of Public Health, Boston, MA 02115, USA 6. Thijssen M.A., Mensink R.P.. Fatty acids and atherosclerotic risk.

Department of Human Biology, Maastricht University, The Netherlands.

7. Y. H. CHO, H. K. SHIM, J. PARK Encapsulation of Fish Oil by an Enzymatic Gelation Process Using Transglutaminase Cross-linked Proteins// Journal of Food Science Volume 68, Issue 9, pages 2717–2723, November 2003.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ОСОБЕННОСТИ ПРОДУКЦИИ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ КЛЕТКАМИ СУСПЕНЗИОННОЙ КУЛЬТУРЫ ЭХИНАЦЕИ ПУРПУРНОЙ Балухо А.В., Дитченко Т.И.

Белорусский государственный университет, Минск, Республика Беларусь ditchenko@inbox.ru Эхинацея пурпурная является одним из наиболее известных и богатых природных источников гидроксикоричных кислот и их производных, которые выступают в качестве доминирующей группы фенольных соединений (ФС) данного лекарственного растения. Для их получения независимо от сезона, климатических, погодных условий могут быть использованы культивируемые in vitro клетки и ткани эхинацеи. Одним из факторов, способствующих повышению содержания физиологически активных веществ в клеточных культурах, является иммобилизация клеток. Целью настоящей работы явилось изучение особенностей продукции ФС иммобилизованными клетками суспензионной культуры эхинацеи пурпурной. Иммобилизованные клетки получали включением клеточной суспензии в Са-альгинатный гель. С этой целью смешивали 10 мл суспензионной культуры с 10 мл 3% альгината натрия и полученную смесь по каплям вносили в 0,25 М раствора хлорида кальция для формирования гранул с инкапсулированными клетками, которые в дальнейшем культивировали при постоянном перемешивании питательной среды с помощью качалки ротационного типа. Количественное определение содержания ФС в пересчете на феруловую кислоту в свободных и иммобилизованных клетках суспензионной культуры эхинацеи, а также в среде их инкубации производили на отдельных стадиях ростового цикла.

Согласно полученным данным в ходе лаг и лог-фазы иммобилизация не вызывала достоверных изменений в содержании анализируемых вторичных метаболитов, и только при переходе в стационарную фазу отмечалось возрастание уровней их накопления в иммобилизованных клетках по сравнению со свободными в среднем в 1,8 раза.

Существенное учеличение выделения ФС из подвергнутых иммобилизации клеток отмечалось, начиная с лог-фазы цикла выращивания. На протяжении стационарной фазы в среде инкубации Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" иммобилизованных клеток содержалось вдвое больше ФС по сравнению с культуральной средой клеточной суспензии. Следовательно, иммобилизация клеток суспензионной культуры эхинацеи приводила не только к повышению внутриклеточного содержания ФС, но и их выделения в среду инкубации, что является важным условием для практического использования иммобилизованных растительных клеток.

Определение суммарного содержания ФС в клетках и инкубационной среде для суспензионной и иммобилизованных культур эхинацеи позволило выявить существенное возрастание их продукции при переходе в стационарную фазу цикла выращивания, т.е. при замедлении ростовых процессов. В этих условиях биосинтетический потенциал иммобилизованных клеток был в среднем в 1,8-2 раза выше по сравнению клетками суспензионной культуры, а примерно 30-35% синтезируемых ФС экскретировалось в среду их инкубации.

Положительный эффект иммобилизации на продукцию ФС клетками суспензионной культуры эхинацеи пурпурной может быть связан с повышением активности ключевого фермента их биосинтеза – фенилаланинаммиаклиазы. Кроме того, иммобилизация может снижать интенсивность синтеза материалов клеточной стенки, которая содержит значительное количество ФС, в результате чего происходит их перераспределение и преимущественное накопление внутриклеточных растворимых растительных фенолов. В целом проведение процедуры иммобилизации клеток суспензионной культуры эхинацеи пурпурной является эффективным приемом для разработки биотехнологического способа их культивирования в качестве источника физиологически активных веществ.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ РАЗВИТИИ ПОЗДНИХ ОСЛОЖНЕНИЙ У ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ Басов А.А., Мелконян К.И., Афанасьева А.Ю., Гисс И.О., Попов К.А., Федосов С.Р., Малышко В.В.

ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет»

Минздрава России, г. Краснодар.

son_sunytch79@mail.ru Несмотря на достижения медицины последних лет в области лечения и профилактики заболеваний эндокринной системы, сахарный диабет (СД) остается одним из наиболее распространенных хронических и медико-социальных значимых заболеваний, которое постепенно приобретает черты неинфекционной эпидемии [1]. В настоящее время наряду с хронической гипергликемией и процессами гликозилирования биомолекул, в развитии поздних осложнений СД общеизвестна роль окислительного стресса (ОС), который является важным фактором, способствующим развитию и прогрессированию осложнений СД [2-4].

Участию ОС в патогенезе осложнений у больных СД посвящены многочисленные исследования, тем не менее, остается актуальной разработка новых алгоритмов диагностики нарушений функционирования ферментного и неферментного звеньев антиоксидантной системы (АОС). Опубликованные в научной литературе данные по изменению состояния АОС и выраженности свободнорадикального окисления (СРО) при СД нередко носят противоречивый характер, при этом также не существует единого мнения о терапевтической тактике ведения больных СД с применением антиоксидантов с целью профилактики развития и прогрессирования диабетических осложнений.

Одним из наиболее грозных осложнений СД является синдром диабетической стопы (СДС), многокомпонентный патогенез которого включает изолированное или сочетанное поражение периферической нервной системы, артериального и микроциркуляторного русла [5], поэтому в зависимости от преобладания того или иного патогенетического фактора выделяют нейропатическую, ишемическую и смешанную (нейро-ишемическую) формы СДС [6, 7]. Следует также отметить, что одним из проявлений раневого процесса является в свою Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" очередь изменение баланса в системах генерации свободных радикалов и антиоксидантной защиты [8]. В клинической медицине существует недостаток информации о состоянии прооксидантно-антиоксидантного баланса у отдельных когорт пациентов, что затрудняет обоснованный выбор прооксидантной или антиоксидантной терапии [9].

В связи с вышеизложенным целью настоящего исследования было изучение динамики показателей ферментного и неферментного звеньев АОС крови в процессе лечения СД, осложненного СДС.

Материалы и методы. Объектом исследования была кровь больных, находившихся на лечении в отделении гнойной хирургии ГБУЗ «Краевая клиническая больница №1 им. профессора С.В. Очаповского» (г.

Краснодар). Включенные в исследование пациенты (n=62) с целью проведения аналитического и статистического анализа больные были разделены на три основные группы и две контрольные группы, отличающихся по нозологии. Группа А включала 39 больных с осложнениями синдрома диабетической стопы, которые были разделены на две подгруппы А1 - пациенты с флегмоной стопы (N=20) и А2 пациенты с гнойными ранами стопы (n=19). Основная группа В включала больных с флегмонами шеи, вызванными не анаэробной неклостридиальной флорой (n=23). Все включенные в исследование пациенты не имели осложнений в виде флегмон граничных областей и тяжелого сепсиса. С целью обеспечения сопоставимости статистического анализа были выделены две контрольные группы. В группу К1 были включены пациенты, находившиеся на лечении в отделении эндокринологии МБУЗ «Городская больница №2»

г.Краснодара (n=22). В группу К2 были включены лица, не страдающие соматическими заболеваниями на момент обследования (n=20).

Пациенты были сопоставимы по возрасту и полу между группами А и группой К1, группой В и группой К2. При поступлении в клинику пациентам выполнялась адекватная хирургическая обработка гнойного очага по традиционной методике [10]. Использовались повязки с мазью «Левомеколь» на протяжении всего исследования. Индивидуально для каждого пациента фиксировался момент перехода раны из гнойно-некротической в фазу грануляций (использовалась классификация фаз раневого процесса по [11]).

Из показателей ферментного звена АОС оценивались активность каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов по методикам [12] и [13] соответственно. Показатели неферментного звена АОС оценивались по антиоксидантной активности (АОА) плазмы крови амперометрическим способом на анализаторе «Яуза-01-ААА» по методу Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" [14], а также количеству тиоловых групп в гемолизате эритроцитов с использованием реактива Эллмана [15].

Результаты и обсуждение. В ходе исследования выявлено, что средние сроки момента смены фаз в различных группах составили: в группе А1 — 12±0,4 (1,5) сутки, в группе А2 — 10+0,4 (1,7) сутки, в группе В — 7±0,2 (1.1) сутки.

В результате проведенных исследований среди показателей ферментного звена АОС отмечено снижение активности КАТ в гемолизате эритроцитов в период 1-3 суток (в группе А1 на 39%, p 0,05;

в группе А2 – на 33%, p 0,05;

в группе В – на 12% от показателя контрольной группы) соответствует ингибированию этого фермента в результате накопления в крови токсических продуктов. Прирост активности КАТ с 4-6 суток является проявлением естественной детоксикации. В 1-3 сутки был отмечен рост активности СОД в гемолизате эритроцитов (в группе А1 – на 34%, в группе А2 – на 32% и в группе В – на 32,6% от показателя контрольной группы;

p 0,05), что является ответом на гиперактивацию синтеза активных форм кислорода.

У пациентов группы А реакции прооксидантного и антиоксидантного компонента торпидны, а амплитуда реакции значительно снижена.

При изучении показателей нефементного звена АОС установлено, что с 1 дня АОА в группе А снижалось (на 44,8% в группе А1 и на 48,2% в группе А2 относительно контрольных значений;

p 0,05) как проявление истощения антиоксидантной системы (АОС) при гнойном воспалении. В группе А снижение показателя АОА происходило медленнее, чем в группе В. Это может быть связано со снижением резервных возможностей АОС. В 1-3 сутки динамика SH-групп отражала продолжающееся снижение емкости наиболее быстро реагирующего на прооксидантную агрессию звена АОС (минимальное значение в группе А1 составило 73,5%, в группе А2 – 60,6%, в группе В – 63,4% от показателя контрольной группы;

p 0,05). Отмечаемый в более поздние сроки прирост концентрации SH-групп являлся отражением их регенерации. Меньшая скорость их регенерации в группе А отражает дисфункцию звена быстрого реагирования АОС.

Выводы. Таким образом, у пациентов с сахарным диабетом на фоне гнойного процесса отмечается нарушение функционирования ферментных систем антиоксидантной защиты и неферментного звена АОС, которое требует проведения дезинтоксикационной терапии и коррекции препаратами антиоксидантной направленности.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Литература 1. Young M.J. Foot problems in diabetics. In: Pickup J.C., Williams G., editors. Textbook of Diabetes 1. Malden, MA: Blackwell Science;

2003.

pp. 57.1–5719.

2. Аметов А.С., Иванова Е.В. Поворотный этап в управлении сахарным диабетом 2 типа. // Русский медицинский журнал. 2008. - Т.16.

-№28(338).- С.1876- 1879.

3. Monnier, L., Colette C., Owens D.R. Integrating glycaemic variability in the, glycaemic disorders of type 2 diabetes: a move towards a unified glucose tetrad concept. // Diabetes Metab. Res. Rev. 2009. - Vol. 25. - P.

393 -402.

4. Ceriello, A. Possible role of oxidative stress in the pathogenesis, of hypertension. // Diabetes Care. 2008. - V.3, N2. - P. 181 – 184.

5. Boulton A., Connor H., Cavanagh P. The foot in diabetes. Third edition, 2002.

6. Boulton A.J.M., Armstrong D.G. The diabetic foot. In: DeFronzo R.A., Ferrannini E., Keen H., Zimmet P., editors. International Textbook of Diabetes Mellitus. 3rd edition. Hoboken, NJ: Wiley;

2006. pp. 179–195.

7. Rathur H.M., Boulton A.J.M. The neuropathic diabetic foot. Nat Clin Pract Endocrinol Metab. 2007;

3:14–25.

8. Fredrickson M. Oxygen free radicals and wound healing // Clin. Plast.

Surg. 1990. - №17. - P. 1473-1483.

9. Rasik A.M., Shukla A. Antioxidant status in delayed healing type of wounds // Int. J. Exp. Path. 2001. - №81. - P. 257-263.

10. Костюченок Б.М., Карлов В.А. Принципы активного хирургического лечения гнойных ран // Тезисы докладов II всесоюзной конференции "Раны и раневая инфекция". Москва, 1986. - 17-19 с.

11. Даценко Б.М., Ляпунов М.А., Мохерт Н.А. Теория и практика местного лечения гнойных ран // Киев: "Здоров'я", 1995. 190 с.

12. Beers R., Sizerl. A Spectrophotometric Method for Measuring the Breakdown of Hydrogen Peroxide by Catalase // J. Biol. Chem. 1952. №195.- P. 133.

13. Костюк В.А., Потапович А.И., Ковалева Ж.В. Простой и чувствительный метод определения активности суперооксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина // Вопросы медицинской химии. 1990. - Nb2. - С. 88-91.

14. Басов А.А., Федосов С.Р., Канус И.С., Еремина Т.В., Пшидаток Д.В., Малышко В.В. Современные способы стандартизации антиоксидантных лекарственных средств и биологически активных Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" добавок // Современные проблемы науки и образования. – 2006.- № 4.

– Приложение № 1, с.149.

15. Орехович В.Н. Современные методы в биохимии. М.: "Медицина", 1977. - 293 с.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ПОКАЗАТЕЛИ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА В ОСТРОЙ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРОБЕ С ИВАБРАДИНОМ У ЗДОРОВЫХ ДОБРОВОЛЬЦЕВ Белал С.А.С., Кулик А.Л., Яблучанский Н.И.

Харьковский национальный университет имени В.Н. Каразина suzia.belal@gmail.com Высокая частота сердечных сокращений (ЧСС) покоя ассоциируется с низкими показателями здоровья [4] и требует своевременной коррекции.

Ивабрадин селективно снижает ЧСС путем блокады If-каналов синусового узла [2], но нельзя исключить его влияние на состояние регуляторных систем организма.

Анализ частотных характеристик вариабельности сердечного ритма (ВСР) отражает состояние регуляции и позволяет оценить индивидуальные реакции автономной нервной системы на лекарственную терапию [1].

Цель работы - изучить влияние ивабрадина на параметры ВСР в острой фармакологической пробе у здоровых добровольцев.

Материал и методы: обследовано 15 условно здоровых добровольцев, средний возраст 19,53 ± 1,55. Критерии исключения:

вредные привычки, прием медикаментов в течение последних 3 месяцев, ЧСС покоя менее 60 уд / мин в клиностазе.

Оценивали спектральные показатели ВСР по данным интервалокардиометрии на диагностическом комплексе «Cardiolab 2009» в 5-минутных интервалах: общую мощность спектра (ТР), мощности низких (VLF), средних (LF) и высоких (HF) частот и соотношение LF/HF [3], соответствующее симпатовагальному балансу, до и через 120 минут после однократного перорального приема ивабрадина в дозе 10 мг.

Результаты представлены в таблице:

Показатели До приема После приема TP, мс 4127,73±1782,68 6868,73±5314, VLF, мс 993,13±593,12 1831,60±1550, LF, мс2 1664,93±1179,00 2180,73±2163, HF, мс 1148,00±805,39 2646,13±2190, Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" LF/HF 2,44±2,04 0,85±0, Выводы: фармакодинамика ивабрадина состоит не только в локальной блокаде If-каналов синусового узла, но и в системной перестройке регуляции с преобладанием парасимпатических и гуморальных влияний, что требует учитывать регуляторный профиль при его назначении.

Литература 1. Яблучанский Н.И. Вариабельность сердечного ритма в помощь практическому врачу [электронный ресурс] / Н.И. Яблучанский, А.В.

Мартыненко // Режим доступа:

http://dspace.univer.kharkov.ua/handle/123456789/ 2. Ferrari R. Selective and specific I(f) inhibition with ivabradine: new perspectives for the treatment of cardiovascular disease / R. Ferrari, C.

Ceconi // Expert Rev. Cardiovasc. Ther. – 2011. - 9(8). Р. - 959-973.

3. Heart rate variability. Standards of measurement, physiological interpretation, and clinical use. Task Force of the European Society of Cardiology and the North American Society of Pacing and Electrophysiology // Eur. Heart J. - 1996. - №17(3). - P. 354-381.

4. Magder S.A. The ups and downs of heart rate / S.A. Magder // Crit. Care Med. – 2012. - 40(1). – Р. 239-245.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МЕТАБОЛИТОВ ШТАММОВ РОДА STREPTOMYCES В ОПЫТАХ IN VITRO И IN VIVO Болормаа Ч., Туан Н.Т., Тухбатова Р.И., Алимова Ф.К.

Казанский (Приволжский) федеральный университет chboloroo0809@yahoo.com Актиномицеты являются наиболее экономически и биотехнологически ценными прокариотами, которые способны производить широкий спектр биологически активных вторичных метаболитов, таких как антибиотики, противоопухолевые средства, иммунодепрессанты и ферменты.

Цель данной работы заключалась в изучении биологической активности комплекса метаболитов штаммов рода Streptomyces (S.3, S.5, S.33, S.519, S.904) в опытах in vitro и in vivo в отношении бактерий:

Escherichia coli, Micrococcus lysodeicticus, Bacillus subtilis, Serratia marcescens, Bacillus mycoides.

Для этого мы провели изучение антибиотической активности вторичных метаболитов актиномицетов, оценку способности образования биопленок бактериями, определение цитотоксичности по отношению к опухолевым клеткам HeLa in vitro. Антибиотические соединения способны не только подавлять рост микроорганизмов, но и способны тормозить рост опухолевых клеток. Нами были проведены эксперименты по влиянию пирена и комплекса метаболитов Streptomyces на фоне пирена на состояние внутренних органов мышей в опытах in vivo.

Следующим этапом наших исследований было изучение влияния подкожного введения пирена, а затем метаболитов актиномицетов мышам линии SwissWebster. Введением пирена мы моделировали патологические изменения в организме мышей.

В результате проведенных экспериментов было установлено, что наибольшую антибиотическую активность в отношении B. mycoides проявил штамм S. greseoflavus, в отношении B. subtilis и M. lysodeicticus S. cyanoalbus, E. coli, S. hydroscopicus. Комплекс метаболитов штаммов р.

Streptomyces подавлял способность к образованию биопленок у E.coli в среднем на 50%. Наибольшее влияние оказывал штамм S. hydroscopicus.

Установлено, что введение комплекса метаболитов штаммов р.

Streptomyces оказывает слабой цитотоксический эффект в отношении линии клеток HeLa в опытах in vitro и снижает токсическое действие Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" пирена на кожу, печень и почки мышей. Выявлена тенденция к восстановлению тканей после введения пирена на фоне метаболитов Streptomyces через 7 дней.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ИЗЫСКАНИЕ ЭФФЕКТИВНЫХ СРЕДСТВ ЛАБОРОТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА Валеева А.Р.

Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности (ФЦТРБ-ВНИВИ, г. Казань) anna-valeeva@mail.ru По данным ВОЗ, туберкулез (ТБ) является второй по значимости причиной смерти от какого-либо одного инфекционного агента, уступая лишь ВИЧ/СПИДу. В 2011 году 8,7 миллиона человек заболели ТБ и 1, миллиона человек умерли от этой болезни [3]. Смертность в России за 2011 год составила 14,2 случая на 100 тысяч человек [1].

По данным Россельхознадзора, в 2011г. заболевание ТБ крупного рогатого скота регистрировалось в Курской, Орловской, Саратовской, Новосибирской областях, республиках Мордовия, Чечня, Ингушетия и Татарстан [5]. В Татарстане в 2011 г. по результатам диагностических исследований выявлено 869 голов с положительной реакцией, в первом полугодии 2012 г. - 749 [2].

Для достижения эпидемиологического благополучия по ТБ в регионе и стране в целом необходима своевременная и достоверная диагностика, изолирование зараженных животных. В настоящее время диагностика ТБ в РФ основывается на сборе клинических данных, выявлении патологоанатомических изменений, оценке результатов аллергической туберкулиновой пробы и лабораторных исследований, которые малоэффективны в силу недостаточной чувствительности, специфичности, большой трудоемкости и длительности проведения лабораторного исследования [4,6]. Несовершенство традиционных методов диагностики не позволяет точно дифференцировать патогенные виды Mycobacterium от природных.

Целью нашей работы является усовершенствование иммуноаналитических методов диагностики и идентификации возбудителей туберкулеза.

В работе мы используем культуры микобактерий M.bovis (M.bovis BCG, M.bovis Vallee), М.avium, M.intracellulare. Первоначально наращивали бактериальную биомассу с целью дальнейшего экспериментального заражения лабораторных животных (кролики и морские свинки). Культивировали пассажами на плотных Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" (Левенштейн-Йенсена) и жидких (Сотона) питательных средах с последующей бактериоскопией, окрашивание по Циль-Нильсену.

В ходе эксперимента будут изучаться серологические, бактериологические, микробиологические и иммунохимические показатели в динамике патогенеза.

Полученные результаты будут использованы для разработки дифференциальной диагностики заболеваний вызванных возбудителями туберкулеза и микобактериозов.

Литература 1. Государственная программа РФ «Развитие здравоохранения».

Коллегия Минздрава России 28 сентября г./ http://rosminzdrav.ru 2. Ситуация по туберкулезу в РТ. Главное управление ветеринарии Кабинета Министров Республики Татарстан/http://guv.tatarstan.ru 3. Туберкулез. Информационный бюллетень N°104. Октябрь г./ http://www.who.int 4. Шуралев Э.А., Ндайишимийе Э.В., Мукминов М.Н. К вопросу серологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота//Ученые записки КГАВМ им.Н.Э.Баумана. – 2012. – Т.211. – С.202-206.

5. Эпизоотическая ситуация в РФ (отчет за 1 полугодие г.)/ http://fsvps.ru 6. Якупов Т.Р., Хаертдинов К.С., Хамзин Р.А., Фахртдинов И.К.

Дифференциальная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа//Ветеринарный врач, 2010, № 6, С.24-26.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" СРАВНЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ДИАГНОСТИКИ ПРОТЕИНУРИИ МЕТОДАМИ “СУХОЙ ХИМИИ” И С ПИРОГАЛЛОЛОВЫМ КРАСНЫМ Василенко Д.В., Боев К.В., Маслов А.И., Цветикова Л.Н.

ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им.

Н.Н.Бурденко», ООО Медицинский центр «ДиАл-Мед», г. Воронеж tsvn@front.ru Повышение экскреции белка с мочой сопровождает любую патологию почек. Прохождение белка через почечный фильтр зависит от состояния базальной мембраны, формы и размера белковой молекулы.

В норме через почечный фильтр проходят белки до 70 кДа. Известно, что за сутки у взрослого человека выделяется до 200 мг таких белков [1].

С учетом среднесуточного диуреза концентрация белка в моче должна составлять не более 0,13 г/л. В этой связи весьма важно иметь в распоряжении методы, позволяющие надежно регистрировать превышение содержание в моче белково-пептидных компонентов.

В настоящее время в клинических лабораторных исследованиях широко используются методы качественно-количественного экспресс-определения белка в моче и количественные. Первые представлены весьма широким ассортиментом тест-полосок различных фирм. Общей особенностью данных продуктов является ограниченная чувствительность, как правило, около 0,1 г/л. Причем, такие белки как трансферрин, белок Бенс-Джонса, низкомолекулярные пептиды (молекулы средней массы) такому тесту оказываются недоступными.

Между тем, уровень молекул средней массы отражает степень эндогенной интоксикации и зависит от времени хранения биоматериала.

Возможно, это связано с процессом спонтанной окислительной модификации низкомолекулярного белкового компонента.

Вторая группа методов представляет собой модификации количественных способов определения белка. Наибольшую распространенность получил метод с пирогаллоловым красным в связи с высокой чувствительностью и широкой линейностью.

Нами была поставлена задача провести сравнительную оценку диагностики микро- и макропротеинурий методами “сухой химии” (полоски “Urine RS”) и с пирогаллоловым красным (“Общий белок — Витал”).

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Исследуемый материал был разделен на 2 группы. Группа 1 — образцы мочи с содержанием белка по полоске 0,094±0,017 г/л (n=30).

Группа 2 — образцы с содержанием белка 0,19±0,07 г/л (n=20). Образцы обеих групп были исследованы методом с пирогаллоловым красным.

Выяснено, что при концентрации белка в моче до 0,15 г/л отличие результатов обоих методов не являются статистически достоверными с учетом критерия Стьюдента. При более высоких концентрациях белка различия оказались статистически достоверными: 0,19±0,07 г/л и 0,28±0,08 г/л соответственно (p0,05). Причем, значение pH анализируемой мочи не влияло на результат исследования.

Таким образом, при концентрации белка в моче до 0,15 г/л результаты определения по полоске можно считать количественными.

При более высоких концентрациях необходимо исследовать мочу методом с пирогаллоловым красным. Тем не менее, следует учитывать, что тест-полоска главным образом обладает высокой чувствительностью к альбумину. Очень важные для диагностики специфические белки оказываются вне сферы возможностей данного теста.

Литература 1. Методы клинических лабораторных исследований / под ред. В.С.

Камышникова - М.: MEDпрессинформ, 2009 — 752 с.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕНОВ УСТОЙЧИВОСТИ К КАМЕННОЙ ГОЛОВНЕ (USTILAGO HORDEI (PERS). LAGERH.) У СОРТОВ ЯЧМЕНЯ Вильданова Г.В.

ГНУ ТатНИИСХ Россельхозакадемии gulya_vildanova@mail.ru Ячмень является одной из самых ценных сельскохозяйственных культур в мире после пшеницы, риса и кукурузы. Зерно ячменя используется на кормовые цели, из него делают разные виды круп, кроме того, он незаменим в пивоваренной промышленности. В связи с этим, сельскохозяйственное производство постоянно нуждается в новых сортах, обладающих высоким потенциалом урожайности и качества зерна.

В настоящее время отмечаются значительные потери урожая в связи с поражением растений болезнями и вредителями. К числу таких заболеваний у ячменя относится каменная головня, вызываемая Ustilago hordei (Pers). Lagerh. Наиболее экономичным и экологически безопасным способом контролирования каменной головни ячменя является использование устойчивых сортов растений.

Целью исследований было изучить сорта ячменя и выявить генотипы с генами устойчивости к каменной головне для дальнейшего использования их в селекционной работе.

С этой целью была проведена молекулярно-генетическая диагностика отобранных сортов ячменя на предмет идентификации генотипов, несущих гены устойчивости к каменной головне и выделены перспективные генотипы для селекции ячменя в условиях Среднего Поволжья.

Материалом для исследования служили 9 районированных сортов и 11 сортов из коллекции ГНУ ТатНИИСХ. По результатам оценки районированных сортов на присутствие гена устойчивости к твердой головне с использованием маркеров UhR450, OPO6780 и OPJ10450 было установлено, что все 9 образцов являются гетерозиготными. В свою очередь, в описании сортов Рахат и Раушан указано, что они слабовосприимчивы к твердой головне, а сорта Аннабель и Гелиос характеризуются как устойчивые к этому заболеванию, что может объясняться присутствием доминантных генов UhR450 и OPO6. По Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" результатам молекулярно-генетической оценки сортов из коллекции ТатНИИСХ было установлено, что по совокупности активных аллелей гена устойчивости/восприимчивости к твердой головне, все исследованные сорта из коллекции являются гетерозиготными.

Полученные результаты в целом подтверждают данные по сортам, приведенные в Реестре селекционных достижений.

Таким образом, проведенные исследования по оценке сортов ячменя на устойчивость к каменной головне позволяют сделать вывод о перспективности подобных исследований для селекционной работы. На основании молекулярно-генетического анализа можно выделять как сорта, так и сортообразцы для дальнейшего селекционного отбора.

Литература 1. Ardiel, G.S. Inheritance of resistance to covered smut in barley and development of a tightly linked SCAR marker / G.S. Ardiel, T.S. Grewal, P.

Deberdt, B.G. Rossnagel, G.J. Scoles // Theor Appl Genet – 2002. – V. 104 – P. 457–464.

2. Grewal, T.S. Mapping of a covered smut resistance gene in barley (Hordeum vulgare) / T.S. Grewal, B.G. Rossnagel, G.J. Scoles // Can. J.

Plant Pathol. – 2004. – V. 26 – P. 156–166.

3. Grewal, T.S. Identification of resistance genes to barley covered smut and mapping of the Ruh1 gene using Ustilago hordei strains with defined avirulence genes / T.S. Grewal, B.G. Rossnagel, G. Bakkeren, G.J. Scoles // Can. J. Plant Pathol. – 2008. – V. 30 – P. 277–284.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ИННОВАЦИОННАЯ ПРОГРАММА ИНФЕКЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ПРЕПАРАТОВ КРОВИ Гаджимурадов М.Н., Умаханов А.Х., Темиров Т.А., Муслимов М.О.

ГБУ РД «Республиканский кожно-венерологический диспансер» МЗ РД, г. Махачкала gabenu@mail.ru Ввиду напряженной эпидемиологической обстановкой по ВИЧ-инфекции, вирусным гепатитам и сифилису Минздрав РФ совместно с Федеральным медико-биологическим агентством (ФМБА) с 2008 года начали реализацию масштабной Федеральной программы по инфекционной безопасности препаратов донорской крови. К 2012 году в ней планируется задействовать все 83 субъекта Российской Федерации, включая 96 региональных и 11 федеральных учреждений Службы крови.

В связи с этим одним из направлений реализуемой программы является создание Единого донорского центра (ЕДЦ) с автоматизированной системой регистрации в компьютерной базе данных. Данные о пациенте будут поступать в ЕДЦ ФМБА из всех регионов РФ, и безопасный забор крови можно будет производить вне зависимости от места прописки донора. Республиканская станция переливания крови (РСПК) Минздрава Республики Дагестан вошла в программу с 2009 года. В РСПК донорский учет ведется с оформления на каждого донора «Учетной карточки донора», включающей в себя паспортные данные и отметку о количестве сданной крови, ее компонентах. Одновременно сведения о доноре заносятся и в электронную базу данных. Оперативный обмен информацией о больных сифилисом и серопозитивных пациентах, между базами данных РКВД и РСПК осуществляется в режиме реального времени, через коммуникационный сервер. Автоматизированная система «АИСТ» позволяет использовать практически любую вычислительную технику и может эксплуатироваться пользователем с минимальным объемом знаний в области вычислительной технике. Система защищена от несанкционированного доступа;

каждый пользователь имеет свой уровень доступа, обусловленный его должностью и степенью участия.

Ведется учет всех операций, которые проводились с электронными записями пациента. Экранная форма программы спроектирована так, что большинство операций можно было производить с помощью клавиатуры, не прибегая к помощи мыши. Но, при желании двойным Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" кликом мыши по соответствующей записи в таблице – справочнике осуществляется перенос выбранного значения в поле ввода. Если пациент «аноним», в графе «Фамилия» указывается слово «Аноним», но ввиду того, что представлять информацию об анонимно выявленных больных в РСПК нет смысла, это является чисто формализованным оформлением в базе данных всех больных с диагнозом сифилис.

Формирование и просмотр отчетных форм в программе осуществляется в книжном и альбомном формате, исходя из количества и размера столбцов таблицы. Предусмотрена возможность публикации таблицы в документ Word. Но так как отчетные формы имеют неказистый вид (универсальность и безымянность), они пригодны лишь как рабочие или черновые документы.

У РКВД и РСПК налажена также и обратная связь, по которой поступают сведения о больном сифилисом доноре, сдавшем кровь в серонегативном периоде сифилиса. Указываются ЛПУ, которые в течение года, до выставления диагноза сифилиса, получили компоненты и препараты его крови. Их реципиенты привлекается к обследованию антител возбудителя сифилиса в сыворотке крови. За 11 месяцев года в ЕДЦ РСПК из РКВД была представлена информация о больных сифилисом пациентов, из них 14 пациентов были отведены от донорства при сдаче крови в РСПК. Заразность крови в инкубационном и первичном серонегативном периодах, которые охватывают начальный временной отрезок заболевания длительностью 6-7 недель от момента заражения, представляет собой одну из нерешенных проблем трансфузиологии. Зарубежные тест-системы, позволяющие на 3-й неделе выявить сифилитическую инфекцию, дорогостоящие, а отечественные несовершенны. Выявить сифилис у донора удаётся обычно через 3 – 8 и более месяцев после кроводачи. Практика лечения сифилиса частнопрактикующими врачами не обеспечивает качество необходимой эпидемиологической работы, что делает неизбежным случаи, когда реципиенты, подлежащие лечению, его не получают. Не все ОПК при лечебных учреждениях Дагестана имеют необходимое компьютерное оснащение и поэтому оперативная электронная связь с ЕДЦ РСПК МЗ РД не налажена, что не позволяет в полной мере обеспечить инфекционную безопасность компонентов и препаратов крови региона.

Констатируя вышесказанное, можно отметить, что внедрение автоматизированной системы позволяет учитывать и отслеживать донорские материалы в режиме реального времени, обеспечить эффективное управление ресурсами службы крови в масштабах города, региона, страны.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" Но, несмотря на модернизацию средств хранения и передачи информации, сократив до минимума сроки передачи информации из кожно-венерологического учреждения на станцию переливания крови, явных результатов в деле безопасности донорской крови на наш взгляд в ближайшее время ожидать не стоит, пока остаются нерешенными проблемы передачи сифилиса трансфузионным путем, через препараты крови, возможность донорства для лиц, перенесших сифилис, у которых негативировались все серореакции.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ФОСФАТАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ И ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ БЕЛКОВ ПО ТИРОЗИНУ ПРИ ДЕЙСТВИИ ВОЛЬФРАМАТА НА КОРНИ ГОРОХА Газизова Н.И., Каримова Ф.Г.

ФГБУН КИББ КазНЦ РАН natgazizova@mail.ru Фосфорилирование/дефосфорилирование белков является важным механизмом сигналинга и регуляции многих клеточных процессов в ответных реакциях растений на действие абиотических стрессоров.

Фосфорилирование-дефосфорилирование белков регулируется ферментами-антагонистами: протеинкиназами, осуществляющими фосфорилирование и протеинфосфатазами, осуществляющими дефосфорилирование. Фосфорилирование белков по тирозину критично для клеточной пролиферации и дифференцировки, следовательно, для роста растений. Активность тирозиновых протеинфосфатаз (ТПФ), значительно превышающая активность протеинкиназ (ТПК), подавляется рядом специфических ингибиторов, в том числе и соединениями тяжелых металлов. Однако такие данные, полученные на растениях, весьма малочисленны.

Антропогенная эмиссия в окружающую среду тяжелых металлов (ТМ) оказывает негативное воздействие на растения, приводя к нарушению процессов метаболизма, роста и развития. Вольфрам широко используется в тяжелой, легкой и военной промышленности. Он может содержаться в фосфорных удобрениях и бытовых отходах. Исследования последних лет показали, что соединения этого ТМ токсичны как для животных, так и для растений (1, 2).

В связи с вышеизложенным целью данной работы явилось исследование влияния вольфрамата натрия на фосфатазную активность и уровень фосфорилирования белков корней гороха по тирозину.

Растения гороха выращивали на среды Хогланда-Арнона (освещенность 10 000 Люкс, 12-часовой фотопериод). В возрасте 7-ми дней часть растений переносили на среду роста с добавлением вольфрамата натрия до конечной концентрации 10-6 М, 10-4 М и 10-2 М опытные растения или на среду роста без вольфрамата - контрольные растения.

Фосфатазную активность оценивали как способность супернатанта, Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" полученного после гомогенизации 0,8 см кончиков корней в среде, содержащей 50 мМ HEPES-KOH, рН 7.5, 1 мМ ДТТ, 1 мМ фенилметилсульфонилфторид (ФМСФ), 10 мМ ЭГТА, 1 мМ теофиллин, гидролизовать паранитрофенилфосфат (пНФФ) при кислом (5,3) и близком к цитоплазматическому (7,4) значениях pH реакционной среды.

Скорость реакции рассчитывали после измерения изменения оптической плотности раствора при 410 нм на спектроэлектрофотометре (Perkin Elmer, США) с использованием специального пакета программ.

Фосфатазную активность выражали в мг паранитрофенола, образованного за 1 мин действия фосфатаз на 1 мг белка.

Для определения удельного тирозинового фосфорилирования (УТФ) белки разделяли методом 2DE и блоттировали со специфичными к фосфотирозину антителами PY20 (Amersham, Англия) как описано ранее (3).

На рис.1 представлены данные по влиянию вольфрамата на фосфатазную активность растворимой фракции белков корней гороха. Из данных следует, что вольфрамат уже в концентрации 10-6 М через 10 мин понизил фосфатазную активность на 40% и 33% при pH 5,3 и 7,4, соответственно, а через 1 час – на 61% и 22%. При 10 мин экспозиции корней в 10 -4 М вольфрамате фосфатазная активность при pH 5, снизилась на 49%, при pH 7,4 - на 12%, через 1 час – на 73% и 46%, соответственно. Самое сильное влияние оказал 10-2 М вольфрамат: при pH 5,3 фосфатазная активность снизилась на 66% и 77%, соответственно за 10 мин и 1 час действия вольфрамата, а при pH 7,4 - на 20% и 65%.

6-ти час экспозиция корней в 10 -4 М и 10 -2 М вольфрамате привела к дальнейшему усилению ингибирования фосфатазной активности, особенно в варианте с 10-2 М вольфраматом. В этом варианте активность фосфатаз при pH 5,3 снизилась на 95%, а при pH 7,4 - на 84% по сравнению с соответствующим контролем. Таким образом, наши данные свидетельствуют о концентрационной и временной зависимости подавления фосфатазной активности вольфраматом.

На основании полученных ранее методом 1DE данных о временной динамике уровня УТФ полипептидов корней гороха под влиянием вольфрамата, в настоящей работе был определен уровень УТФ отдельных белков корней методом 2DE через 10 мин и 6 час действия 10 -4 М вольфрамата (табл.1). Через 10 мин под влиянием вольфрамата наблюдали 1,5-кратное увеличение числа фосфотирозиновых белков и повышение УТФ более чем у 30% белков. Увеличение времени действия до 6 час индуцировало еще большее повышение как числа фосфотирозиновых белков, так и их УТФ;

а у 7-ми белков наблюдалось Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" 2-7-кратное увеличение УТФ.

Таблица 1. Влияние вольфрамата (10-4 М) на удельное тирозиновое фосфорилирование (УТФ) растворимых белков корней гороха, разделенных методом 2Д-электрофореза.

Время обработки № пятна на 10 минут 6 часов 2Д-геле контроль вольфрамат контроль вольфрамат 1 - - - 8, 2 - - - 14, 3 - - - 52, 4 1,23 3,34 2,58 3, 5 - - - 1, 6 2,61 5,71 5,17 8, 7 - 2,94 2,40 3, 8 2,28 3,25 1,78 3, 9 3,12 4,38 2,86 6, 10 2,96 2,49 2,05 8, 11 2,75 1,69 2,24 16, 12 - 3,61 - 6, 13 - 1,36 6,89 5, 14 3,36 7,87 15,07 21, 15 2,96 9,42 48,54 18, 16 - - - 2, 17 4,53 19,45 40,03 16, 18 1,32 2,58 3, 19 0,38 1,51 6,45 1, 20 0,84 0,76 1,48 1, 21 - - - 3, 22 1,82 0,62 0,69 1, 23 1,01 1,28 1,85 2, 24 6,50 - 24,12 25 8,24 - 59,29 26 - 5,96 - 22, 27 - 6,21 - 15, 28 - 2,52 7,29 8, 29 - 2,25 12,46 6, 30 - 5,22 7,08 15, 31 0,65 0,82 1,24 1, 32 1,43 1,02 2,02 2, 33 - - 7,62 34 - - 11,59 35 5,73 20,36 18,99 44, 36 - 19,90 25,57 41, 37 - 0,38 1,99 2, Итак, мы провели параллельное определение общей фосфатазной активности в том же супернатанте из корней гороха, который использовали для разделения белков методом 2DE и их иммуноблотинга, Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" и выявили ее значительное подавление (рис. 1). В значение общей фосфатазной активности, определяемой с помощью пНФФ, вносят вклад и ТПФ (4). Данные 2DE по изменению УТФ ПП, обратно коррелирующие с изменением фосфатазной активности растворимой фракции белков за наблюдаемое время в одном и том же эксперименте, свидетельствуют о подавлении вольфраматом активности ТПФ, что и вызвало увеличение числа фосфотирозиновых белков и их УТФ. Ингибирование активности этих ферментов, вовлеченных в регуляцию многих процессов, вероятно, может быть одной из причин токсического действия вольфрамата на растения.

Рис. 1. Влияние вольфрамата натрия на фосфатазную активность растворимой фракции белков корней гороха: А – рН реакционной среды 5,3;

Б – рН реакционной среды 7, Литература 1. Van der Voet, G., Todorov, T.I., Centeno, J.A., Jonas, W., Ives, J., Mullick, F.G. Metals and Health: a Clinical Toxicological Perspective on Tungsten and Revive of the Literature // Milit. Med. 2007. V. 172. P. 1002-1005.

2. Johnson, D.R., Inouye, L.S., Bednar, A.,J., Clarke, J.U., Winfield, L. E., Boyd, R.E., Ang, C., Y., Goss, J. Tungsten Bioavailability and Toxicity in Sunflowers (Hellianthus annuus L.) // Land Cont. & Reclam. 2009. V. 17. P.

141-151.

3. Петрова Н.В., Каримова Ф.Г. Влияние редокс-агентов на фосфорилирование белков по тирозину в корнях гороха // Физиология растений. 2011. Т.58. С. 750-757.

4. Guo Y.- L., Roux S.J. Partial Purification and Characterization of an Enzyme from Pea Nuclei with Protein Tyrosine Phosphatase Activity // Plant Physiol. 1995. V. 107. P. 167-175.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ОЦЕНКА НЕКОТОРЫХ ПАРАМЕТРОВ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА У СПОРТСМЕНОВ-ЛЕГКОАТЛЕТОВ Ганеева Л.А., Скрипова В.С., Абрамов С.Н., Касатова Л.В., Набиуллина Р.М.

КФУ, кафедра биохимии, Институт ФКСиВМ, КГМУ vsk190@gmail.com Одной из сфер, в которой активно реализуются молодые люди, является спорт высших достижений. Известно, что напряженная мышечная деятельность сопровождается значительными метаболическими и гематологическими изменениями. Длительное функционирование организма в подобных условиях может явиться причиной истощения его функциональных резервов, выраженной в состояниях физического перенапряжения и перетренированности. Такие биохимические показатели, как уровень лактата и активности лактатегидрогеназы, позволяют уже на ранней стадии диагностировать признаки переутомления и вносить коррективы в тренировочный процесс, применять необходимые реабилитационные средства.

ЛДГ, катализируя восстановление пирувата в лактат, является важным биохимическим показателем в спортивной диагностике. Уровень его активности определяет готовность анаэробной системы энергообеспечения организма спортсмена к высокой физической нагрузке. Существует сильная связь между работоспособностью организма и уровнем активности ЛДГ.

L-Лактат является продуктом анаэробного гликолиза, который образуется из пирувата под действием ЛДГ. Являясь конечным продуктом тканевого обмена глюкозы, он содержится в крови, слюне, моче и кожном экскрете и входит в число наиболее важных для анализа веществ. Данные о концентрации лактата в крови необходимы при мониторинге нехватки кислорода в клинической медицине и спортивной физиологии. Лактат венозной крови является ценным диагностическим тестом для оценки шока и гипоксии. В спортивной физиологии уровень лактата отражает способность спортсмена переносить физические нагрузки, а его динамика свидетельствует об улучшении или ухудшении физической подготовки.

Известно, что общепринятой практикой исследования молочной кислоты является ее определение в крови, что требует привлечения Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" квалифицированного медицинского персонала, соблюдения жестких санитарно-гигиенических норм и доставляет немало трудностей в согласовании этических правил по забору крови. Упростить процедуру анализа возможно при использовании легкодоступных биологических жидкостей, например, пота. Вместе с водой потовые железы выделяют самые разные продукты обмена веществ: мочевину, некоторые соли, мочевую кислоту и лактат. Следовательно, использование пота как субстрата, где возможно определение молочной кислоты, является удобным и экономичным методом. Кроме того, исследователями показана корреляция между содержанием лактата в поте и в крови.

В связи с этим, целью данной работы явилось определение количества молочной кислоты у спортсменов-легкоатлетов в потовых выделениях на фильтрах, сравнение возможностей использования двух видов фильтров для сбора потовых выделений, а также определение активности ЛДГ в крови.

В эксперименте приняли участие спортсмены-легкоатлеты в возрасте 20 лет. Они выполняли физическую нагрузку согласно назначенному протоколу. Контрольную группу составили добровольцы-юноши и девушки того же возраста. Определение уровня лактата проводили при помощи тест-системы энзиматическим колориметрическим методм в растворе потовых выделений, который получали из фильтров путем элюации. В своей работе мы использовали фильтры двух видов:

бумажные и мембранные фильтры «Synpor». Они фиксировались в подмышечной впадине при помощи лейкопластыря.

Сравнительный анализ полученных данных по исследованию лактата на двух типах фильтров позволил отдать предпочтение бумажным фильтрам при использовании их в качестве диагностического материала, поскольку воспроизводимость результата и достоверность данных была значительна выше. Скорее всего, используемые мембранные фильтры не обладают способностью адсорбировать на своей поверхности лактат.

Данный метод анализа требует дополнительной оптимизации.

Определение ЛДГ проводили в плазме крови после продолжительной физической нагрузки с помощью тест-ситемы кинетическим спектрофотометрическим методом согласно реакции:

пируват + НАДН + H+ ЛДГ лактат + НАД+ (скорость окисления НАДН в НАД+ пропорциональна активности ЛДГ в пробе). Активность ЛДГ составила: в контрольной группе 543,13±14, МЕ/л, в группе спортсменов-легкоатлетов 629,95±12,2 МЕ/л.

Повышенные значения активности ЛДГ говорят об адаптации организма к перенесенной физической нагрузке. Более высокие значения Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" активности фермента в группе спортсменов говорит о большей способности их анаэробной системы энергообеспечения адаптироваться к физической нагрузке. Полученные нами данные согласуются с результатами, проведенными другими исследователями.

Определение основных биохимических параметров энергетического обмена, таких как лактат л и активность ЛДГ, являются значимыми диагностическими критериями для спортсменов-легкоатлетов. Они важны для мониторинга как физического состояния спортсменов, так и для подбора оптимального вида физических нагрузок при тренировках в спорте высоких достижений. Кроме того, внедрение оптимизированных неинвазивных методов анализа делает осуществление диагностики удобнее и проще.

Литература 1. О.А. Бутова, С.В. Масалов. Адаптация к физическим нагрузкам:

анаэробный метаболизм мышечной ткани // Вестник Нижегородского Университета им. Н.И. Лобачевского, -2011.-№1.-С. 123-128.

2. О.А. Бутова, С.В. Масалов. Активность лактатдегидрогеназы как показатель метаболизма мышечной ткани у спортсменов высокой квалификации // Ж-л Физиология человека, -2009.-№ 1.-С.141-144.

3. Сахаров Д.А., Шкурников М.Ю., Вагин М.Ю., Яшина Е.И., Карякин А.А.,Тоневицкий А.Г. Взаимосвязь концентраций лактата в поте активной мышцы и в цельной крови // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, - 2010.-№ 7.-С.94-96.

4. Van Montfoort et al. Effects of Ingestion of bicarbonate, lactate and chloride on Sprint Running. // Medicine Sci. Sports Exurc. - 2004.-V. 36(7).

-P. 1239-1243.

5. Попцов В. Н. Некоторые аспекты спортивной физиологии применительно к видам спорта на выносливость. // Журнал «Лыжные гонки».-1998.-№ 1-7.-С. 3-8.

6. Янсен П. ЧСС, лактат и тренировки на выносливость: Пер. с англ. Мурманск: Изд-во «Тулома», 2006. - 160 с.

7. Загородный Г. М., Лосицкий Е. А., Пристром С. Л. Программа комплексного тестирования спортсменов (методические указания для спортивных врачей). -Минск, 2003. - 23 с.

Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИЗОЛЯТОВ ВЛКРС, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ В ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ ХОЗЯЙСТВАХ РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН Гараева З.Р., Шаева А.Ю., Вафин Р.Р., Хазипов Н.З., Зайнуллин Л.И.

Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана, Казанский (Приволжский) федеральный университет zuhr89@mail.ru Целью настоящей работы являлся филогенетический анализ изолятов BLV, циркулирующих в животноводческих хозяйствах Республики Татарстан на предмет их таксономической классификации и совершенствование способов генотипической идентификации ВЛКРС по локусу env-гена.

В результате филогенетического анализа выравненных нуклеотидных последовательностей локуса env-гена типовых представителей известных генотипов BLV было установлено, что изолят «N28» (GenBank A/N:

HM102356), выявленный в Спасском районе Республики Татарстан, принадлежал к кластеру 7-го генотипа, а изоляты «N10» (GenBank A/N:

HM102355) и «N72» (GenBank A/N: JF683619), обнаруженные соответственно в Мензелинском и Дрожжановском районах Республики Татарстан, относились к 4-му генотипу ВЛКРС.

Еще один изолят «N174» (GenBank A/N: JF713455), также выявленный в Дрожжановском районе характеризовался признаком нового генотипа BLV, обозначенного нами «8-й генотип», ввиду формирования на выстраиваемой дендрограмме автономного генотипического кластера, в который также входили близкородственных изолята («4-1» и «3-41»), выявленных в Украине, и изолятов ВЛКРС, обнаруженных в Хорватии.

Следует подчеркнуть, что факт существования обоснованного нами нового генотипа BLV {1] чуть позже был подтвержден Хорватскими исследователями [2].

Также, в рамках совершенствования схемы ПЦР-ПДРФ-генотипирования, согласующейся с филогенетической классификацией BLV, нами были подобраны новые условия идентификации по 5 эндонуклеазам рестрикции: PvuII, SspI, HphI, HaeIII и BstYI.

Таким образом, на основании филогенетического анализа Интернет-конференция "Актуальные проблемы биохимии" секвенированных последовательностей локуса env-гена провируса ВЛКРС, наряду с 4-ым и 7-м генотипами, выявлен новый 8-й генотип BLV, циркулирующий в Республике Татарстан, а также усовершенствована схема ПЦР-ПДРФ-генотипирования ВЛКРС в соответствии с филогенетической классификацией данного возбудителя.



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 9 |
 

Похожие работы:







Загрузка...
 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.